漆黄素与β-环糊精衍生物的包合行为及性能研究

目的制备漆黄素(fisetin,FIT)与β-环糊精衍生物的包合物,并对其包合行为和包合物的水溶性、稳定性进行研究。方法通过超声法制备了漆黄素与2-羟丙基-β-环糊精[(2-hydroxypropyl)-β-cyclodextrin,HP-β-CD]、2,6-二甲基-β-环糊精[(2,6-di-O-methyl)-β-cyclodextrin,DM-β-CD]和磺丁基醚-β-环糊精(sulfobutyl ether-β-cyclodextrin,SBE-β-CD)的包合物;采用核磁共振氢谱(~1H-NMR和~2D-NMR)、X射线粉末衍射(X-ray powder diffraction,XRD)、差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)、扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)、紫外-可见光谱法(ultraviolet-visible spectrometry,UV)、Job曲线法对包合物进行表征;测定了包合物的水溶性,在模拟人体胃液和肠液环境下进行了稳定性的测试。结果核磁共振(~1H-NMR和~2D-NMR)分析表明,漆黄素从小口端进入HP-β-CD空腔,从大口端进入DM-β-CD和SBE-β-CD空腔。漆黄素与HP-β-CD、DM-β-CD和SBE-β-CD形成包合物后,其溶解度从0.05 mg/mL分别提高到了 3.45、3.70、4.60 mg/mL。结论漆黄素与β-环糊精衍生物形成包合物后,其溶解度、热稳定性及生物环境稳定性得到明显提高。     

漆黄素、槲皮素的体外抗凝血和溶血栓作用

目的:观查漆黄素和槲皮素对犬体外全血凝血时间、体外已成型血栓及同质量已成型血栓溶解率的影响.方法: 以pH=7.4的生理盐水为阴性对照,分别以肝素钠和尿激酶为阳性对照,对漆黄素和槲皮素进行犬体外抗凝血、溶栓试验.测定凝血时间、血栓质量及血栓溶解率,并用瑞氏染色法观察红细胞的数量和形态.结果:漆黄素和槲皮素体外抗凝血和溶血栓实验表明,与阴性对照组比较,漆黄素和槲皮素组全血凝血时间显著延长、已成型血栓的质量显著降低,血栓的溶解率显著提高(P＜0.01).结论: 漆黄素和槲皮素具有明显的体外抗凝血和溶血栓作用.     

漆黄素通过调控TLR4/NF-κB通路减轻大鼠肝细胞缺氧/复氧损伤北大核心CSCD

目的探讨漆黄素对大鼠肝细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及其机制。方法构建BRL-3A大鼠肝细胞H/R模型,并给予漆黄素处理。CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,微板法检测细胞上清液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;ELISA检测细胞上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的水平,实时定量PCR检测BRL-3A细胞Toll样受体4(TLR4)、核因子κBp65(NF-κBp65)mRNA水平,Western blot法检测TLR4、NF-κBp65蛋白水平。结果 H/R处理的BRL-3A细胞存活率下降,细胞凋亡增多,培养细胞上清中ALT、AST水平和IL-1β、TNF-α升高;漆黄素处理可提高细胞存活率,减少细胞凋亡,降低ALT、AST水平,抑制IL-1β、TNF-α的释放,同时抑制H/R诱导的TLR4、NF-κBp65水平升高。结论漆黄素可能通过调节TLR4/NF-κB信号通路减轻大鼠肝细胞H/R损伤。     

漆黄素对巨噬细胞和T淋巴细胞的免疫调节作用

目的探讨漆黄素(Fisetin,FIS)对小鼠巨噬细胞吞噬功能、NO的释放及对T淋巴细胞体外活化、增殖的影响。方法无菌制备小鼠巨噬细胞悬液及淋巴细胞悬液;荧光微球结合流式细胞术(FCM)分析FIS对巨噬细胞吞噬作用的影响;Griess试剂盒检测巨噬细胞NO的释放;双色荧光抗体染色结合FCM,检测CD3+T细胞CD69的表达水平;CFSE标记技术检测T细胞增殖的情况。结果 2.5μmol/L,5μmol/L,10μmol/LFIS均能明显抑制巨噬细胞的吞噬微球的能力;FIS能抑制LPS和IFN-γ刺激的巨噬细胞的NO的产生(P<0.05);FIS对ConA刺激的T细胞表达CD69有抑制作用,并能有效抑制ConA诱导的T细胞增殖(P<0.01),且均呈剂量依赖性。结论 FIS能显著抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力和分泌NO的能力,并能够抑制T细胞的活化和增殖,有望发展成为一种新的免疫抑制药物。     

漆黄素对大鼠膀胱癌的预防作用及其机制研究

目的:建立以N-甲基-N-亚硝基脲（N-methyl-N-nitrosourea,MNU）诱发的Wistar大鼠膀胱癌模型,研究漆黄素对大鼠膀胱癌的预防作用及其作用机制。方法:采用膀胱灌注MNU的方法诱发Wistar大鼠原位膀胱肿瘤（MNU灌注时间为第2、4、6和8周）。第1周至18周行漆黄素溶液（400μmol/L）膀胱灌注。在第19周时处死大鼠,获得的膀胱组织行苏木精-伊红（HE）染色观察病理变化。TUNEL末端标记法测定肿瘤组织中细胞凋亡情况。Western blot检测凋亡相关蛋白表达。结果:第19周时漆黄素处理组膀胱癌的发生率为22.2%（4/18）,MNU诱癌组肿瘤的发生率为70.6%（12/17）,两组相比肿瘤的发生率、分期之间差异均有统计学意义。TUNEL实验证实漆黄素显著增加膀胱肿瘤细胞的凋亡。Western blot结果发现,漆黄素上调促凋亡分子p53和Bax蛋白表达,下调抗凋亡分子Bcl-2和Survivin表达。结论:漆黄素可抑制MNU膀胱灌注诱导的大鼠膀胱癌的发生与进展,其机制可能与诱导膀胱肿瘤细胞凋亡有关。     

漆黄素联合胡椒碱的抗抑郁作用及其机制研究

目的：探讨低剂量漆黄素（Fisetin）联合阈下剂量胡椒碱的抗抑郁作用是否涉及单胺机制。方法采用行为绝望抑郁模型,即小鼠强迫游泳实验和悬尾实验,观察低剂量漆黄素与阈下剂量胡椒碱急性给药对小鼠绝望模型不动时间的影响,同时观察两药联用对小鼠自主活动的影响。高效液相-电化学检测脑区中单胺递质的含量,荧光分光光度法检测单胺氧化酶（MAO）活性。结果漆黄素（1.25 mg/kg,2.5 mg/kg,5 mg/kg, ig）与阈下剂量胡椒碱2.5 mg/kg·ip联合应用能显著减少小鼠强迫游泳和悬尾实验中的不动时间,且实验剂量范围内药物不影响小鼠的自主活动。低剂量漆黄素与阈下剂量胡椒碱合用能升高海马、皮层和杏仁核中的单胺递质水平同时降低脑内的MAO活性,并且具有统计学意义。结论低剂量漆黄素与阈下剂量胡椒碱联合用药能改善抑郁症样行为,该机制可能是通过抑制单胺氧化酶的活性,从而增加相关的神经递质。     

紫外分光光度法测定黄栌糖浆中漆黄素含量

<正> 黄栌糖浆是以黄栌(Cotinus coggygria Scop.)茎枝为原料制成的治疗急慢性黄疸型传染性肝炎的有效制剂,其有效成分为漆黄素。并经药理试验证明具有明显的降黄和保肝作用。质量控制主要指标为漆黄素。但至今尚未有含量测定方法的报告。本文报告用紫外分光光度法测定黄栌糖浆中漆黄素含量的方法。     

漆黄素固体分散体的制备

目的制备漆黄素固体分散体。方法分别采用熔融法和溶剂法制备固体分散体。在单因素试验基础上,以载体种类、药载比、搅拌时间为影响因素,累积溶出率为评价指标,正交试验优化制备工艺。傅里叶红外光谱考察药物与载体间的相互作用,差示扫描量热法分析药物存在状态。结果溶剂法更适合制备固体分散体。最佳条件为载体PVPK-30,药载比1∶12,搅拌时间30 min,20 min内累积溶出率达90.87%。PVPK-30与原本以无定型或分子形式存在的漆黄素之间可能有着氢键缔合。结论漆黄素制备成固体分散体后,可显著提高其溶出度。     

漆黄素对淋巴细胞和巨噬细胞分泌NO的免疫调节作用(英文)

目的探讨漆黄素(fisetin)在体外对小鼠T淋巴细胞增殖、活化、凋亡、ROS的释放和巨噬细胞NO释放功能的影响。方法 CFDA-SE标记技术结合流式细胞术检测漆黄素对T淋巴细胞增殖及增殖指数(PI)的影响。荧光抗体染色结合流式细胞术分析漆黄素对T淋巴细胞在Con A的刺激下CD25的表达水平的影响。DIOC染色检测细胞线粒体膜电势的变化情况,H2DCFDA染色检测细胞ROS释放的变化。Griess试剂盒用以检测巨噬细胞NO释放功能。结果漆黄素(2.5,5和10μmol/L)明显抑制T淋巴细胞增殖,增殖指数(PI)降低并具有剂量依赖性。漆黄素可明显抑制CD25的表达(P<0.01)及ROS的释放。DiOC6(3)染色分析显示,漆黄素可促进细胞的凋亡。巨噬细胞在LPS和IFN-γ的刺激下的NO释放量明显增加,而在漆黄素作用下NO释放量明显下降(P<0.01)。结论漆黄素是一种潜在的免疫调节剂。