蛙皮素对PC-3细胞骨架及细胞内游离Ca~(2+)的影响

目的:观察蛙皮素(BBS)对前列腺癌PC-3细胞骨架形态及细胞内游离Ca2+([Ca2+]i)浓度的影响。方法:①利用免疫荧光法(IH),结合激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测10-5mol/L浓度BBS处理的PC-3细胞角蛋白(CK)的表达,以反映其对细胞骨架形态的影响;②应用Fluo-3/AM荧光标记技术和LSCM检测不同浓度BBS(10-9、10-7、10-5mol/L)处理的PC-3细胞[Ca2+]i浓度。结果:①10-5mol/L浓度的BBS可促进PC-3细胞CK表达及伪足形成;②BBS可提高PC-3细胞[Ca2+]i浓度,并具有浓度依赖性。结论:实验证明一定浓度的BBS可明显提高PC-3细胞[Ca2+]i浓度及CK表达,进而影响PC-3细胞骨架形态。本研究为探索BBS应用于肿瘤研究以及BBS作用后细胞内信息传递途径提供了基础。     

高压液相色谱法测定大鼠脑组织中蛙皮素

本文经改进，建立了一种测定大鼠脑组织蛙皮素含量的高效液相色谱方法，流动相为０．１％三氟醋酸：乙腈＝７０：３０，色谱柱采用Ｎｏｖａｐａｋ Ｃ１８柱，结果表明，本方法具有经济、简便、准确、灵敏度高的特点。对３１只大鼠脑组织进行检测，得出正常大鼠脑组织蛙皮素含量的９５％置信限为９．２３￣１５．３９ｐｍｏｌ／ｇ（湿重）。     

大柴胡汤和前列腺素E1对蛙皮素和内毒素引起的大鼠急？…

本文采用蛙皮素和内毒素（ＬＰＳ）制作大鼠重型急性胰腺炎（ＳＰ）模型，并观察中药大柴胡汤冲剂（ＤＳ）和前列腺素Ｅ１（ＰＧＥ１）对本实验性胰腺炎的作用。观察指标包括血清ＧＰＴ、ＧＯＴ、淀粉酶、ＴＮＦ－α；肝脏和胰腺血流及病理学检查；２４小时生存率。结果，急性胰腺炎对照组生存率为５５．６％，ＤＳ组为７６．５％（Ｐ〈０．０５ｖｓ对照组），ＰＧＥ１组为７５％。用ＤＳ和ＰＧＥ１能明显降低血清ＧＰＴ、ＧＯＴ、Ｎ     

肺癌细胞和蛙皮素抑制树突状细胞的产生和功能

目的：了解肺癌细胞株及蛙皮素对树突状细胞（DC）产生及功能的影响。方法：树突状细胞由健康人外周血单个核细胞CD14^ ，在完全细胞培养液中加入1000U／ml GM-CSF和1000U／ml IL-4,培养7天获得，肺癌细胞株CRL－5815，CRL－5826，Bombesin和Bombesin受体拮抗剂加入培养液中，Annxin V检测DC凋亡；流式细胞仪检测CD40，CD86，CD83，CD80，HLA－DR阳性表达。结果：培养7－10天后的DC前体细胞表达高水平的HLA－DR CD80 CD86 CD83 CD40。肺癌及蛙皮素可导致DC前体细胞凋亡，而蛙皮素受体拮抗剂可部分保护蛙皮素致DC凋亡的作用。加入肺癌细胞株或蛙皮素与DC共培养时明显抑制上述细胞表型的表达和DC刺激同种异体T细胞的增殖能力，当加入蛙皮素受体拮抗剂时，DC细胞表达HLA－DR CD80 CD86 CD83 CD40明显增加，接近DC正常对照组。结论：肺癌细胞株及蛙皮素可导致DC的凋亡，抑制树突状细胞的产生和功能。     

蛙皮素对人胃黏膜上皮永生细胞系GES-1细胞生长作用和机制的研究

目的　观察蛙皮素对人永生细胞系 (GES 1)生长的调节和作用机制。方法　①分子水平观察GES 1细胞胃泌素释放肽 (GRP)受体mRNA的表达。②利用受体化学交联和细胞膜组织化学法观察GRP受体蛋白表达。③观察不同浓度的蛙皮素及其受体拮抗剂对GES 1细胞生长的影响。④观察蛋白激酶C (PKC)抑制剂对蛙皮素促进GES 1细胞作用的影响。⑤观察蛙皮素作用GES 1细胞后 ,细胞内三磷酸肌醇 (IP3 )和PKC活性以及观察蛙皮素对此细胞系作用后GRP受体mRNA表达量的变化。结果　①GES 1细胞表达GRP受体mRNA ,Southern杂交进一步证明表达特异性mRNA。②GRP受体蛋白相对分子质量为 75× 10 3 ,该受体位于细胞膜。③蛙皮素可促进此细胞生长 ,而蛙皮素特异性受体拮抗剂可抑制此促生长作用。④蛙皮素对该细胞的促生长作用可被PKC抑制剂所抑制。⑤蛙皮素可引起细胞内IP3 含量显著增加以及引起细胞内PKC活性自细胞质向细胞膜转移。⑥蛙皮素作用GES 1细胞后可引起GRP受体mRNA表达增加。结论　此研究证明人胃黏膜上皮细胞系GES 1表达GRP受体mRNA和蛋白。蛙皮素对GES 1细胞的促生长作用是通过特异性受体介导 ,引起细胞内IP3增加和PKC活性转移来实现的。蛙皮素作用后引起该细胞GRP受体mRNA表达量增加 ,说明蛙皮素对其自身受体有上调作用     

蛙皮素及其同类物与肿瘤的关系

1971年Anastasi等从一种欧洲雨蛙的皮肤中分离出蛙皮素(BN),此后,又有学者在人及哺乳动物体内发现了蛙皮素的同类物:胃泌素释放肽(GRP)和神经调节肽B(NMB),并发现蛙皮素及其同类物可通过相应受体刺激多种肿瘤的生长。从此,人们对其进行了广泛的研究。现就近年来关于BN及其同类物与肿瘤生长关系的研究作一综述。     

蚌皮素对结肠癌细胞株调控及其受体后信息传导

研究蛙皮素对人结肠癌细胞株的生长调控及受体后的信息传导途径。方法观察蛙皮素对人结肠癌细胞株ｃｌｏｎｅ Ａ细胞生长调控;应用液体闪烁测量法【闪烁记数仪分别测定细胞内三磷酸肌醇及环磷酸腺苷含量;用荧光测定细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度;参考Ｔａｋａｉ法测定蛋白激酶Ｃ活性。     

两种不同因素对胰腺腺泡细胞损害机制的研究

目的探讨蛙皮素和牛磺胆酸钠这两种不同因素对胰腺腺泡细胞的损害机制.方法采用一步消化法分离Wistar大鼠胰腺腺泡细胞,然后与不同浓度蛙皮素、牛磺胆酸钠共同孵育,采用台盼蓝法和双标法测定细胞活率、全自动生化仪测定淀粉酶浓度、比色法测定乳酸脱氢酶浓度、激光显微共聚焦法测定钙离子波动和浓度.结果蛙皮素处理后,腺泡细胞仍保持较高的活率,淀粉酶分泌率明显上升,同时乳酸脱氢酶漏出率增加,与淀粉酶分泌率之比约为4：1;而胆酸钠处理后细胞活率明显下降,淀粉酶分泌率明显升高的同时伴有乳酸脱氢酶漏出率也等比例的增加.蛙皮素可引起胰腺腺泡细胞内游离钙离子脉冲式升高,其波动方向由分泌极向基底极;牛磺胆酸钠引起细胞内钙离子持续低幅增高,细胞两极间未出现钙离子波动.结论蛙皮素及牛磺胆酸钠通过不同机制影响胰腺腺泡细胞的存活率,导致胰腺细胞损害.     

胃酸调节肽C端8肽对胰腺炎大鼠胰腺外分泌的影响

目的探讨胃酸调节肽C端8肽(KA-8肽)对蛙皮素诱导的急性水肿性胰腺炎胰腺外分泌影响。方法采用Wistar大鼠蛙皮素皮下注射诱导急性水肿性胰腺炎,收集胰液计量,并检测蛋白和碳酸氢盐的含量;胰腺干湿比、Evans blue漏出率、胰腺组织蛋白/DNA评价胰腺水肿情况。结果KA-8肽和生长抑素对蛙皮素所致的胰腺外分泌功能的升高有明显的抑制作用(59.7±19.5比89.8±18.9;37.5±7.8比89.8±18.9,单位:μl/30min),但并不能影响胰液中蛋白的含量(0.50±0.16比0.47±0.19;0.53±0.19比0.47±0.19,单位:mg/30min);两种多肽可明显降低胰腺组织水肿(干湿比:0.20±0.08比0.15±0.08;0.19±0.09比0.15±0.08)。结论KA-8肽对蛙皮素诱导的急性水肿性胰腺炎有一定的保护作用。