不可切除胃癌转化治疗的研究进展

胃癌在全国范围内是发病率最高的恶性肿瘤之一，在癌症相关死亡原因中排名第三。目前外科手术仍然是胃癌获得根治性治疗的主要手段，但是其中有30%~40%的进展期胃癌患者在初诊时就失去了根治手术的机会，因此不可切除胃癌转化为可切除胃癌是患者获得"治愈"的最佳选择。随着近些年来新型药物的出现、治疗手段的多样化及多学科诊治模式的发展，"转化治疗"的理念应运而生，从而延长患者生存时间并提高其生活质量。本文就不可切除胃癌的治疗现状与进展、"转化治疗"的应用等进行综述。     

难复性疝30例手术治疗体会

目的探讨难复性疝的手术方式，以减少其复发。方法回顾性分析难复性疝的手术治疗方式及结果。结果30例全部手术治疗，除1例阴囊血肿，1例术后疼痛外，均获的良好的疗效，无1例复发。结论要根据患者的情况采取个体化差异手术方式。     

A型肉毒毒素多表位串联体的设计、表达、纯化及鉴定

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体.方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B.对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因.分别插入原核表达载体pQE-30,再转化E.coli M15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定.结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在E.coli中以包涵体形式获得高效表达.Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性.Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应.     

RNase等10种标准蛋白质在高效疏水作用色谱上的复性

目的: 研究变性蛋白质在高效疏水作用色谱(HPHIC)上的保留行为及复性效率. 方法: 分别用盐酸胍(GuHCl)、尿素(Urea)和十二烷基磺酸钠(SDS)将核糖核酸酶(Rnase)等10种标准蛋白质变性,然后在流动相为硫酸铵的条件下,用HPHIC对变性蛋白质进行复性,并测定其保留时间、Z值、质量及活性回收率. 结果: 在10种变性蛋白质中有5种在HPHIC上得到复性,其保留时间、峰形、Z值与天然蛋白基本一致,其中溶菌酶和核糖核酸酶的质量和活性回收率高,复性效果好. 结论: 用HPHIC对变性的标准蛋白质进行复性,得到较好的复性效果.     

幽门螺杆菌cagA蛋白的制备级复性和纯化

目的通过优化复性液的组成、pH值、稀释度等,建立幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A(cytotoxin associated gene A,cagA)表达产物的制备级复性及纯化方法。方法以包涵体形式存在的cagA表达产物先用5mL/LTritonX-100进行初步纯化,使其纯度达到约90%;再用含8mol/L脲的变性剂溶解包涵体,用复性液[0.1mol/LTris-HCl、2mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)、0.1mmol/L氧化型谷胱甘肽(GSSG)、8mmol/L还原型谷胱甘肽(GSH)及50mmol/L精氨酸(Arg),pH8.0]稀释复性后,用DEAE-HP阴离子交换色谱进行纯化。结果用稀释法复性及液相色谱法纯化,一次可得到100~140mg的cagA。ELISA检测其抗原活性为1∶16000;SDS-PAGE检测纯度为98%。结论用制备级复性、纯化制备的cagA,可作为抗原用于制备检测抗幽门螺杆菌抗体的检测芯片,效果良好,并已获得国家新药批文。     

蛋白质复性的条件及影响因素

蛋白质复性是一个过程 ,存在中间阶段 ,此阶段的各种相互作用力决定了蛋白质能否复性。蛋白质复性要求有一定的条件 ,如pH、温度、离子强度、蛋白质浓度等。另外多种添加剂能促进蛋白质复性 ,其中包括表面活性剂、低浓度变性剂、分子伴侣蛋白和各种氧化还原对 ,但对于不同蛋白质 ,因其结构及理化特性不同 ,采取不同复性方法 ,可以使其达到最佳复性效果     

论“化不可代，时不可违”及其对康复的指导意义

1　久病初愈　“气从不康”“化不可代 ,时不可违”出自《素问·五常政大论》。本篇在以五运六气理论论述气候变化规律及对人体生理病理影响的基础上 ,指出疾病康复与时间之间的关系 ,为病后的康复治疗提出了时间康复的理论问题 ,值得我们加以研究并应用于实践。原文 :“帝曰 ,其久病者 ,有气从不康 ,病去而瘠 ,奈何 ?岐伯曰 :昭乎哉 !圣人之问也 ,化不可代 ,时不可违。”岐伯认为黄帝提出了一个非常有水平的问题。“气从不康”,即大病久病愈后 ,邪气已祛除 ,正气已通顺 ,但初愈者仍虚弱而不康壮 ,其原因是什么 ?应该如何使其完全恢复健康 ?…     

颞下颌关节上腔扩张冲洗术治疗不可复性盘前移位的临床初探

颞下颌关节不可复性盘前移位是最常见的颞下颌关节结构内紊乱之一,在临床上出现关节区疼痛、开口型异常和开口受限等症状,不同程度地干扰患者的日常生活,因而有效的治疗十分重要。本文收集了１９９８年３月至１９９９年９月在湖北医科大学口腔医学院颞下颌关节门诊就诊的４５例不可复性盘前移位的患者行关节上腔扩张冲洗治疗,观察治疗后疼痛的缓解程度、开口度的改善程度及侧方运动度的改善情况,并对其疗效进行评价。１材料与方法１．１一般资料　　本组４５例,男性１１例,女性３４例,年龄１６～６５岁,全组患者均于治疗前摄许氏位…     

外源重组蛋白质的复性研究

包含体的形成是外源重组蛋白质在大肠杆菌中高效表达的必然结果，也是目前产生重组蛋白质最有效的方法之一。本文综述了国内、外在外源重组蛋白复性研究方面的主要进展，包括包含体的形成、外源重组蛋白复性的机制及各种最新方法。     

小细胞肺癌2F7单抗ScFv的高效表达及复性研究

目的 在大肠杆菌中高效表达小细胞肺癌单抗2F7的单链抗体（ScFv)，并获得具有生物学活性的ScFv。方法 利用PCR方法将2F7单抗重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）通过一人工设计的柔性连接肽（Linker)连接，再将单链抗体基因重组到原核表达载体pQE31中，构建单链抗体高效表达载体pQE-2F7-ScFv。将pQE-2F7-ScFv质粒转化大肠杆菌M15后诱导表达，并对表达产物进行纯化和稀释复性。结果 获得了2F7单链抗体的高效表达，表达蛋白大小约27.4kD，以包涵体形式存在。包涵体蛋白在经过变性、纯化和稀释复性后，获得了有功能的单链抗体。结论 成功地构建和表达了小细胞肺癌单抗F27的单链抗体，并对其进行了纯化和复性，将进一步促进2F7单抗小分子抗体的应用。