人端粒酶RNA的cDNA探针制备及其对胃粘膜细胞端粒酶RNA表达的检测

目的 建立人端粒酶RNA表达的检测方法。方法 制备人端粒酶RNA，(human telomeraseRNA，hTR)的cDNA探针，分别应用RNA斑点杂交与端粒重复序列扩增法(TRAP)分析检测不同胃粘膜的端粒酶RNA的表达与端粒酶活性。结果 人端粒酶RNA的cDNA探针制备成功。18例活检胃癌组织及45例手术胃癌组织RNA斑点杂交检测的阳性率均为l00％，相应TRAP分析的阳性率分别为88．89％、86．67％，低于RNA斑点杂交(P＜0．05)。同时RNA斑点杂交结果提示在非癌胃组织中随着肠化程度增高人端粒酶RNA表达也增强。结论 RNA斑点杂交检测人端粒酶RNA，具有高度的敏感性和特异性，弥补了TRAP分析敏感性不足的缺点。     

地高辛标记人乳头状瘤病毒DNA探针的制备及其应用

本文将含ＨＰＶ重组质粒的大肠杆菌活化，扩增，提取，酶切回收，获得纯化的７．９ｋｂＨＰＶ ＤＮＡ片段，通过随机引物标记法制成Ｄｉｇ－ＨＰＶＤＮＡ探针。用此探针进行斑点杂交，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转印杂交检测女性生殖器活检组织标本中的ＨＰＶＤＮＡ，并检测其敏感生，特异性及重复性。１３３例活检组织标本中，经病理切诊断为尖锐湿疣的标本，其ＨＰＶ６ｂ和ＨＰＶ１１检出率为８０．６５％，非尖锐湿疣为６．９３％。试验证     

聚合酶链反应标记轮状病毒地高辛素探针的初步应用

目的为探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术标记的地高辛素（ＤＩＧ）探针的特异性和敏感性。方法用聚合酶链反应技术制备地高辛素标记的人类轮状病毒（ＨＲＶ）ｃＤＮＡ探针，经ｃＤＮＡ－ＲＮＡ斑点杂交。结果该探针具ＨＲＶ特异性，可检出１０ｐｇ的ＲＮＡ。应用该项技术检测了１２０份婴幼儿腹泻粪样标本，其阳性率为６５％，明显高于ＰＡＧＥ方法（４９．１％）的阳性率。结论ＰＣＲ方法直接制备地高辛素标记的ｃＤＮＡ探针方便、快速、特异性好、标记率高。     

乙型肝炎病毒检测方法比较与临床意义

目的：对FQ－PCR与常规PCR和探针斑点杂交的灵敏性比较及临床应用。方法：采用FQ－PCR与常规PCR和探针斑点杂交三种方法检测HBV－DNA。结果：在156例乙型病毒性肝炎中,FQ－PCR的检出率是93．59％（146／156）,常规PCR为76．28％（119／156）,探针斑点杂交为71．80％（112／156）。FQ－PCR显高于常规PCR及探针斑点杂交,P值均＜0．05）。结论：FQ－PCR有灵敏,特异,简便的优点,它能为临床疗效观察提供直接的指标。     

IL—1βmRNA在胎儿脑及U251细胞中的表达

目的 探讨IL－1βmRNA在胎儿脑中的表达与某些疾病的关系。方法 采用杂交法检测胎儿脑中IL－1βmRNA的水平,利用Northern杂交法检测人脑胶质瘤传代细胞U251中IL－1β的表达情况。结果 显示了TPA可明显刺激U251中IL－1β的表达。结论 孕2个月胎儿脑在未加任何刺激的自然情况下即有中IL－1β的表达。     

小儿咽喉乳头状瘤组织人乳头瘤病毒检测及型别分析

目的：探讨人乳头瘤病毒感染和小儿咽喉乳头状瘤的关系。方法：应用ＰＣＲ和ＰＣＲ产物斑点杂交技术检测３５例小儿咽喉乳头瘤组织和１０例小儿声带小结（对照组）ＨＰＶ６、１１、１６、１８、３３五个型别的ＤＮＡ。结果：乳头瘤组织ＨＰＶ感染率为９１．４％（３２／３５）,其中ＨＰＶ６型检出率为５４．２％（１９／３５）,ＨＰＶ１１型感染率为２５．７％（９．３５）,多重型ＨＰＶ６＋１１感染率为１１．４％（４／３５）;     

聚合酶链反应及斑点杂交技术对外耳道尖锐湿疣的病因学研究

尖锐湿疣 (Ｃｏｎｄｙｌｏｍａａｃｕｍｉｎａｔａ ,ＣＡ)由人乳头瘤病毒 (Ｈｕ ｍａｎＰａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ ,ＨＰＶ)感染引起 ,尽管近年来的发病率明显升高 ,但是发生于外耳道者罕见。研究外耳道ＣＡ的病因 ,对于减少传播、控制复发具有重要意义。1　临床资料男性患者 ,40岁 ,因右耳痛痒 1月伴少量出血 1ｄ入院。 1月前在街头地摊上掏耳后常感耳内痒 ,自己掏挖 ,轻微疼痛 ,近来挖耳后少许出血。查 :右外耳道前壁见一新生物 ,乳头状突起 ,质软 ,周围少许干血痂。否认冶游史 ,无外生殖器ＣＡ。活检 :鳞状上皮乳头状瘤。于 1994年 9…     

聚合酶链反应及斑点杂交技术对外耳道尖锐湿疣因学研究

尖锐湿疣(Condyloma acuminata,CA)由人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)感染引起,尽管近年来的发病率明显升高,但是发生于外耳道者罕见.研究外耳道CA的病因,对于减少传播、控制复发具有重要意义.