氧化苦参碱对人胃癌SGC-7901细胞株生长的影响

目的观察氧化苦参碱对人胃癌SGC-7901细胞株体外增殖率的影响情况。方法噻唑蓝（MTT）比色测定法确定氧化苦参碱对胃癌SGC-7901细胞存活抑制作用。结果试验浓度下氧化苦参碱对SGC-7901细胞增殖抑制作用呈剂量依赖性，当浓度为12mg／ml时，对SGC-7901增殖的抑制率最大，达到87．63％。结论氧化苦参碱对人胃癌SGC-7901细胞的增殖具有明显的抑制作用。     

MTT法评价医用高分子材料的细胞毒性

为研究医用高分子材料的细胞毒性，采用能快速评定细胞增殖率和细胞毒性的比色分析方法-MTT比色法，分别检测三类医用高分子材料的浸提液对小鼠成纤维细胞L929细胞相对增殖率的影响，评价其细胞毒性。参照美国药典的评价标准，三类医用高分子材料均呈现出高的细胞相对增殖率，其细胞毒性为l级，即无细胞毒性。     

非聚焦超声对溶液中GLC-82肺腺癌细胞损伤的实验研究

目的:探讨不同功率及不同作用时间的非聚焦超声(none focused ultrasound,NFU)对溶液中肺癌细胞的作用,为杀灭弥漫在胸水及腹水中或浸润在组织中的癌细胞提供实验依据。方法:台盼蓝拒染法测NFU辐照GLC-82肺腺癌细胞后细胞的即刻存活率,MTT法检测其作用后24 h细胞的增殖率,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率。结果:(1)GLC-82细胞的即刻存活率随着辐照功率和作用时间的不断增加明显下降;(2)超声辐照24 h后,随着超声辐照时间和剂量的不断增加,细胞的增殖率明显下降,时间-效应各组之间、剂量-效应各组之间细胞的增殖率差异均有显著性(P<0.05);(3)超声辐照细胞的凋亡率均高于阴性对照,但其周期即刻未发生明显变化。结论:NFU能杀伤溶液中GLC-82肺癌细胞并抑制其增殖,较低功率的超声可能以诱导细胞凋亡为主,较高功率时则可能以杀伤细胞为主。超声对细胞周期的影响为迟发性效应。     

钴合金和钛合金的细胞毒性研究

对植入材料磨损态的Co-29Cr-5Mo(CCM)和Ti-6Al-4V(Ti64)的细胞毒性进行研究。与固溶态相比,在完全培养液中,通过噻唑蓝(MTT)法研究两种合金在不同浸提浓度、不同浸提时间下的材料浸提液对小鼠成纤维细胞(L929)的毒性及影响机制。扫描电子显微镜(SEM)观察腐蚀前后材料表面的变化,ICP发射光谱仪(ICP-MS)检测CCM和Ti64合金中主要金属离子的释放,电化学工作站(CHI760E)表征两种磨损态合金在完全培养液中的腐蚀情况。MTT实验结果表明:磨损态的两种合金随材料浸提浓度和时间的增大,细胞的相对增殖率(RGR)均减小,其中CCM的RGR由98.36%减小至73.28%,细胞毒性由0级升至2级;Ti64的RGR减小至85.86%,细胞毒性升至1级。ICP-MS结果表明,磨损态合金有害离子的释放量随着浸提时间不断上升,浸提至168 h时,磨损态CCM合金Co和Cr释放量分别高达1 249.7和293.9 μg/L;磨损态Ti64合金Al和V释放量分别为30.7和19.7 μg/L。CCM的Tafel曲线和SEM分析表明,在完全培养液中,CCM表面化学位较高的棱、尖角以及微米级沟壑位置发生了缝隙腐蚀,造成金属离子的释放,并对L929细胞的生长和分裂产生抑制作用。     

树脂单体对高度增殖及克隆培养的根尖牙乳头干细胞牙向分化与矿化能力的影响（英）

对从14至18岁健康供者发育期第三磨牙提取的根尖牙乳头干细胞进行培养,并评估其增殖率、集落形成率及干细胞标志物（STRO—1,CD146,CD34,CD45,CD105,CD117-c-Kit,CD24,CD90,Nanog,Oct3／4）的表达,从而筛选出那些具有增强干细胞和牙向分化特性的培养基。     

应用siRNA敲低MMP-9基因表达后对人U251胶质瘤细胞增殖和侵袭的作用

目的 研究siRNA靶向抑制MMP-9基因对U251细胞的增殖和侵袭的抑制作用.方法 采用oligofectamine转染试剂将siRNA导入到胶质瘤细胞U251,分别采用半定蕈PCR及Western blotting从mRNA和蛋白水平检测干扰效果;采用细胞生长曲线、MTT和流式细胞法检测siRNA对细胞增殖的影响,应用2D、3D生长实验(Two,three-dimensional growth experiment)和Transwell实验检测转染MMP-9 siRNA后对细胞侵袭的影响.结果 半定量PCR以及Western blotting显示MMP-9基因的mRNA转录水平以及蛋白水平的表达均得到抑制;细胞生长曲线、MTT检测及流式细胞仪检测结果显示MMP-9基因表达被抑制后,U251细胞增殖率明显受到抑制,2D、3D生长实验和Transwell侵袭实验证实转染后U251细胞体外侵袭能力明显降低(P＜0.01).结论 应用siRNA敲低胶质瘤细胞MMP9基因表达后,胶质瘤细胞的侵袭和增殖能力明显下降.     

nHACP／CF材料与成骨细胞体外复合培养的实验研究

目的:检测甲壳素纤维增强多孔胶原基骨组织工程支架材料(nHACP/CF)对成骨细胞附着增殖的影响,为骨组织工程支架材料的选择提供实验依据.方法:原代培养大鼠成骨细胞,将第3代细胞与nHACP/CF材料体外复合培养.碱性磷酸酶(ALP)染色对成骨细胞进行鉴定;将不同浓度成骨细胞接种到nHACP/CF支架上,通过检测ALP活性测定最佳接种浓度;通过扫描电镜观察和各培养时点细胞增殖率及ALP活性检测,评价nHACP/CF材料对成骨细胞的影响.采用SPSS11.5软件包对测定结果进行单因素方差分析.结果:大鼠成骨细胞ALP染色阳性.统计分析表明,6×105/ml为细胞最佳接种浓度;大鼠成骨细胞能在nHACP/CF材料上附着、增殖,其生长及功能不受抑制.结论:nHACP/CF材料是大鼠成骨细胞附着生长的良好载体.     

壳聚糖-丝素支架与真皮间充质干细胞的体外复合培养

背景:壳聚糖与丝素有各自的优点和不足,将两者共混,可取长补短,改善性能.进行壳聚糖-丝素支架与真皮间充质干细胞体外复合培养的研究,可进一步为工程化组织构建打下基础.目的:将壳聚糖-丝素支架与大鼠真皮间充质干细胞体外复合培养,探讨壳聚糖-丝素支架对真皮间充质干细胞吸附、生长及增殖的影响.方法:①壳聚糖和丝素以质量比为3:7充分搅拌混匀,冻干制作壳聚糖-丝素海绵状支架,并测其孔径、孔隙率等指标.②将该支架与大鼠真皮间充质干细胞复合进行体外培养,倒置相差显微镜观察细胞与支架复合生长、基质形成以及细胞与支架结合的情况.分别于培养6,12,24 h消化支架上的细胞,计算细胞吸附率.于培养2,4,6,8,10 d后,用MTT法检测细胞增殖率情况.以无支架的细胞培养作为对照组.结果与结论:①倒置相差显微镜及扫描电镜下观察发现该支架有分布较均匀且细密的小孔,孔与孔之间相互连通,孔径大小较均匀,孔径在100～150 μm之间,孔隙率为90.3%.②24 h内,真皮间充质干细胞对支架的黏附率随着时间的增加而逐渐增高,24 h时的黏附率为93%,表明真皮间充质干细胞可良好地黏附于壳聚糖-丝素支架上.③MTT法检测细胞增殖结果显示,于培养各检测时间点,实验组与对照组比较差异均无显著性意义.于培养早期(第2,4天),对照组增殖细胞数略高于实验组;于培养第10天,实验组的增殖细胞数略高于对照组.倒置相差显微镜观察细胞于支架上的形态和附着良好,并有较旺盛的细胞基质分泌.表明真皮间充质干细胞在该支架上能良好地生长、增殖.提示壳聚糖-丝素支架是真皮间充质干细胞体外培养的良好支架材料.     

IL-18基因转染人膀胱癌T-24细胞及其表达的研究

目的：建立表达IL-18基因的人膀扰癌细胞系IL-18／T-24，探讨外源性IL-18基因对T-24细胞生长及其生物学性状的影响。方法：将插入IL-18基因的质粒，应用逆转录病毒载体LXSN感染ψ2（ecoiropic）和PA317（amphotropic）两种包装细胞，通过药物G418筛选获得表达IL-18蛋白的PA317阳性细胞克隆，用IL-18／PA317培养上清转染T-24细胞，获得表达IL-18的IL-18／T-24细胞分别用RT-PCR、ELISA和免疫组化染色分析IL-18／T-24细胞表达IL-18的mRNA和蛋白的水平，筛选出高表达IL-18的IL-18／T-24细胞克隆用于下层研究中；用流式细胞仪检测转染前后细胞的周期变化及细胞凋亡情况；用ELISA法检测IL-18／T-24细胞培养上清诱导脾细胞分泌IFN-γ的能力；采用二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）比色法，测定转染前后细胞增殖及黏附能力的变化。结果：外源性IL-18基因转染的人膀胱癌细胞系IL-18／T-24，在mRNA水平和蛋白水平均可获得稳定表达；并且，IL-18／T-24细胞的培齐上清可明显促进小鼠脾细胞分泌IFN-γ（P〈0．01）、IL-18／T-24细胞与LXSN／T-24和T-24比较，细胞周期及细咆凋亡率无显著性差异（P〉0．05），IL-18／T-24细胞的增殖率与LXSN／T-24和T-24细胞相比虽有所降低，但无显著性差异（P〉0．05）结论：建立的稳定表达IL-18的IL-18／T-24细胞，既保持了肿瘤细胞原有的免疫原性，又具有分泌IL-18的功能，引起较强的免疫应答反应IL-18／T-24细胞与LXSN／T-24和T-24细胞相比较，其生物学性状元明显差异，可进一步用于肿瘤相关免疫基因治疗的研究。