腔阔盘吸虫在贝类宿主体中发育的组织学研究

目的　为了解腔阔盘吸虫在贝类宿主体内发育的组织学情况。方法　用腔阔盘吸虫 (Eurytremacoelomaticum)虫卵人工感染同型阔纹锅牛BradybaenasimilarisFerussac后在不同时间里固定蜗牛 ,经石蜡包埋 ,连续切片、苏木精伊红复染 ,观察腔阔盘吸虫在蜗牛体内的发育变化。结果与结论　感染后 5～ 12天为早期母胞蚴阶段 ,感染 15天母胞蚴体内开始出现子胞蚴的胚球 ,2 9天的母胞蚴增大明显 ,胚球数目增多 ;40天的母胞蚴布满肠壁周围 ,胚球两端拉长 ;47天的母胞蚴体内的子胞蚴胚球增大明显 ,已出现内外囊壁的分化 ,内囊壁包围着胚细胞组成的中心区域 ;感染 91天的子胞蚴体内出现尾蚴胚体 ;118天的子胞蚴体内的尾蚴已经成熟 ,子胞蚴移向呼吸腔     

野生及家养动物寄生阔盘属吸虫系统发生关系初步研究

本文对普遍寄生于家畜及野生动物胰脏并引起胰吸虫病的几种阔盘属(Eurytrema)吸虫:腔阔盘吸虫(Eurytremacoelomaticum)、胰阔盘吸虫(Eurytremapancreaticun)、枝睾阔盘吸虫(Eurytremacladorchis)及福建阔盘吸虫(Eurytremafukienensis)的系统发生关系进行比较研究。分别提取寄生于不同种类宿主的这4种胰吸虫的基因组DNA ,利用随机引物进行PCR扩增,从80个随机引物中筛选出重复性好、谱带清晰并呈多态性的引物31个,共扩增出30 3条DNA带。根据重复性好、谱带清晰并呈多态性的引物扩增的结果计算遗传距离,根据遗传距离利用UPGMA方法进行聚类分析,构建出阔盘属几种吸虫的系统发生树,分子系统发生与形态学分类一致。     

武汉市观赏动物体内寄生虫调查及一新种描述

本文报道了武汉市中山公园动物园观赏动物体内寄生虫调查结果。检查动物49种195只,获体内寄生虫39种,隶属26科31属。其中,原虫10种、吸虫10种(包括鹿阔盘吸虫1新种)、绦虫4种、线虫15种;感染率88.21％(172/195);人兽互通寄生虫占53.85％(21/39)。     

曼氏裂头蚴cDNA文库的构建及诊断候选抗原筛选

目的　构建曼氏裂头蚴cDNA文库,通过免疫筛选获得曼氏裂头蚴病诊断候选抗原基因。方法　提取曼氏裂头蚴虫体总RNA,反转录合成cDNA,连接噬菌体载体,经体外包装后构建曼氏裂头蚴SMART cDNA文库。用曼氏裂头蚴病患者血清免疫筛选cDNA文库,获得阳性克隆,测定阳性克隆插入片段的DNA序列,进行同源性分析并预测编码蛋白的结构和功能。结果　成功构建了曼氏裂头蚴cDNA文库,文库滴度为6.25 × 106 pfu/mL,重组率为100%,文库插入片段的平均长度大于1 100 bp。经免疫筛选获得12个阳性克隆,分为Sm⁃Ⅰ、Sm⁃Ⅱ、Sm⁃Ⅲ和Sm⁃Ⅳ4类,其代表克隆为Sm60⁃1、Sm58⁃1、Sm20⁃1、Sm22⁃3,插入片段长度分别为1 134、1 063、883、969 bp,编码蛋白分别与欧猥迭宫绦虫抗原多肽、胞质抗原、核糖体蛋白S4样蛋白和未命名蛋白具有较高同源性。结论　成功构建了曼氏裂头蚴SMART cDNA文库,获得了4类阳性克隆,为曼氏裂头蚴病诊断抗原的进一步研究奠定了基础。     

野生及家养动物胰吸虫病原DNA多态性的比较研究

目的　对引起家畜及野生动物胰吸虫病的阔盘属吸虫 :腔阔盘吸虫 ,胰阔盘吸虫及分别来自牛、羊和野生动物山麂的枝睾阔盘吸虫基因组DNA多态性进行比较分析。方法　分别提取这五类胰吸虫的基因组DNA ,利用 10碱基随机引物进行RAPD -PCR扩增反应 ,选取重复性好、谱带清晰并呈多态性的引物 ,根据这些引物扩增的谱带利用UPGMA方法进行聚类分析。结果　从 6 0个随机引物中筛选出重复性好、谱带清晰并呈多态性的引物 2 2个 ,共扩增出 199条DNA带 ,其中多态性位点 114个 ,占 5 7 3% ,羊枝睾阔盘吸虫和麂枝睾阔盘吸虫的遗传距离最近 ,腔阔盘吸虫和麂枝睾阔盘吸虫的遗传距离最远。结论　寄生在野生动物山麂的枝睾阔盘吸虫与寄生在家养动物的几种胰吸虫具有很高的DNA多态性     

湖南省怀化地区山羊胰阔盘吸虫线粒体pcox1基因和核糖体18S rRNA基因序列遗传变异研究

目的　了解湖南省怀化地区山羊体内分离的胰阔盘吸虫遗传变异情况。方法　应用PCR技术对分离自湖南怀化地区山羊体内的18株胰阔盘吸虫分离株线粒体细胞色素c氧化酶亚基I基因部分序列（pcox1）和核糖体18S rRNA基因进行扩增,对扩增产物进行测序并进行遗传变异和系统发育分析。结果　分离自湖南怀化地区山羊体内的18株胰阔盘吸虫分离株pcox1和18S rRNA基因序列长度分别为430 bp和1 857 bp,分别存在14个和35个变异位点,种内遗传差异分别为0 ~ 1.4%和0 ~ 0.8%;与GenBank数据库中收录的胰阔盘吸虫中国株基因序列同源性最高,分别为99.0% ~ 99.8%和99.5% ~ 99.8%。基于两种基因构建的系统发育树分析结果一致,本研究获得的18株胰阔盘吸虫分离株与GenBank数据库中已知胰阔盘吸虫分离株聚为同一分支,与支睾阔盘吸虫等阔盘属吸虫相隔较近,与其他吸虫所属分支相隔较远。结论　湖南省怀化地区山羊源胰阔盘吸虫分离株遗传变异度较低,线粒体pcox1基因和核糖体18S rRNA基因均适合作为羊源胰阔盘吸虫遗传变异研究的分子标记。     

Comments on human eurytremiasis in Brazil

Eurytremiasis is an important parasitic disease of cattle that was recently suggested to be a neglected and emerging human disease in Brazil. Based on a misinterpretation of the life cycle of the parasite, it was suggested that a great number of people could be infected with this fluke in the country. In the present letter, aspects of the life cycle of Eurytrema spp. are revisited and clarified. The mechanism of transmission previously reported for the few accidental human cases involved the ingestion of raw or undercooked insects (grasshoppers and crickets) harboring the infective metacercariae. In reality, the zoonotic potential of Eurytrema species is extremely low, and human eurytremiasis is not, and probably never will be, a zoonotic disease in countries where entomophagy is not a common food habit.     

淮南发现胰阔盘吸虫

目的:了解淮南地区山羊寄生蠕虫的感染情况。方法:采用蠕虫学剖解法对淮南市窑河沿岸居民饲养的患羊进行随机剖检,获得的虫体经固定、染色后制片,镜下鉴定。结果:在患羊胰管内检出6条血色样的半透明虫体,经鉴定为胰阔盘吸虫成虫。结论:淮南地区居民饲养的山羊体内存在胰阔盘吸虫的感染,应加强胰阔盘吸虫的控制和宣传教育工作。     

亲和层析纯化胰吸虫抗原免疫活性的鉴定

本文采用对流免疫电泳、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和免疫印渍技术对亲和层析纯化胰吸虫抗原（ＥＰＰ）的免疫活性作了初步鉴定。结果显示：ＥＰＰ与兔免疫血清在对流免疫电泳中出现沉淀线，ＥＰＰ经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、考马斯亮蓝Ｒ－２５０染色后显示４条蛋白多肽，分子量约为５９～６２、４９、２７～２９、１５ＫＤ；转印至ＮＣ膜上的ＥＰＰ与兔免疫血清呈现２条带，分子量为４９、２７ＫＤ，而与胰吸虫病牛血清则主要出现４９ＫＤ的反应带：揭示该亲和层析纯化抗原具有免疫诊断价值。     

利用RAPD技术对胰阔盘吸虫和腔阔盘吸虫基因组DNA扩增的实验

利用RAPD技术,对胰阔金吸虫和胚阔盘吸虫两种吸虫的基因组DNA进行了扩增比较。对25种随机引物进行了筛选,得到一些能够对胰阔盘吸虫基因组DNA扩增的引物．并且利用三种引物对胰阔盘吸虫群体内个体间基因组DNA多态性进行了检测,以期能够利用RAPD技术对胰阔盘吸虫群体遗传结构进行研究。