简单灵敏的免疫复合物抗原特异性固相酶联检测法

本文将聚乙二醇(PEG)比浊法和固相酶联免疫法(ELISA)结合,建立了—较灵敏的免疫复合物(IC)直接固相吸附抗原特异性检测法。利用牛清蛋白(BSA)为已知抗原组份的IC模型,分别对IC直接固相吸附的条件和影响因素、方法的灵敏度、重复性等进行了研究。结果发现IC在解离状态下直接固相吸附后的抗原特异性检测灵敏度明显高于未解离者。该法具有简单易行,灵敏度较高、适于临床测定大量血清样品等优点。     

表面增强激光解离和激光离子化蛋白芯片技术与二维凝胶电泳质谱技术的比较

人类基因计划组揭开了人类基因框架的面纱,自此,生命科学研究步入了后基因时代,其核心便是蛋白质组研究.蛋白质是生理功能的执行者,是生命现象的直接体现者.     

共伴侣分子Cdc37从人热休克蛋白90复合体解离中ATP的作用机制

目的 探讨ATP导致共伴侣分子细胞分裂周期蛋白37(Cdc37)从人热休克蛋白90(HSP90)复合体解离的可能机制,为抗肿瘤新药研发提供理论依据。方法 用免疫共沉淀法（IP）捕获人组织淋巴瘤细胞（U937细胞）中HSP90复合体后,进行以下实验：（1）用流式细胞术（FCM）检测经过ADP、17-烯丙基胺格尔德霉素（17-AAG）、亚胺二磷酸腺苷（AMPPNP）、ATP处理后HSP90复合体中的Cdc37含量,并分别与经二甲基亚砜（DMSO）处理的对照组进行比较,研究ATP导致Cdc37从HSP90复合体解离是单纯由ATP结合导致还是依赖ATP水解;（2）用FCM检测对照组及ATP处理后复合体中Cdc37和其他共伴侣分子中S期激酶关联蛋白1 G2等位基因抑制因子（Sgt1）、HSP70相互作用蛋白（HIP）、FK-506结合蛋白（FKBP5）、应激诱导蛋白1(STIP1)、热休克蛋白90腺苷三磷酸酶同系物1激活剂（AHSA1）的变化情况,并用IP-western blot(IP-WB)进行验证,研究ATP导致Cdc37从HSP90复合体解离是否伴随其他共伴侣分子解离;（3）用IP-WB...     

ADAM28反义核酸对人牙囊细胞内ADAM28表达的影响

目的探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)反义核酸对人牙囊细胞(HDFC)内ADAM28蛋白表达的影响。方法应用反义核酸技术,设计并合成与ADAM28 mRNA特异序列互补的AS-ODN和正义对照S-ODN转染HDFC后,通过免疫细胞化学、RT-PCR和Western blot检测细胞中ADAM28的表达差异。结果ADAM28 AS-ODN转染HDFC后,在转录、翻译和蛋白水平细胞内ADAM28的表达均明显减弱,统计学分析有显著性差异(P<0.01)。结论ADAM28 AS-ODN可有效封闭HDFC内ADAM28的表达。     

蝙蝠葛碱缓释片溶解度和解离常数测定

目的：测定蝙蝠葛酚性碱缓释片的溶解度与解离常数,以指导缓释片的处方设计。方法：采用紫外分光光度法测定溶解度和解离常数。结果：蝙蝠葛酚性碱在水中的溶解度为5．28mg／ml,用柠檬酸增溶后的溶解度为71．12mg／ml,在不同pH值缓冲液中溶解度随着pH值的升高呈现先减少后增大的趋势;蝙蝠葛酚性碱的酸性解离常数pKa=8．20±0．03,碱性解离常数PKb=10．59±0．06。结论：蝙蝠葛酚性碱的水溶性较差,柠檬酸对它具有较好的增溶效果,可通过控制环境的PH值来控制其吸收速率。     

金属蛋白酶解离素9在肿瘤中的研究进展

金属蛋白酶解离素9(ADAM9)是金属蛋白酶解离素家族中的一员,主要以其金属蛋白酶活性和与整合素结合的能力广泛参与人类多种疾病的发生发展,尤其是肿瘤性疾病.深入研究ADAM9在肿瘤发生发展中的作用有助于找到新的靶点,从而为肿瘤治疗提供新的方法.     

三重再摄取抑制剂从单胺转运体解离的拉伸分子动力学模拟研究

目的 研究三重再摄取抑制剂(triple reuptake inhibitors,TRIs)与人类单胺转运体(human monoamine transporters,hMATs)的解离机制。方法 采用拉伸分子动力学的方法模拟3个TRIs从hSERT、hNET和hDAT主要结合位点解离的动态过程;通过计算解离过程中施加的外力随模拟时间的变化,分析抑制剂解离过程中重要的蛋白-配体间的相互作用;最后通过Jarzynski方程的二次累积展开式计算抑制剂在3种转运蛋白的平均力势。结果 力谱图曲线表明影响TRIs解离的残基在单胺转运蛋白上的分布主要如下：跨膜区域(TM1b、TM3、TM6a、TM10)和胞外Loop区域(EL2、EL4、EL5、EL6),其中主要结合口袋附近的残基极大地阻碍TRIs的解离。比较每个体系的平均力势数值,结果表明EB1020相比NS2359和SEP225289更容易从蛋白中解离。结论 本研究从原子水平揭示了hMATs与TRIs结合-解离机制,为基于结构的选择性抗抑郁药物设计提供了理论依据。     

关于骨胳肌的损害及其修复

对20例死于克山病的尸体骨胳肌进行检查,其中6例的腓肠肌有着特殊的损害和修复。具体表现为,由解离的肌纤维构成的灶性坏死,表现为幼稚的结缔组织细胞在肌纤维表面展开其积极活动,表现为在肌纤维内部由结缔组织所进行的置换,以及表现为在受损的相邻肌纤维之间,由结缔组织所促成的粘连。特别是肌膜溶解,在电镜下有了切实证明,使肌纤维内修复的机制得到应有的解释。     

与负性想法保持距离——学会认知解离

传统认知行为疗法强调改变想法本身,而认知解离重视的是想法、情绪、体验和个体的关系。通过改变这种关系来改变其功能——也就是通过改变“想法”发生的语境,从而改变“想法”的功能。根据接纳承诺疗法的理论,若能改变语言和情境的错误连接、削弱语言的影响力,个体会更好地处理好自己和思维之间的关系,更好地调节当下的行为,因此得以减少由僵化的思维或行为规则带来的问题。     

表皮生长因子受体活化与胰腺癌细胞解离关系的实验研究

目的 明确表皮生长因子受体(EGFR)活化参与胰腺癌细胞解离调节的分子机制.方法 通过免疫荧光法检测仓鼠高转移株(PC-1.0)和低转移株(PC-1)胰腺癌细胞中EGFR、活化(磷酸化)EGFR (p-EGFR)、活化(磷酸化)丝裂原活化蛋白激酶激酶2 (p-MEK1/2)及活化(磷酸化)细胞外信号调节激酶1/2 (p-ERK1/2)的表达变化及其与胰腺癌细胞解离状态变化的关系.结果 胰腺癌细胞解离因子(DF)明显诱导低转移株胰腺癌细胞(PC-1)中EGFR、p-EGFR、p-MEK1/2和p-ERK1/2的表达,同时诱导其细胞克隆解离.相反,AG1478(EGFR活化抑制剂)明显抑制高转移株胰腺癌细胞(PC-1.0)中EGFR、p-EGFR、p-MEK1/2和p-ERK1/2的表达,同时诱导PC-1.0细胞聚集成细胞克隆.结论 表皮生长因子受体活化后激活MEK/ERK信号通路,从而参与胰腺癌细胞解离的调节.