大鼠癫痫持续状态后水通道蛋白-4的表达

目的 探讨癫痫持续状态（SE）后大鼠水通道蛋白-4（AQP4）的表达变化与脑水肿形成之间的关系。方法 54只SD大鼠随机分为对照组（n=6），SE后6h，12h，24h，48h，72h，96h，120h，168h组（n=6）。腹腔注射锂-匹罗卡品建立大鼠SE模型，免疫组织化学染色和逆转录PCR方法检测AQP4蛋白和基因在SE形成后的表达。结果 SE后AQV4蛋白和mRNA24h表达水平明显增加，48h达到高峰，持续72h后下降，168h时仍有表达。SE后AQP4表达变化和脑水肿形成过程在时间上呈明显的正相关（r=0．73，氏0．05）。结论 SE后AOP4表达明显增强，在时间上与脑水肿形成呈正相关，提示AQP4在SE后脑水肿形成过程中起着重要作用。     

电针不同穴组对功能性便秘大鼠结肠黏膜超微结构及AQP3、AQP8表达的影响

目的 探讨电针不同穴组治疗功能性便秘（FC）大鼠的作用机理。方法 FC动物模型采用0 ℃ 0.9%氯化钠溶液对SD大鼠灌胃复制,随机分为模型组、电针1组（EAⅠ组）、电针2组（EAⅡ组）和电针3组（EAⅢ组）,正常组采用SD大鼠。EAⅠ组取天枢、大肠俞（双侧）、EAⅡ组取曲池、上巨虚（双侧）、EAⅢ组取天枢、大肠俞、曲池、上巨虚（单侧）进行电针治疗。观测粪便性状和肠道炭末推进率评定大鼠肠动力,透射电镜检测大鼠结肠黏膜超微结构,Western blot检测大鼠结肠AQP3、AQP8蛋白表达,qPCR检测大鼠结肠AQP3、AQP8 mRNA表达。结果 EAⅡ组大鼠24 h粪便粒数、24 h粪便含水量和肠道炭末推进率均显著增加,首次黑便时间显著减少（P<0.05）,结肠黏膜超微结构经EAⅡ干预后显著改善,模型组大鼠结肠黏膜AQP3、AQP8蛋白和AQP3、AQP8 mRNA表达显著高于正常组（P<0.05）,经EAⅡ干预后表达显著降低,具有统计学意义（P<0.05）。结论 电针刺激曲池、上巨虚可能通过降低FC大鼠结肠黏膜AQP3、AQP8蛋白和AQP3、AQP8 mRNA表达,减少结肠水分重吸收,增加结肠粪便含水量,调节水分转运,改善结肠黏膜超微结构,增强肠动力,起到改善便秘症状的作用。      

体外缺氧／复氧对星形胶质细胞AQP4表达的影响及葛根素干预的实验研究

目的 观察缺氧,复氧条件下星形胶质细胞形态和AQP4 mRNA的表达变化以及葛根素对其表达变化的影响,探讨脑缺血再灌注损伤与AQP4的关系以及葛根索的干预作用.方法 原代培养星形胶质细胞,用5%CO2+95%N2混合气体造成缺氧,以LDH漏出率及MTT降解率作为细胞受损指标,应用RT-PCR技术检验星形胶质细胞缺氧/复氧各个时间点AQP4 mRNA的表达变化及葛根素的干预效果.结果 体外培养的星形胶质细胞在缺氧环境下损伤不明显,随着复氧时间的延长细胞损害加重.AQP4 mRNA在缺氧时表达与正常对照组无明显差异,复氧后表达升高并随时间延长呈增高趋势(P＜0.05).葛根素干预组AQP4 mRNA表达丰度与缺氧/复氧组无明显差异(P＞0.05).结论 星形胶质细胞AQP4 mRNA表达变化与细胞损伤有明显的相关性,葛根素对星形胶质细胞损伤的保护作用不是通过改变AQP4的表达来实现的.     

缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织水通道蛋白9实验研究表达

目的研究缺氧缺血性脑损伤（HIBD）后水通道蛋白9（AQP9）在脑组织中的表达变化规律,初步探讨AQP9与脑水肿的关系。方法采用HIBD动物模型,实施定量PCR（基因水平）和Wester-Blot（免疫印迹）方法,检测AQP9表达的变化和AQP9 mRNA的变化。结果 HIBD组AQP9的表达随缺血时间延长而表达增加,对照组AQP9表达无明显变化,且AQP9表达在脑缺血2~3 d表达最强。结论 HIBD时,随着缺氧缺血时间的延长,AQP9表达增强,至72 h达高峰。     

AQP1通过Wnt通路促进乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移与侵袭

目的:探讨过表达水通道蛋白1（aquaporin 1,AQP1）基因对人乳腺癌细胞MCF-7增殖、迁移、侵袭能力的影响,分析其对Wnt通路的调控作用。方法:构建和包装pBabe-puro-AQP1逆转录病毒载体,建立稳定过表达AQP1基因的MCF-7细胞。细胞免疫荧光染色法检测外源性AQP1在MCF-7细胞内的定位,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和Western blot检测AQP1 mRNA及蛋白表达变化;采用CCK-8法检测细胞的增殖活性;流式细胞法检测细胞周期;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell法检测细胞的侵袭能力;基因表达谱芯片、Western blot检测转染后Wnt细胞通路相关基因表达改变。结果:稳定过表达AQP1后MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭能力显著增加,差异有统计学意义（P＜0.001）。基因表达谱芯片结果显示,过表达AQP1后22个差异表达基因富集于Wnt细胞信号通路,mRNAs表达明显增强（P＜0.000 1）,Wnt细胞通路关键基因β-catenin及下游靶基因细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、C-Myc蛋白表达也显著增加。结论:AQP1可能通过激活Wnt信号通路促进MCF-7细胞增殖、迁移与侵袭。     

Astrocytes in the damaged brain: Molecular and cellular insights into their reactive response and healing potential

Long considered merely a trophic and mechanical support to neurons, astrocytes have progressively taken the center stage as their ability to react to acute and chronic neurodegenerative situations became increasingly clear. Reactive astrogliosis starts when trigger molecules produced at the injury site drive astrocytes to leave their quiescent state and become activated. Distinctive morphological and biochemical features characterize this process (cell hypertrophy, upregulation of intermediate filaments, and increased cell proliferation). Moreover, reactive astrocytes migrate towards the injured area to constitute the glial scar, and release factors mediating the tissue inflammatory response and remodeling after lesion. A novel view of astrogliosis derives from the finding that subsets of reactive astrocytes can recapitulate stem cell/progenitor features after damage, fostering the concept of astroglia as a promising target for reparative therapies. But which biochemical/signaling pathways modulate astrogliosis with respect to both the time after injury and the type of damage? Are reactive astrocytes overall beneficial or detrimental for neuroprotection and tissue regeneration? This debate has been animating this research field for several years now, and an integrated view on the results obtained and the possible future perspectives is needed. With this Commentary article we have attempted to answer the above-mentioned questions by reviewing the current knowledge on the molecular mechanisms controlling and sustaining the reaction of astroglia to injury and its stem cell-like properties. Moreover, the cellular/molecular mechanisms supporting the detrimental or beneficial features of astrogliosis have been scrutinized to gain insights on possible pharmacological approaches to enhance astrocyte neuroprotective activities.     

基于计算机辅助药物设计的清肺排毒汤多靶点系统治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)物质基础探究

目的通过对清肺排毒汤功效和新型冠状病毒肺炎(COVID-19)病机的分析,基于计算机辅助药物设计(CADD)从多靶点结构出发系统探索清肺排毒汤排毒、抑制炎症风暴、利水渗湿3个方面的物质基础和分子机制。方法 TCMSP下载清肺排毒汤成分,基于血管紧张素转化酶II(ACE2)、白细胞介素-6受体(IL-6R)和水通道蛋白(AQP)分别进行分子对接虚拟筛选并对其结合模式进行分析。对利水药白术、茯苓、猪苓、泽泻进行反向靶点预测和GO分析和KEGG通路富集分析,预测其作用机制。结果阻断病毒作用最突出的前3位中药为甘草、麻黄、枳实,抑制炎症作用最突出的前3位中药是甘草、柴胡、紫菀;清肺排毒汤4个子方中,小柴胡汤阻断病毒、抑制炎症风暴的潜在活性化合物数均排第1。槲皮素及其衍生物对ACE2和IL-6R2个靶点均具有较强结合能力,是潜在的双靶点活性化合物。ACE2的Lys353残基是化合物与ACE2结合的关键位点。白术、茯苓、猪苓、泽泻缺乏阻断病毒、抑制炎症风暴的化合物,分子对接结果显示,这4味药材中含有的东莨菪内酯、去氢齿孔酸、α-D-半乳糖、环氧泽泻烯具有与水通道蛋白4(AQP4)的潜在结合能力。结...     

阿魏酸钠治疗肾病综合征的疗效及对患者尿液AQP2的影响观察

目的探讨阿魏酸钠治疗原发性肾病综合征的临床疗效以及对患者尿液水通道蛋白(AQP2)的影响。方法将43例患者随机分为观察组和对照组,观察组采用常规疗法配合阿魏酸钠治疗,对照组采用常规疗法治疗,比较2组治疗前后尿液AQP2、24 h尿蛋白定量、血浆白蛋白及肾功能等指标的变化。结果治疗后观察组临床疗效优于对照组(P<0.05)。结论阿魏酸钠治疗肾病综合征疗效确切,能显著减少患者尿蛋白、改善患者肾功能,并可有效降低患者肾脏AQP2蛋白表达水平,改善患者水潴留状况。