极化心脏停搏液对成熟心肌细胞保护作用的研究

目的观察Na＋通道阻滞剂河豚毒素（TTX）极化心脏停搏液对离体成熟大鼠心肌细胞[Na＋]i、[Ca2＋]i的影响,探讨其对成熟心肌细胞的保护作用。方法成年Wistar大鼠心脏,用酶解法分离成具有搏动性的单个成熟心室肌细胞悬液,随机分成基础组、STH2组（对照组）和TTX组（实验组）,STH2组和TTX组分别应用St.Thomas II号停搏液和TTX停搏液处理,建立模拟缺血/再灌注损伤的停搏/复搏细胞模型,激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）测定各组细胞不同时期的[Na＋]i和[Ca2＋]i。结果 TTX组和STH2组成熟心肌细胞复搏后[Na＋]i、[Ca2＋]i均明显高于基础组（P〈0.01）,但TTX组明显低于STH2组（P〈0.01）。结论极化心脏停搏液较去极化心脏停搏液能减轻成熟心肌细胞Na＋、Ca2＋超载,对成熟心肌细胞有较好的保护作用。     

乙酰胆碱对大鼠腹腔巨噬细胞内钙离子浓度和表面Ia抗原表达的影响

用Ｆｕｒａ－２作为荧光探针测定大鼠腹腔巨噬细胞（Ｍ）内钙离子浓度（［Ｃａ￣（２＋）］ｉ），ＡＰＡＡＰ桥联酶标法检测Ｍ表面Ｉａ抗原的表达。结果表明：５×１０￣（－６）ｍｏｌ／Ｌ的乙酞胆碱（Ａｃｈ）可使Ｍ［Ｃａ￣（２＋）］ｉ；明显上升，可促进Ｍ表面Ｉ－Ａ和Ｉ－Ｅ抗原的表达，而阿托品（１０￣（－５）ｍｏｌ／Ｌ）可阻断Ａｃｈ升高［Ｃａ￣（２＋）］ｉ的作用。阿托品、三氟啦嚎（ＴＦＰ，５０μｍｏｌ／Ｌ）、ＥＧＴＡ（６ｍｍｏｌ／Ｌ）均可阻断Ｍ促进ＭＩａ抗原表达的作用，ｃＡＭＰ依赖性蛋白激酶抑制剂（ＰＫＩ，２５μｇ／ｍｌ）对Ａｃｈ促进ＭＩａ抗原表达的作用无影响。     

右心室肥厚和衰竭心肌细胞Ca 2+稳态变化的研究进展

右心室肥厚（right ventricular hypertrophy, RVH）和右心室衰竭（right ventricular failure, RVF）是具有致命性的恶性心脏疾病,肺动脉高压（pulmonary arterial hypertension, PAH）是主要的致病因素。大量研究已经发现,Ca ...     

牙龈卟啉单胞菌重组牙龈蛋白酶刺激牙龈成纤维细胞内钙离子浓度变化及其机制

目的：探讨牙龈卟啉单胞菌重组牙龈蛋白酶（rRgpB）刺激蛋白酶激活受体（PAR）介导的人牙龈成纤维细胞（HGF）内钙离子浓度（[Ca ²⁺] _i）的动态变化及细胞内信号转导通路。 方法：流式细胞术检测 HGF 表达的 PAR 类型，CCK-8 法检测细胞增殖，以牙龈卟啉单胞菌rRgpB作用于 HGF，激光共聚焦显微镜观察 HGF 内[Ca ²⁺] _i的动态变化及 PAR-1 拮抗剂的阻断作用；蛋白质印迹法检测 HGF 内 c-Jun 氨基末端激酶（JNK）、胞外信号调节激酶 1/2（ERK1/2）、p38 丝裂原激活的蛋白激酶（p38 MAPK）、p65 蛋白水平的变化。 结果：HGF 表达 PAR-1 和 PAR-3，且 rRgpB 可促进 HGF 生长。细胞受到 rRgpB 作用后能激发瞬时增强的[Ca ²⁺] _i荧光信号，并且这种作用能够被 PAR-1 拮抗剂完全阻断；与空白对照组比较，rRgpB 诱导细胞6、12 h后，JNK、ERK1/2、p65 磷酸化蛋白表达均显著上调（均 P<0.05），但 p38 MAPK 磷酸化蛋白水平未见明显变化（ P>0.05）；PAR-1 拮抗剂成功抑制了 rRgpB 诱导的 JNK、ERK1/2、p65 磷酸化蛋白表达的上调。 结论：rRgpB 通过 PAR-1 诱导 HGF 内[Ca ²⁺] _i增加，并激活细胞内 JNK、ERK1/2、核因子κB 信号通路。     

衰老大鼠心肌细胞器形态的定性定量改变及其调控钙离子能力分析

目的　探讨心肌衰老机制。　方法　采用 Wistar大鼠 ,分老龄组 (2 2月龄 )和成年组 (7月龄 )。用透射电镜观察心肌细胞器形态定性改变 ;用体视学方法测定心肌细胞器形态定量改变 ;用 X射线能谱仪分析心肌细胞器调控 Ca2 +能力。　结果　与成年组比较 ,老龄组大鼠心肌改变 :(1)核有切痕、肌原纤维不规整、闰盘离解、线粒体和肌浆网肿胀、脂褐素和残余体增多。(2 )在心肌组织内 ,非肌细胞所占体积份数增加 ,线粒体和肌浆网体密度减少 ,线粒体外膜比面积、内膜 +嵴比面积、肌浆网比面积减少。(3)在舒张状态下 ,肌原纤维和线粒体内 Ca2 +增加 ,肌浆网内 Ca2 +减少。　结论　衰老心肌的舒缩力减退 ,心肌细胞器形态呈明显改变 ,心肌衰老与线粒体和肌浆网的形态改变及其调控 Ca2 +能力有直接关系。     

血链球菌细菌素对念珠茵细胞表面疏水性和细胞膜钙离子通透性的影响

目的：研究血链球菌细菌素对单独及混合培养的白色念珠菌（C．a）及热带念珠菌（c．t）细胞表面疏水性的影响。研究血链球菌细菌素对单独及混合培养的白色念珠菌（C．a）及热带念珠菌（C．t）细胞膜钙离子通透性的影响。方法：复苏并传代血链球菌标准株ATCCl0556,通过低温高速离心,细胞破碎等方法提取血链素,使其作用于1×10。du／mL单独及混合培养的C．a及C．t,于37℃,80r／min振荡培养。1）采用二倍稀释法,测定血链素对C．a及C．t最小抑制浓度（MIC）;2）运用微生物黏着碳氢化合物的方法[1],用紫外分光光度计测A值,计算C．a及c．t的疏水率;3）分别向单独及混合培养的C．a及C．t菌悬液中装载钙离子荧光探针（Fluo-3AM）,利用激光共聚焦显微镜观察血链素作用后的C．a及C．t细胞内钙离子浓度的变化。结果：血链素对单独培养的C．a及C．t的MIC为0．25g／L;血链素对等量混合培养的C．a及C．t的MIC为0．5g／L。2）血链素作用后,单独及混合培养的C．a及C．t细胞表面疏水率均明显降低,与对照组相比具有显著差异（P〈0．05）。在血链素的作用下,单独及混合培养的C．a及C．t的细胞内钙离子浓度均明显降低,与对照组相比具有统计学意义（P〈0．05）。结论：血链素可以导致白色念珠菌及热带念珠菌细胞表面疏水性降低。血链素可以导致白色念珠菌及热带念珠菌细胞膜钙离子通透性增强。     

去甲肾上腺素调控巨噬细胞Ia抗原表达的钙依赖性

用Fura-2作为荧光探针测定大鼠腹腔巨噬细胞(RPMφ)的细胞内Ca~(2+)浓度([Ca~(2+)]i),用APAAP 桥联酶标法检测RPMφ表面Ia 抗原的表达。结果表明,在细胞外液体不含钙的条件下,10~(?)mol/L的去甲肾上腺素(NE)能使RPMφ的[Ca~(2+)]i 显著升高(P<0.01),使RPMφ表面的Ia 抗原(I-A和I-E)表达显著增加(P<0.01)。磷脂酶C 抑制剂新霉素(2.5mmol/L)本身对RPMφ由的[Ca~(2+)]i 无明显影响,但却能阻断NE 增高RPMφ的[Ca~(2+)]i 的作用,同时也阻断了NE 增加RPM 由表面Ia抗原表达的作用.提示NE 调控巨噬细胞Ia 抗原表达的作用是钙依赖性的,NE 这种作用的细胞内信号转导,则有赖于肌醇脂质信使系统。     

川芎、白芍及配伍对痛经小鼠子宫组织中一氧化氮和钙离子的影响

目的 探讨川芎、白芍及川芎-白芍配伍治疗原发性痛经的作用机理.方法 利用原发性痛经模型小鼠,观察药物对小鼠40 min内扭体次数、扭体发生率的影响;测定小鼠子宫组织中一氧化氮(nitric oxide,NO)和钙离子的含量.结果 与模型组比较,各给药组均可降低小鼠扭体次数(P<0.05或P<0.05),作用强度依次为白芍组>川芎组>川芎-白芍组;升高子宫组织中NO水平(P <0.05或P<0.01),作用强度依次为川芎组>白芍组>川芎-白芍组;显著降低子宫组织中钙离子水平(P<0.01),作用强度依次为白芍组>川芎组>川芎-白芍组.结论 川芎、白芍及川芎-白芍药对对缩宫素所致痛经小鼠扭体有显著抑制作用,可升高子宫组织中NO水平,降低钙离子水平.这些作用可能与其治疗原发性痛经的部分机制有关.     

骨桥蛋白与钙离子的相互作用及其在不同胆汁体系中对胆固醇成核效应的影响

目的:探究骨桥蛋白与钙离子的相互作用及其在不同胆汁体系中对胆固醇成核效应的影响。方法:选择2016年7月—2018年9月在我院治疗的100例胆固醇结石患者,将其分为单纯胆囊结石组和原发性胆管结石组各50例,再选取50例正常人作为对照组。采用酶联免疫法检测胆固醇结石患者和正常人胆汁中骨桥蛋白与钙离子的浓度,并采用Holan法测定3组研究对象在不同浓度骨桥蛋白与钙离子中的胆固醇成核时间。结果:单纯胆囊结石组和原发性胆管结石组患者的骨桥蛋白浓度均低于对照组,而钙离子浓度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。单纯胆囊结石组和原发性胆管结石组不同浓度的骨桥蛋白及钙离子的胆固醇成核时间均少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与同组50μg/mL浓度的骨桥蛋白相比,骨桥蛋白100μg/mL浓度的胆固醇成核时间更长,而骨桥蛋白50μg/mL+钙离子10 mmol/L浓度的胆固醇成核时间更短,差异有统计学意义(P<0.05)。与同组100μg/mL浓度的骨桥蛋白相比,骨桥蛋白100μg/mL+钙离子10 mmol/L浓度的胆固醇成核时间更短,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:骨桥蛋白在不同胆汁体系中对胆固醇成核效应发挥抑制作用,而钙离子发挥促进作用。骨桥蛋白延长钙离子的促成核时间,钙离子缩短骨桥蛋白的抑成核时间,二者互相影响。     

维拉帕米在实验性大鼠胰性脑病中的治疗研究

目的：探讨钙离子拮抗剂维拉帕米在大鼠实验性胰性脑病对脑组织损害的治疗作用,为胰性脑病的治疗提供实验依据。方法：将60只Wistar大鼠经颈内动脉注入磷脂酶A2（Phospholipases A2,PLA21000 u/100 g,1000 u/0.1 ml）,复制大鼠胰性脑病模型（n=60）后,随机分为A组（n=30）,B组（n=30）两组大鼠,治疗组大鼠腹腔注入维拉帕米（Verapamil）0.8 mg、100 g、0.8 mg/ml,3次/d;对照组大鼠腹腔注入等容积等渗盐水,3次/d。分别于造模后第1 d,第3 d,第7 d腹主动脉放血处死动物（每组n=10）。观察脑组织电镜下病理损害表现。大鼠脑组织匀浆后,用酶联免疫吸附法（ELISA）测定脑组织肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素10（IL-10）的含量。结果：A组较B组IL-10的含量升高（P〈0.05）,脑组织匀浆TNF-α的含量减少（P〈0.05）,IL-10/TNF-α比值升高（P〈0.01）;脑组织电镜下脱髓鞘病理损害减轻。结论：经颈内动脉注入磷脂酶A2可以成功复制大鼠胰性脑病（PF）模型,维拉帕米可调节致炎因子的表达,致炎/抗炎因子比值可反应机体炎症反应的程度。