捕获法ELISA检测抗蛋白酶3抗体对韦格纳肉芽肿的临床应用价值

目的探讨捕获法ELISA检测血液中抗蛋白酶3抗体对韦格纳肉芽肿(Wegener's granulomatosis,WG)的敏感性和特异性以及与间接免疫荧光法(indirec timmunofluorescence assay,IIF)的相关性。方法用捕获法ELISA、经典ELISA及IIF检测72例WG患者、206例健康献血员和24例其他自身免疫性疾病患者血清中的抗蛋白酶3(proteinase3,PR3)抗体和胞浆型抗中性粒细胞胞浆抗体(cytoplasmic anti-neutrophil cytoplasmic antibodies,cANCA)。结果PR3捕获法ELISA、经典ELISA测抗PR3对WG的敏感性分别为87.5%和73.6%,二者的特异性均为100%;单独用捕获法ELISA或IIF检测,对WG的检出率分别为87.5%和84.7%,而联合应用检出率可达到91.6%。结论捕获法ELISA检测抗PR3对WG的敏感性以及与IIF的相关性优于经典ELISA,对可疑WG患者,两法联合应用可提高WG的诊断率。     

慢性阻塞性肺疾病血清基质金属蛋白酶-9和组织型金属蛋白酶抑制物-1的检测及其意义

目的 检测慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)急性加重期、稳定期患者和健康对照者血清中基质金属蛋白酶-9 (matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和组织型金属蛋白酶抑制物-1 (tissue inhibitor of met...     

抗蛋白酶激活受体?鄄2单克隆抗体的制备与鉴定

目的:制备出一种具有多种用途的抗蛋白酶激活受体-2(PAR-2)单克隆抗体(mAb).方法:用人工合成的11肽PAR-2作为免疫原,采用皮下多点注射方法免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合,杂交瘤细胞采用间接ELISA法筛选.通过ELISA、Dot blot、免疫组化染色、流式细胞分析、激光共聚焦显微镜技术鉴定mAb的特异性.结果:获得1株可稳定分泌抗:PAR-2 mAb的杂交瘤细胞.其分泌的mAb为IgM型,ELJSA法检测杂交瘤细胞培养上清效价为1:16;点杂交分析表明此抗体可特异性结合PAR-2;免疫组化染色显示该单克隆抗体与人肺组织中的肺泡上皮细胞和平滑肌细胞,结肠组织中的腺上皮细胞和疑似淋巴细胞,扁桃体中的淋巴细胞,包皮组织中的鳞状上皮细胞呈阳性反应;流式细胞仪分析显示与人肺腺癌细胞系A549细胞中的PAR-2呈阳性反应;激光共聚焦扫描显微镜观察发现荧光标记的阳性反应物位于A549细胞的胞膜和胞浆.结论:成功地制备出可用于免疫组化和点杂交的抗PAR-2单克隆抗体,为PAR-2相关性疾病的研究提供了有用的工具.     

慢性阻塞性肺疾病的蛋白酶/抗蛋白酶平衡失调机制研究进展

1963年瑞典Laurell和Eriksson发现α1-抗胰蛋白酶（α1—AT）缺乏与青年期肺气肿关系密切。1968年他们提出蛋白酶一抗蛋白酶假说，指出α1-抗胰蛋白酶缺乏使蛋白酶活性增高，肺的结构蛋白特别是弹性蛋白被降解，而弹性蛋白是细胞外基质（ECM）成分，其降解造成肺结构破坏，导致肺气肿。至今这种假说仍被广泛采用。近年来从蛋白酶／抗蛋白酶失衡、慢性炎症损伤与炎症修复假说，到细胞和分子学角度对肺气肿发病机制的研究有了很大进展，     

慢性阻塞性肺疾病易感基因的研究进展

Etiology of chronic obstructive pulmonary disease remains unknown but despite some inconsistencies in reports on inflammatory cells,mediators and proteases involved in the pathogenesis of chronic obstructive pulmonary disease,genetic risk factors were proposed as a cause of susceptibility to the disease.Results of many studies suggested polygenic inheritance,with the genetic component consisting of several genes of a small effect each,rather than of single major gene.We are going to review the clinical importance of alpha-1 antitrypsin,matrix metalloproteinase,Tissue inhibitor of metalloproteinases-2,Vitamin-D-binding protein,glutathione S-transferase,microsomal epoxide hydrolase,heine oxygenase-1 genes,Surfacant protein and IL-8,TNF-α polymorphisms associated with susceptibility and progression of the chronic obstructive pulmonary disease.It was reported that there are combination with different genes or different locus in the same gene.Animal model genetics may help in clarifying some aspects of pathogenesis.If this type of study were followed by quantitative trait locus analysis it may help to identify candidate genes for further study in humans.Genome-wide association analysis may nOW be performed looking for up to 500000 SNPs at any one time to identify regions in linkage disequilibrium(LD)with features of COPD.This approach does,however,have limitations.It means there are millions of data to analysis,but Software available from industry and academia can help to deal with that.The number of areas being investigated will raise the potential for false positive results,SO confirmation of any positive results in multiple independent populations should be sought.As more genes are identified we may be able to characterize patients with COPD more accurately and target therapies to those subgroups most likely to benefit.     

慢性阻塞性肺疾病发病机制的发展状况

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种常见病、多发病,患病率和死亡率均高,其病情呈进行性发展,严重影响着患者的劳动能力和生活质量。世界卫生组织(WHO)资料显示:目前,COPD已成为全球第四位死亡原因,且逐年增加,预计到2020年将上升为全球第三位死亡原因和经济负担的第五位[1]。确切的病因还不清楚,发病机制已有多种学说,如:蛋白酶和抗蛋白酶学说、氧化损伤假说、免疫失衡和感染假说等。随着医学技术的发展目前对COPD的发病机制又提出了新的假说,即:肺炎衣原体慢性感染学说。本文结合相关文献,对COPD发病机制的发展状况作一综述如下。     

间充质干细胞治疗慢性阻塞性肺疾病机制研究进展

目的慢性阻塞性肺疾病(COPD)主要采用药物治疗,但暂无可治愈COPD的药物。目前,关于间充质干细胞(MSCs)治疗肺部疾病的研究较多。本文总结了COPD发病机制的研究进展,在此基础上探讨MSCs治疗COPD的疗效及其可能的机制,主要包括抑制炎症反应、纠正蛋白酶/抗蛋白酶失衡、抗细胞凋亡、抑制氧化应激及转分化为肺泡上皮细胞等,为MSCs应用于临床提供理论依据。     

慢性阻塞性肺疾病

<正>慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一组气流受限为特征的肺部疾病,气流受限不完全可逆,呈进行性发展。COPD主要累及肺部,但也可以引起肺外各器官的损害。因肺功能进行性减退,严重影响患者的劳动力和生活质量。     

抗蛋白酶-3抗体在韦格纳肉芽肿病和其他血管炎中的临床应用研究

目的探讨抗蛋白酶-3(PR3)抗体在韦格纳肉芽肿病(WG)和其他血管炎患者中的表达和临床意义。方法选取2001年3月至2006年7月山西医科大学第二医院确诊的住院患者576例。系统性血管炎组111例,其中9例WG(包含21份跟踪随访血清)；结缔组织病(CTD)组403例；各型肾小球疾病患者62例及健康对照30名,均采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗PR3抗体、抗髓过氧化物酶(MPO)抗体；采用间接免疫荧光法(IIF)检测抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA),观察抗PR3与ANCA在WG和其他血管炎中的阳性率,且追踪WG治疗前后抗PR3吸光度值和ANCA的滴度变化。结果588例血清中抗PR3抗体阳性23例,分别为WG 15例(15/21,71．4％)；系统性红斑狼疮(SLE)6例(6/213,2．8％)：类风湿关节炎(RA)1例(1/135,0．7％)；混合结缔组织病(MCTD)1例。大动脉炎、白塞病,过敏性紫癜等常见的原发性系统性血管炎、肾病组、健康对照组未发现抗PR3抗体阳性。抗PR3抗体和胞质型ANCA(cANCA)在WG中阳性率最高,差异有统计学意义(P＜0．05)。抗PR3对WG诊断的敏感性71．42％,特异性98．58％。联合应用抗PR3与cANCA诊断WG的敏感性61．90％,特异性99．82％。抗PR3吸光度值、ANCA的滴度及伯明翰血管活动度评分(BVAS)随治疗好转下降。结论抗PR3抗体是诊断WG的一种敏感、特异标记抗体,抗PR3抗体和ANCA同时在临床应用,有利于WC和其他系统性血管炎的早期诊断和鉴别诊断。抗PR3抗体还可作为临床疗效观察指标。