整合素α5β1在苯妥英钠促进大鼠PDLSCs和BMMSCs黏附于牙骨质中的作用

目的 探讨在苯妥英钠(Phenytoin,PHT)促进大鼠牙周膜干细胞(Rat periodontal ligament stem cells,rPDLSCs)、大鼠骨髓间充质干细胞(Rat Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,rBMMSCs)黏附于牙骨质过程中,整合素α5β1(Integrin α5β1)起到的作用。方法 提取大鼠BMMSCs和PDLSCs,培养并纯化。通过细胞鉴定后,将获得的两种细胞各分为4组:40 mg/L PHT处理组、40 mg/L PHT+整合素α5抗体处理组、40 mg/L PHT+整合素β1抗体处理组、PBS处理组,每组细胞放入置有牙骨质片的96孔板处理4 h后,检测黏附于牙骨质片上的细胞量并做以比较。最后,利用qRT-PCR和Western blot检测40 mg/L PHT组与对照组细胞的整合素α5、β1亚基的mRNA与蛋白表达量。结果 40 mg/L PHT可促进rBMMSCs及rPDLSCs黏附于牙骨质片,加入整合素α5、β1抗体后,均明显抑制了40 mg/L PHT对rBMMSCs、rPDLSCs黏附于牙骨质的促进作用(P＜0.01)。qRT-PCR、Western-blot结果显示PHT处理组的整合素α5、β1亚基表达量高于空白对照组(P＜0.05)。结论 40 mg/L PHT能促进rBMMSCs、rPDLSCs黏附于牙骨质,该作用与整合素α5β1的表达上调密切相关。     

两种诱导液对牙周膜干细胞膜片生物学活性影响

目的探讨不同的诱导液对牙周膜干细胞(PDLSCs)膜片生物学活性的影响。方法分别使用骨髓间充质细胞条件(BMMSCs-CM)诱导液与根端牙胚条件(APTG-CM)诱导液培养人PDLSCs,并制备成PDLSCs膜片。BMSCs-CM诱导液诱导的细胞设为BMSCs-CM组,APTG-CM诱导液诱导的细胞设为APTG-CM组。分别诱导PDLSCs膜片4、7、10 d。通过倒置显微镜、HE染色、免疫组化、扫描电镜检测并观察两种诱导液诱导后的PDLSCs细胞膜片形态学的变化及生物学特性的差异。结果接种10 d后,BMSCs-CM组和APTG-CM组的克隆形成率分别为37%和24%,BMSCs-CM的克隆形成能力明显强于APTG-CM组,差异有统计学意义(P<0.05)。与APTG-CM诱导液比较,经过BMMSCs诱导液诱导后的PDLSCs膜片可产生更丰富的细胞外基质。扫描电镜可见BMMSCs诱导液诱导后的细胞膜片表面有矿化沉积和胶原组织形成;APTG-CM诱导液诱导后的细胞膜片表面有大量胶原纤维状组织形成。结论 BMMSCs诱导液更适合诱导PDLSCs膜片向类牙周组织分化。     

纳米骨组织材料用于骨质疏松治疗进展

目的旨在探究通过纳米骨组织材料治疗骨质疏松的进展,以促进其临床应用。方法由第一作者应用计算机检索PubMed、中国期刊全文数据库(CNKI)1997-05～2011-10相关文献。在标题、摘要、关键词中以"nano,osteoporosis,bone marrow mesenchymal stem cells(BMMSCs),treatment"或"纳米,骨质疏松,骨髓间充质干细胞,治疗"为检索词进行检索。选择文章内容与纳米技术治疗骨质疏松有关者,同一领域文献则选择近期发表在权威杂志文章。结果初检得到127篇文献,根据纳入标准选择36篇文献进行综述。结论纳米技术治疗骨质疏松已经成为骨质疏松治疗中的一项新兴技术。目前通过纳米技术治疗骨质疏松主要通过促进药物吸收,维持药物作用时间,增加药物靶向性,促进干细胞分化的机制来进行骨质疏松的治疗。目前常用的技术包括药物纳米化,纳米微载体,材料表面纳米化,纳米材料修饰干细胞等。但目前纳米技术治疗骨质疏松尚未成熟,仍有许多问题有待解决。     

骨髓间质干细胞介导用于颌面整形的动物实验研究

目的体外扩增小型猪骨髓间质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMMSCs),研究其介导颌面整形的可行性.方法分离培养小型猪BMMSCs,扩增后接种到预制的羟基磷灰石/磷酸三钙(hydroxyapatite/tricalcium phosphate,HA/TCP)材料上,分别自体回植入小型猪额骨骨膜下,定期行X线、CT检查.术后12周和20周分别处死动物,取材后进行组织学和扫描电镜检查分析.结果动物额部外形术后明显改变.植入之BMMSCs-HA/TCP复合体与额骨表面紧密融合,强度似骨,复合体内广泛分布着新生骨组织,成骨性好.结论经培养扩增的BMMSCs与HA/TCP复合植入额骨骨膜下在额骨表面形成骨组织,可用来改变面部形态,为颌面整形治疗提供了新的思路.     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗唐氏综合征临床观察

目的探讨自体骨髓间充质干细胞移植治疗唐氏综合征患儿的有效性。方法海军总医院儿科自2012年11月—2014年11月收治的骨髓间充质干细胞移植的唐氏综合征患儿51例（年龄0.5～7岁）,骨髓动员后进行骨髓采集间充质分选,分别行右侧侧脑室穿刺1次及腰椎穿刺2次骨髓间充质干细胞移植。每次移植的细胞数为1×106/kg。每例患儿进行Gesell发育诊断量表评估,对术前6个月及术后6个月2个相同长度时间内发育速率进行自身对照观察。同时,对移植术后1、3、6个月患儿的发育情况进行追踪随访。结果51例中1例失访,余50例完成观察。其中32例在术后1~6个月逐渐出现不同程度智力、语言、运动进步,术后6个月患儿细动作能、应物能、应人能进步月份值较术前6个月明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论骨髓间充质干细胞移植安全可靠,能改善唐氏综合征患儿智力和运动发育水平,且主要表现在情绪、细动作能、应人能及应物能的改善。     

大白鼠骨髓间质干细胞体外培养体系的建立及分化研究

目的：建立大鼠骨髓间质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)体外培养体系，对大白鼠BMMSCs体外培养的条件，供体大白鼠鼠龄等进行了研究。对体外培养的大白鼠BMMSCs的形态学，增殖动力学，成骨的表面标记及体外钙化能力进行了系列研究，方法：取2月龄SD大鼠胫骨和股骨骨髓进行体外培养，取第二代BMMSCs,绘制生长曲线并计算群体倍增时间，对经成骨诱导剂诱导的BMMSCs的ALP表达及体外钙沉积进行了研究。结果：细胞呈长梭形或多角形，细胞表面有不规则的细胞突起，秀射电镜可见胞浆有大量的粗面内质网及线粒体，细胞表面可见突起，细胞生长曲线呈S形，群体倍增时间为72小时，经诱导分化的BMMSCs可见碱性磷酸酶的表达。von Kossa染色可见散在深染的钙沉积班块。结论：来源于年轻大鼠股骨骨髓的间质干细胞体外培养并经诱导后可分化为具有部分成骨特性的细胞，可以为体内骨组织工程提供组织细胞。     

欧前胡素通过提高自噬水平缓解大鼠雌激素缺乏性骨质疏松

目的探寻欧前胡素(Imp)对大鼠雌激素缺乏性骨质疏松的疗效及机制。方法将大鼠随机分为对照(control),OVX和OVX+Imp组。建模后10 d,给OVX+Imp组、对照组和OVX组大鼠分别尾静脉注射欧前胡素75 mg/kg或氯仿溶剂,2次/周,10周。μCT和HE切片分析股骨远端骨小梁形态及参数。应力测试股骨及L5椎骨力学强度。钙黄绿标记内源性矿物沉积。ELISA检测血清PINP和B-ALP。ALP染色检测BMMSCs成骨分化能力。Real-time PCR和Western blot分别检测mRNA和蛋白表达。HE染色检测皮下移植物异位成骨。结果 1)OVX组骨量、骨小梁参数、股骨和L5椎骨力学强度、矿物沉积速率、血清PINP和B-ALP均低于对照组和OVX+Imp组(P0.05)。2)OVX组内源性BMMSCs的ALP活性、成骨基因表达及异位成骨能力均低于对照组和OVX+Imp组(P0.05)。3)OVX组内源性BMMSCs自噬水平低于对照组和OVX+Imp组(P0.05)。4)BMMSCs+3-MA组自噬水平低于BMMSCs组,成骨能力相应降低(P0.05);BMMSCs+3-MA+Imp组自噬水平高于BMMSCs+3-MA组,成骨活性相应升高(P0.05)。结论欧前胡素通过提高自噬水平恢复内源性BMMSCs成骨能力,治疗雌激素缺乏性骨质疏松。     

兔骨髓间充质干细胞促进乳鼠损伤神经元修复的研究

[目的]探讨骨髓间充质干细胞对损伤神经元的作用.[方法]培养骨髓间充质干细胞融合达90%时更换培养基培养24 h,收集细胞培养液即为BMMSC条件培养基,用谷氨酸建立离体大鼠皮质神经元损伤模型,用MSC条件培养基进行对谷氨酸损伤神经元的修复,倒置显微镜观察细胞生长及形态的变化,用四唑盐比色法(MTT)和乳酸脱氢酶(LDH)法分别检测各组神经元的活性和细胞损伤后修复的程度. [结果]谷氨酸(O.8 mmol/L)对神经元有明显的损伤作用(P＜O.05),骨髓间充质干细胞条件培养基能提高正常及损伤神经元细胞活性,MTT值明显升高(P＜O.05),LDH渗漏量明显下降(P＜O.05). [结论]骨髓间充质干细胞条件培养基能促进损伤神经元的修复.     

电磁场促进骨髓间充质干细胞成骨分化的研究进展

目的:探讨电磁场促进骨髓间充质干细胞成骨分化作用的研究现状。方法:检索电磁场和间充质干细胞相关论文,比对寻找电磁场促进成骨的相关证据,总结电磁场促进间充质干细胞成骨分化的相关研究。结果:电磁场对细胞的作用是复杂多样的,可影响干细胞的基因表达,也能对细胞缝隙通讯产生作用,实验室证明电磁场在体外培养的干细胞增殖和分化方面扮演了一定的角色,临床研究同样证明活体的骨细胞会受到电磁场的作用。结论:电磁场能促进骨髓间充质干细胞的成骨分化,近年来国内外在这个领域的研究方兴未艾,进一步深入研究非常必要尤其通讯频段电磁场更值得学术界的探讨。