PCR技术鉴定南水北调中线水源地淡水虾囊蚴并行系统进化分析

目的:基于PCR结合测序分析建立一种准确判断淡水虾类感染吸虫囊蚴的分子鉴定方法,并对其系统进化进行分析,追溯其起源。方法:采用肌肉压片直接挑取法取出囊蚴,试剂盒提取基因组DNA。用吸虫通用引物对所提DNA进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳鉴定。PCR阳性样本采用各类吸虫特异性引物分别进行扩增,PCR产物电泳鉴定,阳性样本送公司进行双向测序。使用DNAstar软件拼接序列,离线软件MEGA5比对测序结果并建立系统进化树并分析其起源。结果:制作虾肌肉压片20张共挑取囊蚴32个,获取了囊蚴基因组DNA。三对通用引物均扩出480 bp左右的单一条带。吸虫特异性引物扩增时,仅有针对于吸虫异形科的ITS2和28S rRNA序列分别扩增出了约480 bp和1 300 bp的特异性条带。软件分别拼接出了419 bp和770 bp的截断序列。系统进化树分析显示,虾类所感染吸虫囊蚴有两种,分别与Neochoanostoma spp和Dimerosaccus oncorhynchi高度同源。结论:应用PCR结合测序分析在十堰地区首次建立了淡水虾类囊蚴的分子鉴定方法,为我国吸虫系统分类和南水北调中线水源地食源性吸虫病的研究奠定了基础。     

广西横县某水库小型鱼类携带吸虫囊蚴的分子生物学初步检测

目的了解广西横县鱼类吸虫感染的虫种,评价形态学结合ITS2序列分析鉴定囊蚴的有效性。方法采集横县某水库小鱼,采用人工消化法消化收集囊蚴,在解剖镜下分捡单个囊蚴,按形态学特征鉴定分类,提取不同形态囊蚴的DNA后进行ITS序列PCR扩增和测序,获得的序列在NCBI上进行Blast分析,并用Mega 6.0.6软件构建系统发生树。结果检测小型鱼类112条,吸虫囊蚴阳性率为39.29%。观察到5种不同形态的囊蚴。ITS2序列分析鉴定为4种吸虫:华支睾吸虫(Clonorchis sinensis)、钩棘单睾吸虫(Haplorchis pumilio)、台湾棘带吸虫(Centrocestus formosanus)和日本全冠吸虫(Holostephanus dubinini)。其中一种在形态学上判定为非人类吸虫的囊蚴经分子生物学鉴定为华支睾吸虫。结论在横县某水库小鱼中检出4种吸虫囊蚴,分别为华支睾吸虫、台湾棘带吸虫、钩棘单睾吸虫和日本全冠吸虫。仅靠形态学上对鱼类吸虫囊蚴进行虫种鉴定有一定的缺陷,可以结合ITS2序列分析来完善。     

斯氏狸殖吸虫成虫尿素溶解性抗原蛋白组成及活性成份

采用8M尿素和简化方法分离、提取斯氏狸殖吸虫成虫尿素溶解性抗 原(PsAWU),并对该抗原和水溶性抗原(PsAWA)的血清学特性进行了分析比较,结果表明PsAIVU的敏感性高于PsAWA,初步证明具一定的特异性,是一种可实际应用的新型抗原。为进一步分析两种抗原,对其蛋白组成及活性成份进行了初步研究。 氨基酸组成的分析 两种抗原浓度均为1 mg/ml,用稀盐酸加热处理后,以氨基酸分析仪(Beckman公司)进行测定。结果表明两种抗原的氨基酸种类基本一致,但绝大     

临沂市华支睾吸虫感染情况调查

为了解临沂市人群华支睾吸虫感染情况,我们于1989年9～11月进行了调查。 1 自然概况临沂市位于鲁东南,有30个乡镇,1132个行政村,146万人。常年积水坑塘占71.73％,群众卫生条件较差,且有煎、烧食用小鱼的习惯。 2 检查对象以乡镇为单位划为30片,每片检查1984年以来村周50米以内有常年积水坑塘     

华支睾吸虫病患者血清中免疫球蛋白和C_3含量的变化

本文分别采用 ELISA 双抗体夹心法和琼脂单向免疫扩散法检测了华支睾吸虫病患者血清中各类免疫球蛋白和 C_3的含量。结果显示:患者血清中 I gG、I gM 和 I gE 的水平明显高于正常对照组,I gA 的水平与正常人相比无明显改变;而 C_3的含量显著低于正常人。提示:人体感染华支睾吸虫病后,I gG、I gM 和 I gE 与相应的特异性抗体呈同步增高的趋势;补体和抗体协同参与华支睾吸虫病的免疫学发病机理,在此过程中消耗补体,使 C_3含量降低。     

江山市华支睾吸虫病调查报告

华支睾吸虫病在本省浦江、杭州市郊,临海县曾有人体感染报告。1994年8月江山市人民医院医治1例病人,在其胆管引流物中发现40余条华支睾吸虫成虫,该患者无外出史。为了解江山市的华支睾吸虫感染情况,我们在该患者居住地须江镇社后村,开展了华支皋吸虫病的调查。材料和方法一,粪检和血检对象社后村的村民,性别不限。1.粪检随机采集大便样品35份,其中少儿10份,青壮年17份,老年人8份。大便样品采用水洗沉淀集卵法,将加水调后粪便滤入杯内,静置30′,倾去上浮液再加水至杯口,静置30′,重复3次后,吸取沉渣,镜检。2.血清学检查随机采集耳垂血132份,其巾少儿25人,青壮年95人,老年12人,利用快速DotELISA法检测华支睾吸虫病人血清。检测该病试剂盒由四川省寄研所提供。     

华枝睾吸虫病澳抗阳性与慢性乙型肝炎关系探讨

华枝睾吸虫病澳抗阳性病人按慢性乙型肝炎治疗病例有增无减。由于两种病的某些临床表现相同,常被误诊误治。为此我们对32例华枝睾吸虫病澳抗阳性及36例慢性乙型肝炎患者进行有关项目的检查、治疗,探讨两者关系。 1 材料及方法所选病例均为我院住院患者,华枝睾吸虫病澳抗阳性(甲组)32例,其中男24例,女8例。年龄20岁—54岁,平均40.5岁。吃生鱼史1—17年,最少一次,最多30余次。从粪便或胆汁     

斯氏狸殖吸虫感染多种动物及体内发育的研究

目的 :以不同数量斯氏狸殖吸虫囊蚴 ,分别感染大白鼠 ,小白鼠和豚鼠 ,定期解剖观察虫体。方法 :经1 5、30、45、60、75、90、1 1 0和 1 2 5d分别解剖观察虫体在实验动物体内发育 ,分布及虫体检出率。结果 :大鼠在感染 90d后虫体可以逐步发育成熟并产卵 ,而小白鼠和豚鼠体内只能查到童虫阶段。结论 :初步证实大白鼠是斯氏狸殖吸虫的适宜宿主 ,小白鼠和豚鼠体内的虫体全部处于滞育阶段 ,不能发育为成虫     

沈阳市华支睾吸虫病的调查与防制

1984年以来,我们对沈阳市华支睾吸虫病进行了流行病学调查。 调查方法和结果 1 人群调查 1984年全市采用醛醚法调查东陵、于洪、苏家屯、新城子4个区和新民县5—60岁朝鲜族居民31968人,感染者2852人,感染率8.92％。调查辽中县汉族居民5150人,未发现感染     

纹沼螺感染华支睾吸虫尾蚴的季节性动态观察

作者等于1978年以来在辽宁铁岭县对纹沼螺感染华支睾吸虫尾蚴的消长情况,作了季节性动态观察。结果表明:纹沼螺感染华支睾吸虫有明显的季节性变化,6月下旬和7月上旬感染率最高,分别为15.8%和19.2%;纹沼螺的感染率还和螺本身的生长、发育情况有密切关系,老螺的感染率远较当年生的成螺的感染率为高;雌螺的感染率明显高于雄螺的感染率。