N,N-二甲胺基硫代乙酰胺的合成研究

目的：研究尼扎替丁中间体N，N－二甲胺基硫代乙酰胺的合成，考察不同反应温度，反应时间对收率的影响。方法：采用硫氢化钠为催化剂，硫化氢气体直接通入原料N，N－二甲胺基乙腈中反应，然后通过过滤，减压蒸馏得粗品，用异丙醇重结晶得成品，结果：控制反应温度约50℃，通入硫化氢气体反应6小时。结论：该合成方法为N，N－二甲胺基硫代乙酰胺的工业化生产提供了一条新途径。     

硫化氢对大鼠实验性肝硬化门静脉压力的影响

目的应用内源性硫化氢（H2S）供体硫氢化钠（NaHS）探讨内源性H2S/胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）体系对大鼠肝硬化门静脉压力的影响。方法将32只健康雌性SD大鼠随机分为4组：C组和C＋S组采用复合因素法复制肝硬化模型。模型制备52 d后,N＋S组和C＋S组大鼠腹腔注射NaHS 56μmol/（kg.d）,N组和C组腹腔注射同等剂量的生理盐水。1周后分别测定各组大鼠门静脉压力（PVP）及门静脉血浆中H2S含量;采用免疫组织化学方法检测大鼠肝门区门静脉平滑肌细胞中CSE蛋白表达。结果与N组和N＋S组相比,C组和C＋S组PVP均升高,H2S含量及CSE蛋白表达均降低;与C组相比,C＋S组PVP降低,H2S含量及CSE蛋白表达均升高。结论 NaHS作为H2S供体可能具有改善肝硬化大鼠门脉高压的作用,其机制可能与H2S含量及CSE蛋白表达升高有关。     

硫化氢在大鼠肝星状细胞氧应激中的作用

目的利用铁超载的方法在体外复制肝纤维化的氧应激模型，给予H2S供体硫氢化钠（NaHS）和内源性H2S作用的KATP通道阻滞剂格列苯脲（GLBN），论证氧应激下硫化氢对HSC细胞具有保护作用的假说。方法将HSC—T6分为8组：空白组、对照组、NaHS组（分为3个浓度组）、格列苯脲组（分为3个浓度组）。用CCK-8试剂盒测定HSC细胞增殖情况；用MDA试剂盒测定上清液MDA（丙二醛）含量；用SOD（超氧化物歧化酶）试剂盒测定上清液和裂解液中SOD活力；用RT—PCR试剂盒检测p38基因表达水平。结果1．Fe—NTA能够促进HSC的增殖，使p38基因表达水平降低、SOD活性降低、MDA浓度提高。对照组和空白组有明显差异（P〈0．05）；2．给予NaHS处理后，细胞增殖减慢，上清液中MDA含量下降，上清液、裂解液中SOD活性提高，p38基因表达水平增高（P〈0．05）；3．给予GLBN处理后，各项指标结果与给予NaHS处理后结果相对应，各组与对照组比较均有明显差异（P〈0．05）。结论氧应激下硫化氢对HSC细胞具有保护作用，可抑制肝纤维化的发生发展。     

Sodium hydrosulfide alleviates lung inflammation and cell apoptosis following resuscitated hemorrhagic shock in rats

Aim： To investigate the protective effects of hydrogen sulfide （H2S） against inflammation, oxidative stress and apoptosis in a rat model of resuscitated hemorrhagic shock. Methods： Hemorrhagic shock was induced in adult male SD rats by drawing blood from the femoral artery for 10 min. The mean arterial pressure was maintained at 35-40 mmHg for 1.5 h. After resuscitation the animals were observed for 200 min, and then killed. The lungs were harvested and bronchoalveolar lavage fluid was prepared. The levels of relevant proteins were examined using Western blotting and immunohistochemical analyses. NariS （28 pmol/kg, ip） was injected before the resuscitation. Results： Resuscitated hemorrhagic shock induced lung inflammatory responses and significantly increased the levels of inflammatory cytokines IL-6, TNF-a, and HMGB1 in bronchoalveolar lavage fluid. Furthermore, resuscitated hemorrhagic shock caused marked oxidative stress in lung tissue as shown by significant increases in the production of reactive oxygen species H202 and OH, the translocation of Nrf2, an important regulator of antioxidant expression, into nucleus, and the decrease of thioredoxin I expression. Moreover, resuscitated hemorrhagic shock markedly increased the expression of death receptor Fas and Fas-ligand and the number apoptotic cells in lung tissue, as well as the expression of pro-apoptotic proteins FADD, active-caspase 3, active-caspase 8, Bax, and decreased the expression of Bcl-2. Injection with NariS significantly attenuated these pathophysiological abnormalities induced by the resuscitated hemorrhagic shock. Conclusion： NariS administration protects rat lungs against inflammatory responses induced by resuscitated hemorrhagic shock via suppressing oxidative stress and the Fas/FasL apoptotic signaling pathway.     

硫氢化钠防治截肢术后大鼠肾脏损伤的机制

目的探讨截肢术后大鼠肾脏损伤的机制,探索外源性硫化氢（H2S）供体硫氢化钠（NaHS）的应用对肾脏结构和功能的影
响,并了解硫化氢在防治肾脏损伤中的作用机制。方法实验分为两部分。第1部分：将雄性Wistar大鼠按手术时间随机分为正
常对照、手术后6 h、NaHS干预、炔丙基甘氨酸（PPG）干预组,每组7只。测定血浆H2S、肾组织肾损伤分子-1（KIM-1）、髓过氧化
物酶（MPO）、丙二醛（MDA）、一氧化氮、尿素氮、肌酐浓度和肾组织胱硫醚β-裂解酶（CSE）活性、MPO、MDA、KIM-1水平;光镜
观察肾组织形态学变化,电镜观察线粒体结构变化。第2部分：将雄性SD大鼠随机分为4组,每组大鼠8只。提取各组肾线粒
体后测定呼吸控制率、膜电位及ATP酶活性。结果截肢后6 h 大鼠肾脏细胞和线粒体结构出现了损伤性变化,血浆及肾脏
KIM-1含量明显增加（P<0.01）,而H2S/CSE水平明显下降（P<0.01）,NaHS干预后血浆H2S/肾脏CSE水平明显升高（P<0.01）,而
肾组织损伤减轻,血浆及肾脏KIM-1含量明显降低（P<0.01）。与正常对照组相比,手术后大鼠肾脏线粒体呼吸控制率、膜电位
及ATP酶活性显著降低（P<0.01）,应用NaHS后以上指标出现明显升高,而应用PPG后无明显改善。结论截肢创伤可导致大鼠
肾脏结构和功能的损害,并导致线粒体的损伤,H2S供体NaHS的应用可使线粒体功能明显改善,并进一步减轻肾脏结构和功能
的损害,表明H2S作为是一种新的内源性介质,可能通过多条途径作用于线粒体,调节能量代谢途径,参与组织了损伤与修复的
一系列病理生理过程。
     

基于Nrf2/ARE信号通路探讨硫氢化钠对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜损伤的影响

目的 基于Nrf2/ARE信号通路探讨硫氢化钠对溃疡性结肠炎（UC）大鼠肠黏膜损伤的影响。方法将27只UC大鼠随机分为模型组、阳性对照组及硫氢化钠组,每组9只,另取8只正常大鼠为对照组。阳性对照组大鼠于模型复制成功后第3天给予柳氮磺胺吡啶（SASP）混悬溶液0.5 g/（kg·d）灌胃给药,硫氢化钠组大鼠于同时间腹腔注射1 mL硫氢化钠溶液（100μmol/L,1次/d,连续7 d）,模型组和对照组于同时间腹腔注射等量生理盐水,观察大鼠一般情况。酶联免疫吸附试验检测白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;苏木精-伊红染色观察大鼠结肠组织病理学变化;Western blotting检测大鼠结肠组织中核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件（Nrf2/ARE）信号通路蛋白水平的变化。结果 与对照组比较,模型组、阳性对照组及硫氢化钠组大鼠血清IL-8水平、TNF-α水平升高（P <0.05）;与模型组比较,阳性对照组和硫氢化钠组大鼠血清IL-8水平、TNF-α水平降低（P <0.05）。模型组、阳性对照组及硫氢化钠大鼠结肠黏膜组织CMDI评分比较,差异有统计学...     

硫化氢对大鼠肺缺血再灌注氧化损伤的影响

目的 探讨硫化氢对大鼠肺缺血再灌注氧化损伤的影响.方法 以硫化氢钠(NaHS)作为硫化氢供体.50只健康SD大鼠,随机分成假手术组、肺缺血再灌注组及硫氢化钠(NaHS)组,后者进一步分为NaHS 10、20、30μmol·kg-13个剂量组;每组10只.NaHS组实验前5 d开始每天按体重分别腹腔注射不同剂量的NaHS,实验前15min再次给药;假手术组和肺缺血再灌注组同时同方法给予生理盐水1ml·kg-1.建立大鼠在体肺缺血再灌注模型,实验结束时左心房放血处死大鼠,观察肺组织病理改变,测定肺湿/干重(W/D)值及肺组织匀浆内丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)含量及超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果 肺缺血再灌注组肺组织W/D值、MDA、MPO水平均较假手术组明显升高(P<0.01),而NaHS组上述指标高于假手术组但低于肺缺血再灌注组(均P<0.05);肺缺血再灌注组肺组织SOD、GSH-Px活性较假手术组明显降低(P<0.01),NaHS组上述指标低于假手术组但明显高于肺缺血再灌注组(P<0.05或P<0.01).上述指标在NaHS 3个剂量组间的差异无统计学意义.肺组织病理学检查结果显示,NaHS组肺缺血再灌注损伤减轻.结论 硫化氢具有一定的抗大鼠肺缺血再灌注氧化损伤的能力,其作用机制与清除氧自由基及增加内源性抗氧化酶活性有关.     

硫化氢供体硫氢化钠对肺缺血-再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的：探讨硫氢化钠（NaHS）对肺缺血-再灌注损伤（LIRI）时细胞凋亡的影响。方法：采用在体大鼠单肺原位肺缺血-再灌注模型。健康SD大鼠30只,随机均分成3组：假手术对照（Sham）组,肺缺血-再灌注（LIR）组,肺缺血-再灌注＋硫氢化钠（LIR＋NaHS）组。各组大鼠实验结束后取肺组织,观察肺组织bcl-2、bax蛋白的表达、凋亡指数（AI）、肺系数（LW/BW）、肺组织肺泡损伤率（IAR）及光镜、电镜下的肺组织形态学改变。结果：在肺小血管内膜、肺泡上皮及细支气管上皮,LIR＋NaHS组bcl-2蛋白表达及bcl-2/bax的比值显著高于LIR组（均P〈0.01）,bax蛋白的表达显著低于LIR组（均P〈0.01）;AI、LW/BW、IAR值显著低于LIR组（P〈0.05）;肺组织形态学异常改变不同程度减轻。结论：硫化氢供体（NaHS）可上调bcl-2蛋白的表达,下调bax蛋白的表达,调控bcl-2/bax之间的平衡而减轻细胞凋亡,对LIRI具有保护作用。     

硫氢化钠对经烧伤大鼠血清干预的大鼠表皮细胞的影响及其机制

目的:探讨硫氢化钠对经烧伤大鼠血清（下称烧伤血清）干预的大鼠表皮细胞的影响及其机制。方法:采用实验研究方法。取10只8个月龄雄性SD大鼠制备正常大鼠血清（下称正常血清）,取30只8个月龄雄性SD大鼠制成Ⅲ度烧伤6 h后制备烧伤血清,取10只1 d龄SD大鼠的第3代表皮细胞进行实验。将细胞分为用正常血清处理的正常血清组和...     

钾通道Kv4.2、Kv1.4在硫化氢后处理对大鼠短暂全脑缺血神经保护中的作用研究

目的研究硫氢化钠(sodium hydrosulfide,Na HS)后处理对短暂全脑缺血大鼠海马中钾通道Kv4.2和Kv1.4 mRNA表达变化的影响及其脑保护作用,从而探讨Na HS对大鼠短暂全脑缺血神经保护作用的机制。方法用4VO方法建立大鼠短暂性全脑缺血(transient global cerebral ischemia,t GCI)模型,大鼠被随机分配到3组,分别为:假手术组(sham)、t GCI组、Na HS后处理组。Na HS后处理组为t GCI之后1 d,给予大鼠腹腔注射Na HS 24μmmol/kg或者180μmmol/kg。通过尼氏染色与Neu N免疫染色确定海马神经元的死亡,通过RT-PCR方法检测海马组织Kv4.2和Kv1.4mRNA水平的表达变化。结果 (1)与t GCI组比较,在t GCI之后1 d给予24μmol/kg Na HS后处理使海马CA1区存活细胞数目显著增加,而高剂量的Na HS(180μmol/kg)后处理对t GCI大鼠海马CA1区则无明显的保护作用。(2)在Re 26 h和Re 48 h,海马组织中Kv4.2、Kv1.4的mRNA表达水平均明显低于假手术组(P<0.05)。在Re 26 h+Na HS组,kv4.2(1.24±0.08)和kv1.4(1.11±0.07)的mRNA表达水平均分别高于Re 26 h组的kv4.2(0.75±0.04)和kv1.4(0.79±0.06),差异均有显著性(P<0.05)。结论外源性Na HS可能通过上调大鼠t GCI后海马区Kv4.2和Kv1.4 mRNA的表达,从而导致膜电位超极化,降低神经元兴奋性和氧耗,继而保护神经元免受脑缺血损伤。