ARHI基因抑制U937白血病细胞株生长并诱导其G_2/M期阻滞及凋亡

目的:探讨抑癌基因ARHI在急性髓细胞白血病中的表达情况,同时探索其对U937细胞生长的影响。方法:RT-PCR方法检测急性髓细胞白血病细胞株、人胚肾细胞293FT、白血病原代细胞以及健康志愿者血细胞中ARHI mRNA的表达情况。构建高表达ARHI的MSCV-IRES-GFP-ARHI质粒转染U937细胞,MTT法连续8 d检测细胞活性绘制生长曲线。新鲜培养基重悬U937细胞24 h后,采用流式细胞术检测细胞周期以及细胞凋亡。结果:293FT细胞、健康志愿者血细胞中均检测到ARHI mRNA表达,而白血病细胞株以及白血病患者原代细胞中未检测到该基因的表达。生长曲线显示高表达ARHI基因的U937(U937-ARHI)细胞在第6~8天细胞活力低于对照(U937-GFP)组。高表达ARHI的U937细胞G2/M期细胞比例及细胞凋亡率均高于对照组(P0.05)。结论:ARHI在急性髓系白血病细胞中的表达减低;高表达ARHI基因能抑制U937细胞生长、阻滞其细胞周期在G2/M期并促进细胞凋亡。     

ARHI基因诱导人卵巢癌SKOV3细胞株S期阻滞、凋亡及自体吞噬的研究

目的:研究母源性肿瘤抑制印迹基因ARHI对人卵巢癌SKOV3细胞株的作用?方法: 将pIRES2-EGFP-ARHI质粒转染至ARHI基因低表达的人卵巢癌SKOV3细胞内实现ARHI基因表达,CCK-8法检测pIRES2-EGFP-ARHI-SKOV3细胞组(实验组)?pIRES2-EGFP-SKOV3细胞组(质粒对照组)及SKOV3细胞组(阴性对照组)的吸光度值,计算细胞生长抑制率,流式细胞仪分析细胞周期分布并检测细胞凋亡率,并用Western blot检测微管相关蛋白轻链Ⅱ(LC3-Ⅱ)的表达水平变化?结果:实验组细胞培养24?48?72?96及120 h的生长抑制率分别为64.69%?70.17%?67.01%?66.87%?67.70%,均明显高于质粒对照组(P﹤0.01)?培养48 h时实验组?质粒对照组?阴性对照组S期细胞的比例分别为64.18%?38.43%及15.15%,凋亡率分别为47.97%?26.53%及9.33%;培养72 h时S期细胞的比例分别为43.29%?10.37%及10.89%,凋亡率分别为51.34%?24.70%及4.39%;实验组细胞培养48 h时LC3-Ⅱ表达水平增加,与对照组间有明显差异?结论:ARHI基因抑制SKOV3细胞生长,使SKOV3细胞阻滞于S期,并诱导凋亡及自体吞噬?     

抑癌基因ARHI与全身各系统肿瘤相关性及机制的研究进展

抑癌基因 ARHI（aplasia ras homologue I）是1999年新发现的母源性印迹基因。最近研究发现ARHI 具有抑制肿瘤细胞增殖、转移、侵袭,调控肿瘤细胞自噬等作用。另外,学者们还发现 ARHI 不仅与卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌密切相关,而且还与其他生殖、消化、内分泌等全身各系统肿瘤具有相关性。本文就最近几年国内外对 ARHI 与全身各系统肿瘤的相关性及其机制的最新研究进展进行综述。     

抑癌基因ARHI 在子宫内膜异位症及非子宫内膜异位症患者中差异表达的意义

摘要：目的研究子宫内膜异位症（endometriosis, EMs）组织中抑癌基因ARHI的mRNA和蛋白表达情况。方法利用
RT-PCR和Western Blot免疫印迹的方法,对EMs的异位内膜组织、在位内膜组织和非EMs在位内膜组织（正常内膜组织）
进行mRNA和蛋白表达的半定量分析。利用原位杂交和免疫组化技术对研究各组进行定性及定位分析。结果（1）
ARHI mRNA 和蛋白在各组中均有表达,异位内膜的表达高于在位内膜和正常内膜,差异显著（P<0.005）,在位内膜组与
正常对照组比较,ARHI的表达无明显差异（P>0.05）;（2）原位杂交阳性率分别为非EMs组97.3%,EMs异位内膜组100%,
EMs在位内膜组93.8%;（3）免疫组化阳性率分别为非EMs组93.2%,EMs异位内膜组100%,EMs在位内膜组92.3%;（4）
ARHI的DNA与蛋白表达一致;（5）5例恶变的异位内膜ARHI免疫组化检测,4例呈阴性,1例呈弱阳性表达。结论抑癌
基因ARHI在子宫内膜组织中均表达,且在异位内膜中呈表达上调,而在恶变的异位内膜中多呈阴性表达,提示ARHI基
因可能与子宫内膜异位症不孕及恶变相关。     

ARHI与妇科恶性肿瘤的关系

自噬是细胞通过自我消化实现大分子物质的循环再利用,维持细胞自身稳定的生物学过程。自噬活性的变化、自噬性细胞死亡与恶性肿瘤的发生、发展有关。自噬相关基因ARHI通过调节自噬活性,在肿瘤的发生、发展中发挥作用。ARHI调节自噬信号通路中某些关键激酶可能为肿瘤的治疗提供新的药物作用靶点。     

新抑癌基因ARHI在子宫内膜异位症中的表达及其意义

目的:研究子宫内膜异位症组织中抑癌基因ARHI蛋白的表达。方法:选择抗ARHI单克隆抗体,采用W estern blot免疫印迹法,对10例子宫内膜异位症的异位囊肿组织及其在位内膜组织进行蛋白检测,并以10例正常女性的在位内膜组织作对照。用Array 3000扫描仪扫描X线片,观察W estern blot的结果,用GDS8000型凝胶成像分析系统分析图片的辉度值和比值。结果:(1)ARHI在内异症异位内膜的表达高于在位内膜(P<0.001)及正常内膜(P<0.001);(2)内异症的在位内膜组与正常对照组比较,ARHI的表达无明显差异(P>0.05)。结论:抑癌基因ARHI在子宫内膜组织中普遍表达,且在异位内膜中表达上调,提示ARHI基因可能与子宫内膜异位症的发病及进展相关。     

ras超家族中的肿瘤抑制基因

 引言ras超家族是一类重要的功能蛋白。它们介导生长因子、细胞因子和多种细胞外信号的信息通路,对细胞生长、分化、存活、增殖等多种功能的调节发挥重要作用。尽管ras超家族各成员之间存在差异,但它们也具有一些共同特征:(1)都是单体小G蛋白,拥有高度保守的GTP结合域(G1 G5 ) ,能与GTP和GDP结合;(2 )都有内源性GTP酶活性,能水解GTP生成GDP ;(3)多数ras超家族成员通过翻译后的脂酰化修饰与膜结合[1] 。ras超家族在细胞信号转导中可作为信号转换器或分子开关,它们通过与GTP结合(激活态)和GDP结合(失活态)的转换导致信号的转导或终止[2 ] 。该家族许多成员是癌基因,当其被异常激活后会导致细胞无限制地增殖,引起肿瘤。近年来,研究发现ras超家族中包括一些独特的成员,作为生长负向调节者,具有肿瘤抑制作用,本文现予以概述。1　ARHI(AplysiarasHomologI)ARHI是ras超家族中第一个被报道的肿瘤抑制基因,它是美国德克萨斯大学Anderson癌症中心于1999年利用差异展示PCR (differentialdisplayPCR)发现,又名NOEY2或ras同源基因家...     

ARHI基因与肿瘤的关系

近年来研究表明，一种新的抑癌印迹基因ARHI(NOEY2)的异常参与了一些肿瘤的发生。该文就ARHI(NOEY2)的结构、功能及其与某些肿瘤的关系进行综述。     

ARHI和环氧化酶-2蛋白在子宫颈腺癌组织中的表达及其意义

目的探讨ARHI蛋白和环氧化酶-2（COX-2）蛋白在子宫颈腺癌发生中的作用及其相互关系。方法采用免疫组织化学法检测40例子宫颈腺癌及30例慢性子宫颈炎组织中。ARHI蛋白及COX-2蛋白的表达情况。结果ARHI在40例子宫颈腺癌组织阳性率为50．0％（20／40）,低于慢性子宫颈炎患者子宫颈组织阳性率90．0％（27／30）,差异有统计学意义（X^2=12．43,P〈0．05）;COX-2在40例子宫颈腺癌组织阳性率82．5％（33／40）,高于慢性子宫颈炎患者子宫颈组织阳性率0（0／30）,差异有统计学意义（x^2=46．16,P〈0．05）;ARHI蛋白阳性表达率与子宫颈腺癌临床分期（x^2=3．96,P〈0．05）及组织分化程度高低有关（x^2=7．04,P〈0．05）。COX-2蛋白与子宫颈腺癌组织分化程度有关（x^2=7．04,P〈0．05）,与临床分期无关（P〉0．05）;ARHI蛋白和COX-2蛋白与淋巴结有无转移均无关（P均〉0．05）;ARHI蛋白和COX．2蛋白表达有关联（r=0．31,P〈0．05）。结论子宫颈腺癌的发生与ARHI基因失活和COX-2蛋白表达异常有关,两者可能协同作用参与子宫颈腺癌的发生。     

1p31杂合性丢失及ARHI抑癌基因在宫颈腺癌中的作用

目的:研究宫颈腺癌1p31杂合性丢失的发生率,探讨在此位点的ARHI基因在宫颈腺癌发生发展中的作用。方法:采用PCR银染技术检测30例宫颈腺癌中1p31杂合性丢失的发生率,其中Ⅰ,Ⅱ期18例,Ⅲ、Ⅳ期12例,免疫组化方法检测在此位点的ARHI蛋白的表达。结果:30例宫颈腺癌组织中LOH阳性的比例为63.33%(19/30),Ⅲ期、Ⅳ期LOH阳性率明显高于Ⅰ,Ⅱ期,差异有统计学意义(χ2=5.98,P<0.05)。在高、中、低分化癌中无统计学差异(χ2=4.88,P>0.05),ARHI蛋白的阳性表达率与淋巴结转移无关,差异无统计学意义(χ2=2.16,P>0.05)。宫颈腺癌组织中ARHI表达(46.67%,14/30)低于正常宫颈组织(90.0%,27/30),差异具有统计学意义(χ2=13.02,P<0.05)。结论:1p31位点可能存在宫颈腺癌相关抑癌基因,ARHI基因在宫颈腺癌发生发展过程中起重要作用。