妊高征患者胎盘床滋养细胞内皮素(ET-1)的表达与临床意义

目的:观察妊高征患者胎盘床浸润的滋养细胞内皮素(ET-1)的表达情况,探讨妊高征的发病机理。方法:收集正常妊娠病例30例,妊高征共70例,其中轻度30例,中度20例,重度20例,用免疫组化方法对妊高征和正常妊娠的胎盘床蜕膜段和肌层浸润的滋养细胞进行ET-1的标记。结果:ET-1在妊高征胎盘床蜕膜段浸润的滋养细胞的表达与正常妊娠无明显差别(P>0.05),ET-1在妊高征胎盘床肌层浸润的滋养细胞的表达明显高于正常妊娠(P<0.05)。讨论:妊高征时胎盘床肌层浸润的滋养细胞分泌的内皮素明显增多,提示妊高征的发生可能与肌层浸润的滋养细胞分泌的内皮素增多有关。     

合体细胞滋养层细胞外囊泡阻止母体恶性肿瘤侵袭及转移至胎儿相关机制研究

目的探讨合体细胞滋养层细胞外囊泡(STB-EV)阻止母体恶性肿瘤侵袭、转移至胎儿的相关机制。 方法选择2015年6月,于四川大学华西第二医院进行剖宫产术分娩的1例妊娠合并宫颈癌(CCP)患者被肿瘤侵犯的胎盘组织为研究对象。宫颈癌细胞系SiHa细胞和人滋养层细胞系HTR-8细胞,均由本院西部妇幼医学研究院-分子与转化医学实验室馈赠。其中,本例CCP患者被肿瘤侵犯的胎盘组织制作组织切片后,于光学显微镜(×400)和电子显微镜(×2 000)下,观察其组织形态学、STB-EV及合体细胞滋养层(STB)旁宫颈癌细胞自噬性死亡情况等;而SiHa细胞与HTR-8细胞培养后,用于Transwell迁移实验与细胞划痕实验。将SiHa与HTR-8细胞共培养,纳入研究组;单独培养的SiHa细胞,纳入对照组。对2组细胞进行Transwell迁移实验及细胞划痕实验,2组Transwell小室穿膜细胞数、细胞迁移率等比较,采用成组t检验。本研究遵循的程序符合2013年新修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。 结果①对本例CCP患者被肿瘤侵犯的胎盘组织制作组织切片后,于光学显微镜(×400)下观察结果显示,与STB相邻宫颈癌细胞自噬性死亡、凋亡和固缩性坏死显著。电子显微镜(×2 000)下观察结果显示,宫颈癌细胞累及胎盘绒毛组织时,STB分泌的STB-EV水平显著高于正常胎盘组织。②2组细胞Transwell迁移实验结果显示,研究组穿膜细胞数为(597.6±87.7)个/视野,显著低于对照组的(1 358.4±203.0)个/视野,并且差异有统计学意义(t＝14.490、P<0.001)。③2组细胞划痕实验结果显示,划痕后48 h时,研究组细胞迁移率为(26.6±3.8)%,显著低于对照组的(45.9±3.7)%,并且差异有统计学意义(t＝3.122、P＝0.035)。 结论STB分泌的STB-EV可能参与母体肿瘤细胞广泛自噬性死亡,从而阻止母体肿瘤细胞侵袭胎盘、影响胎儿发育。     

Telomere homeostasis in IUGR placentas – A review

Telomeres are nucleoprotein structures located at the termini of chromosomes. They are essential for chromosome stability. Telomeres become shorter due to mitotic cycles and environmental factors. When telomeres are shortened and therefore dysfunctional, cellular senescence occurs and organ dysfunction might develop. During pregnancy, fetal growth restriction secondary to placental insufficiency has been linked to impaired telomere homeostasis in which telomeres are shorter, telomerase is decreased, and compensatory mechanisms of telomere capture are enhanced. These characteristics, along with increased signs of senescence, indicate telomere dysfunction in trophoblasts from placentas affected by intrauterine growth restriction (IUGR).This review summarizes the information currently available regarding telomere homeostasis in trophoblasts from human pregnancies affected by IUGR. Improved understanding of placental physiology might help in the development of treatment options for fetuses with IUGR.     

同型半胱氨酸对滋养细胞基质金属蛋白酶2、9表达的影响

目的探讨同型半胱氨酸（Hcy）对早孕期滋养细胞基质金属蛋白酶（MMP）2、9表达的影响及其在子病前期发病过程中的作用。方法分离培养早孕期滋养细胞,用Hcy刺激早孕期滋养细胞48h,对照组Hcy刺激浓度为0mmol／L,实验组的刺激浓度为1mmol／L;以实时荧光定量RT-PCR检测早孕期滋养细胞MMP-2、MMP-9mRNA的表达变化;明胶酶谱分析法测定早孕期滋养细胞MMP-2、MMP-9酶活性变化,以积分吸光度值表示。结果实验组与对照组比较,早孕期滋养细胞MMP-2mRNA表达降低21％,MMP-9mRNA表达降低11％;实验组与对照组比较,MMP-2蛋白表达降低14％,MMP-9蛋白表达降低52％。结论Hey能够抑制早孕期滋养细胞MMP02、MMP-9的表达,从而影响滋养细胞侵袭性。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ及其配体对早孕期绒毛组织及细胞滋养细胞浸润能力的影响

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）及其配体对早孕期绒毛组织及细胞滋养细胞浸润能力的影响。方法采用免疫组化方法、免疫荧光细胞化学染色法、蛋白印迹法和RT-PCR技术检测20例孕6～8周（早孕早期组）及20例孕11～12周（早孕晚期组）绒毛组织及细胞滋养细胞中的PPARγ蛋白及其mRNA的表达;并检测不同浓度PPARγ激动配体——15-脱氧-前列腺素J2（15-d-PGJ2）和曲格列酮,以及不同浓度拮抗配体——双酚丙烷二环氧甘油醚（BADGE）对原代无血清培养的细胞滋养细胞浸润能力的影响。结果（1）PPARγ／蛋白在早孕早期组和早孕晚期组绒毛组织中均有表达,主要定位在细胞滋养细胞核中,合体滋养细胞及绒毛间质细胞中无表达。（2）早孕早期组绒毛组织和培养的细胞滋养细胞中,PPARγ／蛋白表达水平分别为1．35±0．08、1．13±0．11,PPARγ／mRNA表达水平分别为36．0±5．1、13．4±3．1;早孕晚期组绒毛组织和培养的细胞滋养细胞中,PPARγ／蛋白表达水平分别为1．17±0．03、0．86±0．05,PPARγ mRNA表达水平分别为23．3±5．5、6．1±1．3,早孕晚期组PPARγ蛋白及其mRNA表达水平明显低于早孕早期组,两组分别比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。（3）PPARγ／激动配体15-d-PGJ2和曲格列酮均有抑制细胞滋养细胞的浸润的作用。15-d-PGJ2浓度为1、10μmol／L,曲格列酮浓度为10μmol／L时,早孕早期组细胞滋养细胞浸润指数分别为0．57±0．03、0．43±0．02、0．50±0．06,早孕晚期组分别为0．69±0．02、0．59±0．03、0．66±0．05,两组分别比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。（4）PPARγ拮抗配体BADGE浓度为20、50μmol／L时,早孕早期组细胞滋养细胞浸润指数分别为1．23±0．07和1．58±0．04;早孕晚期组分别为1．05±0．03和1．38±0．08,两组分别比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论PPARγ／在调节滋养细胞浸润过程中起重要作用;在早孕期胎盘绒毛组织,PPARγ／激动配体可抑制滋养细胞浸润;PPARγ／拮抗配体可促进滋养细胞浸润,且能部分逆转激动配体的作用。     

Aspirin Enhances the Protective Effect of Progesterone on Trophoblast Cell from Oxidative Stress and Apoptosis

Objective::Clinically, low-dose aspirin and progesterone are frequently used to prevent pregnancy loss. We investigated the effect of these drugs on the biologi...     

TLR3配体polyI：C经TRIF／NF—KB途径抑制Bewo细胞中HBV复制

摘要：目的探讨T0Ⅱ样受体3（TLR3）配体聚肌苷酸胞苷酸（polyI：C）抑制人滋养层细胞Bewo中乙型肝炎病毒（HBV）复制的作用机制。方法首先将2斗g1．3倍HBV全基因重组质粒pcDNA3．1（＋）-HBVl．3转染Bewo细胞,12h后,以TLR3配体polyI：C处理3d。然后以polyi：C处理Bewo细胞,观察IFN-B、TNF_d表达的动力学。最后,观察核因子-KB（NF-KB）拈抗剂PDTC对polyI：C诱导Bewo细胞产生细胞因子的作用。采用微粒子酶免疫分析法（MEIA）和荧光定量PCR法分别检测HBsAg、HBeAg和HBVDNA水平,并以ELISA和RT-PCR分别检测IFN-B、TNF-Ⅸ水平及TIR结构域的转接蛋白（TRIF）、髓样分化蛋白88（MyD88）表达。结果与对照组比较,polyIC可显著抑制Bewo细胞中HBV复制,差异有统计学意义（P〈O．01）,且polyI：C可显著诱导Bewo细胞产生IFN-p和TNF_d（P〈O．05）,呈时间和剂量依赖性。PDTC可抑制polyhC诱导细胞产生TNF_Ot,显著低于对照组（P〈0．01）,但对IFN-B无显著作用（乃0D5）。与对照组比较,polyI：c可诱导HBV重组质粒转染的Bewo细胞表达TRIFmRNA（P〈O．01）。结论TLR3配体poyZ：C可能通过rrRIF依赖性途径诱导Bewo细胞产生IFN-B和TNF-d,且TNF-a产生还涉及NF-KB途径,并最终抑制Bewo细胞中HBV复制。     

Antiproliferative and proapoptotic effects of bisphenol A on human trophoblastic JEG-3 cells

Different studies performed in rodents revealed that bisphenol-A (BPA), an environmental compound, altered early embryonic development. However, little is known concerning the direct effects of BPA on human implantation process. Thus, we decided to study in vitro BPA's effects on proliferative capacities of the human trophoblastic cell line, JEG-3. For this purpose, we first have shown that JEG-3 cells express the specific BPA receptor, namely estrogen-related receptor γ1 (ERRγ1). Secondly, we demonstrated that BPA did not exert any cytotoxic action in JEG-3 cells up to 10⁻⁶ M. Moreover [³H]-thymidine incorporation experiments revealed that BPA significantly reduced cell proliferation. The results also showed that BPA induced JEG-3 apoptosis capacity as reflected by DNA fragmentation experiments.In conclusion, we describe here the direct impact of BPA on trophoblastic cell number mediated through both anti-proliferative and pro-apoptotic effects.     

超声断层显像技术及经阴经腹超声检查结合血HCG对异位妊娠诊断的价值探讨

目的 探讨经阴经腹彩色多普勒超声(彩超)及超声断层显像技术(TUI)结合血人绒毛促性腺激素(HCG)检测诊断异位妊娠(EP)的特征性依据,提高EP诊断的准确性.方法 对188例疑似早期EP者测定血HCG,进行二维经阴经腹彩超及TUI检查,测定子宫内膜厚度及血流分布,测量子宫动脉及滋养动脉血流频谱,并进行比较.结果 188例经阴经腹彩超诊断EP患者中,经手术病例证实EP 183例,超声诊断符合率为97.3%.其超声声像图特征为:(1)附件区妊娠囊内可见胎儿或者卵黄囊,伴或不伴胎心搏动,183例患者中有17例(9.0%)有胎心搏动;(2)Donut征(输卵管环),本组患者中98例(52.1%)有Donut征;(3)附件区内可探及混合性包块,有时伴有少量积液,本组60例(31.9%)患者可探及混合性包块;(4)8例(4.3%)患者仅表现为盆腔积液.血HCG平均为(3 320±2 342)mU/ml.结论 TUI及经阴经腹超声检查能准确迅速地取得EP的证据,结合血HCG检测是早期诊断EP的较好手段;TUI能提供多断面显示,可减少小病灶的漏诊.