母婴ABO血型不合母体高效价IgG的低温分离与纯化

目的 分离和纯化母婴血型不合母体的特异性高效价的IgG抗体。方法 采用半饱和硫酸铵低温沉淀法分离IgG抗体，SephedexA50层析柱纯化，然后用B型红细胞(RBC)吸收放散IgG，用聚乙二醇(PEG)沉淀，真空泵脱水回收IgO。结果 200ml血浆经半饱和硫酸铵低温沉淀后得IgG粗制品2．26g，Sephedex A50层析柱纯化后得纯制品1．84g，经B型RBC吸收放散后得特异性IgG 0．55g，回收率达29．89％(0．55／1．84)。结论 采用半饱和硫酸铵低温沉淀法分离高效价IgG抗体，可以获得高纯度的IgG。     

主动载药法制备两亲性药物脂质体的研究进展

脂质体跨膜梯度主动载药方法主要有pH梯度法和硫酸铵梯度法.本文介绍了两亲性药物脂质体跨膜梯度载药方法的原理、制备工艺、影响包封率的因素等国内外研究进展.     

脂质体主动载药及其研究进展

脂质体主动载药法是在制备脂质体的传统方法上引入pH梯度法等而形成的一种新的制备方法，使得制备高包封率脂质体成为可能，较好地改变了难以制备水溶性药物脂质体的局面。本文主要对主动载药法的分类、起源及研究进展作一综述。     

颌面血管瘤局部注射用平阳霉素脂质体的制备和优化

目的制备平阳霉素脂质体,建立包封率测定方法,考察处方影响因素,优化处方。方法采用硫酸铵梯度法制备平阳霉素脂质体;以Sephadex G-50微柱离心法分离脂质体和游离药物,应用HPLC法测定药物含量,计算包封率;通过单因素考察优化硫酸铵梯度法的处方工艺,考察不同处方因素对包封率的影响。结果 Sephadex G-50微柱可完全吸附平阳霉素游离药物,空白脂质体回收率为98.3%~101.2%;平阳霉素浓度在5~200μg·m L-1内与峰面积线性关系良好(r=0.9999),日内和日间精密度(RSD)均<2%,回收率为98.3%~100.1%。通过单因素考察优化平阳霉素脂质体的处方为:磷脂100 mg;胆固醇20 mg;平阳霉素15 mg。优化工艺为采用浓度为250 mmol·L-1硫酸铵溶液制备空白脂质体,加入平阳霉素溶液后在40℃水浴中载药40 min。结论硫酸铵梯度法适用于制备平阳霉素脂质体,微柱离心法测定包封率准确可靠,处方工艺优化后的平阳霉素脂质体的包封率可以达到63.7%。     

盐酸小檗碱脂质体的制备及其含量、包封率的测定

目的：制备盐酸小檗碱脂质体,并测定其包封率和脂质体各成分含量。方法：采用硫酸铵梯度法制备盐酸小檗碱脂质体,以超速离心法、微柱法、超滤法对盐酸小檗碱脂质体包封率的测定方法进行研究,以HPLC-ELSD测定脂质体各成分含量。结果：超速离心法能将未包封药物与脂质体很好地分离,最佳超速离心条件：离心速度为60000 r·min-1,离心时间为1 h,离心温度为10℃,脂质浓度为6 mg·ml-1。结论：包封率测定方法具有简单、快速分离等优点。 HPLC-ELSD能够同时测定脂质体各成分含量。     

盐酸维拉帕米脂质体的制备及其影响因素

 目的 制备盐酸维拉帕米脂质体,并对处方和制备过程中的影响因素进行考察。 方法 分别以被动载药法和硫酸铵梯度法制备盐酸维拉帕米脂质体,对处方进行优化,并考察硫酸铵梯度法的影响因素。测定其粒径、 Zeta 电位和稳定性。 结果 硫酸铵梯度法所得包封率远大于被动载药法,且受硫酸铵浓度、载药温度和载药时间的影响。按优化的处方和工艺制备的盐酸维拉帕米脂质体,包封率大于 95 % ,平均粒径 136 nm ,粒径分布均匀, Zeta 电位为 - 13.4 mV ,稳定性良好。 结论 采用硫酸铵梯度法可成功制备盐酸维拉帕米脂质体,通过对处方和工艺进行优化,可以达到很高的包封率和良好的稳定性。     

改良的硫酸铵沉淀法纯化大雁的卵黄抗体

目的探索有效的纯化大雁卵黄抗体及高效价二抗的方法。方法应用了PEG沉淀,阴离子交换柱,硫酸铵分级沉淀纯化,免疫制备二抗,免疫电泳和免疫双扩散法及western blotting进行效价的测定。结果改良后的硫酸铵沉淀法的纯度远远高于PEG沉淀,相对于离子交换法而言更加简单方便,经济省时。从免疫电泳看已达到了电泳纯,大雁卵黄IgY的相对分子质量为180×103,重链约为66×103,轻链约为24×103。免疫获得的二抗有较强的免疫活性。结论用改良的硫酸铵沉淀法纯化大雁卵黄抗体,效率和纯度显著提高,值得推广。本实验为大雁卵黄抗体及其二抗的应用奠定了基础,也为雁形目其他种类卵黄抗体的纯化提供了参考。     

亲和层析法纯化系统性红斑狼疮特异性 60 KD Ro/SSA抗原

目的：建立亲和层析法纯化Ro／SSA自身抗原系统中60KD组分的方法。方法：从猪脾提ENA(可提取核抗原)，以硫酸铵沉淀、离子交换层析进行初步纯化。挑选单纯抗60 KD SSA抗体阳性的病人的血清，制备亲和层析柱。用ELISA法检测所制备的抗原。结果：60 KD SSA抗体阳性标准血清ELISA检测为阳性，Sm和RNP、Jo-1、Scl-70的标准抗血清为阴性。结论：该方法可获得高纯度的抗原，可用于ELISA检测等目的。     

兔抗Cap43多克隆抗体制备和初步纯化

目的制备兔抗Cap43多克隆抗体。方法以30个氨基酸组成的多肽为半抗原与钥孔血蓝蛋白（mcKLH）通过碳化二亚胺（EDC）法化学偶联成完全抗原（多肽-mcKLH）免疫家兔；制备兔抗Cap4443多克隆抗体；斑点ELISA法检测抗体效价，经辛酸一硫酸铵法初步纯化抗体后，十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）电泳考马斯亮蓝检测其纯化后的纯度。结果经免疫11周得到兔抗Cap43多克隆体，抗体效价为1：500。结论采用EDC化学偶联半抗原和大分子载体蛋白mcKLH，使其成为同时具有免疫原性与免疫反应性的完全抗原，用其免疫家兔获得多克隆抗体。     

硫酸铵反抽提法在纯化β内酰胺酶中的应用

硫酸铵价廉，不易导致蛋白质变性，常用于蛋白的分离和纯化。但硫酸铵抽提的分离纯化作用较弱，主要用于蛋白的浓缩。硫酸铵反抽提是根据在硫酸铵溶液中析出的蛋白质再次溶解有较高的选择性原理而建立的纯化方法。本研究采用配对设计对硫酸铵反抽提和抽提两法在纯化超广谱β内酰胺酶（ESBL）中的作用进行了比较，旨在为临床检验科室纯化ESBL提供简便易行的方法。