胆固醇结石病人肝脏SRBI及其转录调节因子LRH-1基因表达的研究

目的:研究胆固醇结石病人BI型清除剂受体(scavengerreceptorBtypeI,SRBI)及其转录调节因子肝脏受体类似物1(liverreceptorhomologue1,LRH-1)的表达,以探讨胆固醇结石发病的机制。方法:对20例胆囊胆固醇结石病人和10例无胆石症对照者测定血清脂质、胆汁成分和计算胆汁胆固醇饱和指数。以实时定量PCR法测定肝脏SRBI和LRH-1mRNA的表达量。结果:胆石组胆石平均胆固醇含量(86.68±5.26)%,均为胆固醇结石。胆石组病人血清高密度脂蛋白(HDL)显著低于对照组[(0.86±0.62)mmol/L比(1.42±0.56)mmol/L,P<0.01]。胆石组胆汁胆固醇在总脂中的摩尔百分比和胆固醇饱和指数显著高于对照组[(7.80±2.06)mol%比(5.26±2.80)mol%,P<0.05]。胆石组SRBI基因mRNA表达量与对照组比较显著增高(2.48±0.44比1.00±0.23,P<0.05),胆石组LRH-1表达也高于对照组(2.05±0.29比1.00±0.28,P<0.05)。结论:胆固醇结石病的主要病理生理异常为胆汁胆固醇过饱和。肝脏LRH-1、SRBI表达增高,参与了胆固醇过饱和胆汁形成,并促进了胆固醇结石形成。     

转录因子KLF9与肿瘤的研究进展

Kruppel样因子9（KLF9）是参与基因转录调控的锌指蛋白之一,广泛参与了细胞的增殖、分化以及组织器官的分化发育等过程。KLF9在多种肿瘤组织及肿瘤细胞中低表达,对肿瘤细胞的增殖及凋亡发挥重要作用。KLF9可以通过多种信号途径以及与细胞内不同蛋白的相互作用,影响肿瘤细胞的增殖及凋亡,影响肿瘤的形成和发展,在内分泌相关肿瘤方面KLF9的作用尤为明显。     

门静脉高压症患者脾静脉平滑肌细胞gax mRNA的表达

目的观察门静脉高压症患者脾静脉平滑肌细胞gax mRNA的表达。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法分别检测28例门脉高压症患者脾静脉和12例正常对照血管gax mRNA和PCNA蛋白的表达。结果gax mRNA在实验组和对照组中相对表达量分别为1.13±0.21和10.17±0.81(P<0.01);PCNA蛋白在实验组中的表达为(29.8±4.7)%,而正常对照组无明显表达(P<0.01)。结论门静脉高压症患者脾静脉平滑肌细胞中gax mRNA表达下降PCNA蛋白过表达,调节了脾静脉平滑肌细胞增殖、迁移和表型改变,使血管结构重建,对门静脉高压症的形成和维持可能起重要作用。     

重度子痫前期患者和正常孕妇外周血中差异表达基因的研究

目的 筛选和比较重度子痫前期患者和正常孕妇外周血中差异表达的基因,并分析其表达情况及分子功能.方法 应用基因微阵列技术,采用人类全基因组寡核苷酸芯片检测6例重度子痫前期患者(重度子痫前期组)和5例正常孕妇(对照组)外周血中的差异表达基因,分别计算重度子痫前期组6例患者的芯片信号值与对照组混合血芯片的信号值比值;以芯片的信号值比值≥2.0或≤0.5,且其q_value＜5.4%的标准来确定差异表达基因,层次聚类分析后用Gene Ontology软件确定这些基因所属的功能群.结果 筛选得到140个差异表达基因,其中86个基因表达上调,54个基因表达下调.重度子痫前期组上调基因主要参与半胱氨酸代谢、鸟氨酸循环、蛋白酶体、转化生长因子(TGF)B信号传导途径,其中钙联蛋白2(CNN2)、基质金属肽酶8(MMP8)、含V.set和免疫球蛋白域4(VSIG4)、蛋白酶体26S亚单位ATPase 5(PSMC5)的信号值比值均明显升高;下调基因主要参与自然杀伤细胞介导的细胞毒性作用、抗原呈递作用、细胞色素芳香化酶(P450)代谢途径,其中杀伤细胞免疫球蛋白样受体三域长细胞质尾2(KIR3DL2)、醇醛酮还原酶家族1成员C3(AKRlC3)、含Churchill域1(CHURC1)、溶质载体家族25成员13(SLC25A13)的信号值比值均明显下降.结论 重度子痫前期患者外周血的基因表达与正常孕妇存在着很大的差异;CNN2、MMP8、VSIG4、PSMC5、KIR3DL2、AKR1C3、CHURC1、SLC25A13等基因可能参与重度子痫前期的发病机制,需进一步验证.     

筛选转化生长因子β1刺激肝星状细胞差异表达基因的研究

目的 筛选转化生长因子β 1(TGF β 1)刺激大鼠肝星状细胞(Hsc)的差异表达基因,以揭示TGF β1介导肝纤维化的分子发病机制. 方法分别用Trizol法抽提TGF β1刺激的HSC及磷酸盐缓冲液刺激为对照的HSC总RNA,逆转录合成双链cDNA,制备掺入生物素标记的cDNA探针,与人基因表达谱芯片杂交,用Agilent扫描仪对芯片结果进行扫描,利用软件对差异表达基因进行生物信息学分析. 结果 从13824条目的 基因中筛选出177条差异表达基因,其中123条基因表达上调,其中包括:结缔组织生长因子,微管蛋白ε 1,V型胶原α2,连环蛋白6 2,钙粘蛋白6,2型,Smad3,丝裂源活化蛋白激酶4,生长因子受体结合蛋白7,丝裂原活化蛋白激酶相互作用/丝氨酸/苏氨酸激酶1等;54条基因表达下调,包括:肿瘤坏死因子受体相关因子4,干扰素调节因子7,干扰素诱生蛋白p78,骨形态发生蛋白7,基质gLa蛋白,人类丝氨酸蛋白酶抑制剂进化支B成员8,干扰素刺激基因2.0×104,死亡相关蛋白6,金属硫蛋白1H,超氧化物歧化酶2等;同时筛选到8个未知功能蛋白. 结论 应用基因表达谱芯片技术成功筛选了TGF β 1刺激HSC的差异表达基因,初步揭示了TGF β1致肝纤维化的分子机制是诸多因素共同作用的结果,为进一步寻找新的基因治疗靶点奠定了基础.     

Expression analysis of reactive oxygen species detoxifying enzyme genes in Anopheles stephensi during Plasmodium berghei midgut invasion

Objective:To investigate the involvement of reactive oxygen species detoxification system in Anopheles stephensi during Plasmodium berghei midgut invasion.Methods:Eight key reactive oxygen species metabolizing enzymes were cloned and characterized,and their expression was monitored in parasite-infected mosquitoes.Results:Superoxide anion detoxifying superoxide dismutases(Fe/Mn SOD,Cu/Zn SOD 2,Cu/Zn SOD 3A,and Cu/Zn SOD 3B)depicted varied expression patterns.Fe/Mn SOD expression declined,whereas Cu/Zn SOD expression was elevated in the infected mosquitoes.Peroxidases,catalase and glutathione peroxidase showed lack of induction in expression during the Plasmodium berghei infection.Further,expression of thioredoxin reductase increased in the infected mosquitoes,whereas gluthathione S-transferase levels decreased markedly.Conclusions:Detoxification enzymes may play a role in modulating host immunity and parasite transmission.     

人CD34抗原基因在痘苗病毒系统中的表达

从ｐＵＣ１８－３４重组质粒双酶切分离得到编码人ＣＤ＿（３４）抗原的全长ｃＤＮＡ片段，将此基因插入痘苗病毒载体ＳｍａＩ位点，构建了重组质粒ＮＳＡ１１７５－３４。采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ方法，将质粒ｐＪＳＡ１１７５－３４导入已被野生痘苗病毒感染的ＴＫ￣－１４３细胞，用ＢｕｄＲ和ＬａｃＺ双筛选，获得带有人ＣＤ＿（３４）抗原基因的重组痘苗病毒。经活细胞免疫荧光（ＩＦＡ）和碱性磷酸酶－抗碱性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）检测表明，重组痘苗病毒能够特异地表达人ＣＤ＿（３４）抗原。人ＣＤ＿（３４）抗原基因的表达，为探讨ＣＤ＿（３４）抗原结构和功能以及研制ＣＤ＿（３４）单克隆抗体奠定了基础。     

错配修基因hMSH2蛋白在人卵巢恶性肿瘤组织中的表达及其临 …

目的 检测ｈＭＳＨ２基因在人卵巢恶性肿瘤组织中的表达及其与卵巢恶性肿瘤临床病理特征的关系。方法 应用免疫组织化学链酶菌抗生物素蛋白－过氧化物酶连接检测４２例卵巢恶性肿瘤组织中错配修复基因ｈＭＳＨ２蛋白的表达。结果 ２６例卵巢恶性肿瘤组织有ｈＭＳＨ２蛋白表达（６２％）,多发生于浆液性腺癌和粘液性腺癌（８０％的８０％）,而在子宫内膜样癌和恶性生殖细胞肿瘤中表达较少（１／６和１／６,Ｐ〈０．０５）,其中     

卡托普利对血管成形术后血管壁血小板衍生生长因子基因表达的影响

球囊拉伤血管加高脂饲养建立兔髂动脉粥样硬化模型进行球血管成形术，随机分为治疗组和对照组。治疗组于术前７天至术后２８天接受卡托普利治疗。     

胃癌及癌前病变EGF-R、PCNA、bcl-2和P53的表达意义

目的探讨EGF-R、PCNA、bcl-2和P53蛋白表达在胃粘膜组织恶性转化进程中的意义。方法采用免疫组化SP法,对60例胃癌,34例异型增生,36例肠上皮化生和26例正常胃粘膜进行EGF-R、PCNA、bcl-2和P53蛋白检测。结果 EGF-R和PCNA表达,胃癌和异型增生组显著高于肠上皮化生以及正常胃粘膜组(P<0.01);bcl-2表达:胃癌组显著低于肠上皮化生组(P<0.05)和正常胃粘膜组(P<0.01);P53表达;胃癌组显著高于异型增生组(P<0.05)、肠上皮化生和正常胃粘膜组(P<0.01)。结论 EGF-R、PCNA、bcl-2和P53表达,在胃粘膜组织恶性转化的过程中起重要作用。联合检测这些指标有助于判断癌前病变和早期胃癌。