海藻糖及其在医学实验中的应用

本文介绍了海藻糖的化性质，生物学功能、医学实验实用及可能的应用前景。     

不同低温保护剂对皮肤组织β1整合素表达影响的比较

目的比较两种不同低温保护剂对皮肤组织β1 integrin低温保存后表达的影响，为寻求皮肤组织低温保护剂的最佳配方提供试验依据。方法获取新鲜成人皮肤组织分为3组．新鲜对照组、海藻糖／二甲基亚砜（T／D）组、二甲基亚砜／丙二醇（D／P）作为低温保护剂保存组，-196℃液氮冻存7d、14d复温，免疫组织化学染色对各组间皮肤进行比较。并在此基础上，进一步采用RT-PCR方法对不同低温保护剂保存后皮肤的β1 integrin基因水平进行了深入的研究。结果通过光镜图象观察和基因水平分析结果说明，0．5M海藻糖／二甲基亚砜能够很好保护皮肤组织，β1 integrin的基因表达量与新鲜皮肤组相似。结论海藻糖与二甲基亚砜联合应用对皮肤组织β1 integrin的保护作用优于传统组。     

垫伏卷柏化学成分研究

垫状卷柏Selaginella pulvinata Hoor et Grev.为卷柏科卷柏属植物,广布于四川,云南,西藏,广西,广东,江西,湖北,河北和河北等地,民间生用治经闭,跌打损伤,腹痛和哮喘,炒炭用治吐血,便血 ,尿血和脱肛等^[1],其化学成分未见报道。     

海藻糖对低温储存皮肤β-actin的mRNA转录水平及其蛋白表达的影响

目的:观察新型低温保护剂(cryoprotectant,CPA)海藻糖(trehalose)对皮肤骨架蛋白β-肌动蛋白(β-actin)表达及mRNA转录水平的调节作用,以了解在传统低温保护剂中添加海藻糖后是否优于单纯传统低温保护剂的作用。方法:实验将新鲜成人皮肤分为4组,分别经海藻糖-二甲基亚砜(T-D)、二甲基亚砜-丙二醇(D-P)、二甲基亚砜-去血清角质细胞培养液(D-K)、DMEM作为低温保护剂保存,-196℃液氮冻存7 d、14 d复温,设新鲜皮肤为对照组。采用免疫组织化学染色及W estern b lot方法观察β-actin蛋白表达、采用RT-PCR方法对不同低温保护剂保存后皮肤的β-actin基因水平进行深入的研究。结果:T-D组β-actin蛋白表达及基因转录与新鲜组相似(P>0.05),D-P作用其次,其余两组与新鲜组对比均降低明显(P<0.05)。结论:传统低温保护剂中添加海藻糖后对低温储存皮肤β-actin表达的保护作用优于单纯传统低温保护剂。     

海藻糖在气管低温保存中的保护机制

目的探讨海藻糖在气管低温保存中的保护作用和机制。方法新鲜配制4组保存液，其中：Ⅰ组LPD；Ⅱ组LPD 10％DMSO；Ⅲ组LPD 0．15M海藻糖；Ⅳ组LPD 10％DMSO 0．15M海藻糖。切取SD大鼠气管后立即分别放入含上述4种溶液的冻存管，在程序降温仪降至-80℃后投入液氮中保存。20d后对气管标本进行HE染色和Bcl-2、Pax蛋白检测(免疫组化)，并将其异位移植到Wistar大鼠腹腔，15d后取出移植气管，观察组织学变化。结果4种保存液低温保存气管20d后，Ⅲ组和Ⅳ组气管结构完整，软骨细胞Pax蛋白表达较低，尤其Ⅳ组保存效果最好，同种异体异位移植后生长良好。各组Bcl-2蛋白表达无明显区别。结论在气管低温保存中海藻糖的保护作用主要是通过对软骨细胞的保护实现的，抑制软骨细胞Pax基因的表达是其中的保护机制之一。海藻糖和DMSO合用保护作用更好。     

用含桂圆花中化合物的皮肤外用剂减轻局部疼痛

本品含桂圆花Spilanthes acmella和千日菊．S．oleracea中的化合物，制成伤湿膏等，用于缓解局部疼痛。将含有上述化合物的膏药贴于患处，通过电离子透入疗法，使接触的皮肤麻木并减轻局部疼痛。其化合物N-异丁基-10-反-2-顺-6-反-8-三烯酰胺的稳定性是通过加入碳水化合物如α，α-海藻糖、麦芽糖等实现的。50μL含0．56mg该化合物的无水乙醇液于夜间(试验日之前)均匀地涂在4～10周龄的豚鼠皮肤上，     

海藻糖在生育力保存中的应用

肿瘤诊疗技术的进步显著提高了患者的生存率,但放化疗可能造成人类生育力的下降乃至丧失。如何有效保存生育力已成为近年来研究的热点。海藻糖属于非渗透性冷冻保护剂,是一种具有特殊生物学性能的双糖,能够在干燥、脱水、冷冻等恶劣条件下有效保护蛋白质等大分子不变性失活。随着研究的逐步深入,海藻糖已被广泛应用于生育力保存等医学领域中,有学者将其用于保存精子、精原干细胞、卵母细胞、胚胎、卵巢组织和睾丸组织并取得了显著成果。综述海藻糖的生物学性质、作用机制假说以及在生育力保存中的应用研究现状和最新进展。     

海藻糖在器官组织保存中的应用

海藻糖(trehalose)是一种生物大分子非特异性的天然保护剂，在病毒、疫苗保存以及食品、药品添加剂等方面已有广泛的应用。由于它是一种安全无毒、无副反应，并且对人体无潜在危害的物质，因此它的应用范围也不断扩大，尤其近年来在器官组织保存中的成功应用，取得令人振奋的效果。本将就国内外海藻糖在器官组织保存中的应用情况作一综述。     

海藻糖对低温储存皮肤组织桥粒芯糖蛋白2表达及皮肤活力影响的实验研究

目的：比较海藻糖与传统低温保护剂丙二醇对皮肤低温保存后桥粒芯糖蛋白2（Dsg2）表达以及皮肤活力的影响,为寻求皮肤组织低温保护剂的优良配方提供实验依据。方法：经患者同意在烧伤后整形术中获取患者新鲜皮肤组织,分为对照组（新鲜皮肤,不作任何保护剂处理）、海藻糖/二甲基亚砜（T/D ）组（皮肤以0.5 mol/L T/D液浸泡）、二甲基亚砜/丙二醇（D/P）组（皮肤以 D/P 液浸泡）,液氮冻存21 d,复温,Dsg2单克隆抗体免疫组化染色并用 Image Pro5.0图像分析处理系统测定皮肤组织 Dsg2表达的光密度值;用皮肤内琥珀酸脱氢酶（SDH）比色法检测皮肤组织 SDH 活性,以此表示皮肤活力。结果：低温保存21 d时,D/P组Dsg2表达（0.247±0.006）显著低于T/D组（0.250±0.009,P＜0.05）与对照组（0.254±0.007,P＜0.05）;对照组 SDH 水平为18.1±0.6,T/D组为17.4±0.9,D/P组为15.7±0.9,D/P 组 SDH 明显低于 T/D组（P＜0.01）。结论：海藻糖对皮肤组织及细胞间桥粒连接的保护作用优于传统低温保护剂。     

红细胞冻干保存前对海藻糖的负载

目的探寻红细胞负载海藻糖的有效方法,评价负载海藻糖对红细胞各项理化指标的影响。方法设实验组(负载海藻糖红细胞)和对照组(未负载海藻糖红细胞),使用硫酸-蒽酮法测定胞内海藻糖含量,检测负载后红细胞各项理化指标,通过流式细胞术检测负载后红细胞膜的完整性。结果在37℃条件下,红细胞对海藻糖的摄取随胞外海藻糖浓度的增加而增多,当海藻糖浓度为800mmol/L,水浴7h,红细胞负载海藻糖可达到有效浓度;且2组红细胞各项理化指标比较差异无统计学意义(P>0.05);流式结果显示红细胞在高渗环境中负载海藻糖后,细胞膜结合很少量Annexin-V-FITC,并且破损细胞能被有效清除。结论红细胞37℃孵育7h,胞外海藻糖浓度为800mmol/L,能有效摄取海藻糖,且保持红细胞的理化稳定性和膜结构完整性。