斯氏狸殖吸虫成虫尿素溶解性抗原蛋白组成及活性成份

采用8M尿素和简化方法分离、提取斯氏狸殖吸虫成虫尿素溶解性抗 原(PsAWU),并对该抗原和水溶性抗原(PsAWA)的血清学特性进行了分析比较,结果表明PsAIVU的敏感性高于PsAWA,初步证明具一定的特异性,是一种可实际应用的新型抗原。为进一步分析两种抗原,对其蛋白组成及活性成份进行了初步研究。 氨基酸组成的分析 两种抗原浓度均为1 mg/ml,用稀盐酸加热处理后,以氨基酸分析仪(Beckman公司)进行测定。结果表明两种抗原的氨基酸种类基本一致,但绝大     

旋毛虫、卫氏并殖吸虫及华支睾吸虫之间共同抗原的研究

目的鉴定旋毛虫、卫氏并殖吸虫及华支睾吸虫之间的共同抗原,避免血清学诊断这3种寄生虫病时的交叉反应。方法应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酸胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印渍(Western blot)对旋毛虫肌幼虫、卫氏并殖吸虫成虫及华支睾吸虫成虫可溶性抗原中的蛋白组分进行研究。结果旋毛虫肌幼虫、卫氏并殖吸虫成虫及华文睾吸虫成虫3者相同蛋白带的分子量为108、65、53、43、42、31、25、16 kDa。免疫印渍结果表明,旋毛虫和卫氏并殖吸虫抗原中分子量为 65、58、53kDa的蛋白带均与旋毛虫感染的大鼠、小鼠及患者血清、肺吸虫感染的大鼠和患者血清发生反应;旋毛虫和华支睾吸虫抗原中分子量为108kDa的蛋白带均与旋毛虫感染的大鼠、小鼠及患者血清、肝吸虫病患者血清发生反应;而3种可溶性抗原中的53kDa与本实验中所有寄生虫感染的动物和患者均有交叉反应。结论 65、58、53 kDa蛋白为旋毛虫和卫氏并殖吸虫的共同抗原,108kDa蛋白为旋毛虫和华支睾吸虫的共同抗原,而53 kDa蛋白为这3种寄生虫的共同抗原。     

药用淀粉生产工艺改进研究

用十二烷基硫酸钠或十二烷基磺酸钠与亚硫酸的混合液浸泡玉米，能有效地降低玉米淀粉中的蛋白质含量，较单独用亚硫酸浸泡，所得玉米淀粉的蛋白质含量可分别降低４０％和３５％。     

十二烷基硫酸钠制备脱细胞真皮基质的实验研究

目的 探讨十二烷基硫酸钠制备脱细胞真皮基质的最佳浓度及作用时间.方法 取临床截肢患者废弃的皮肤,分成90块,随机分成6组,每块约1 cm×1 cm,分别置于0.1%、0.25%、0.5%、1.0%、2.5%、5.0%十二烷基硫酸钠溶液中脱细胞,每隔8 h取材一次,分别取材15次.取材标本行大体和组织学观察.结果 肉眼观察十二烷基硫酸钠作用8 h后,0.25%组可将表皮与真皮完整分离;光镜检查显示0.25%十二烷基硫酸钠在作用40 h后,能将真皮内的细胞及细胞碎片脱净,形成脱细胞真皮基质.制备的脱细胞真皮基质,主要由胶原纤维网架构成,其他组作用120 h也无法形成真正的脱细胞真皮基质.结论 十二烷基硫酸钠制备脱细胞真皮基质的最佳浓度为0.25%,最佳时间为40 h.与其他方法比较,具有简便、快捷、有效、价廉、宜推广等特点,可为临床急诊的修复争取宝贵的时间.     

骨髓基质细胞条件培养液中神经活性物质的提取与纯化

目的分离纯化骨髓基质细胞(bone marrow strolnal cells，BMSCs)条件培养液以获得某些神经活性物质。方法分离培养小鼠骨髓基质细胞并收集其培养液，超滤浓缩后采用Sephadex G-100层析，高效液相色谱分析(HPLC)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶不连续电泳(SDS-PAGE)等技术分离其培养液中的蛋白组分并利用细胞培养技术验证其神经活性作用。结果骨髓基质细胞培养液经Sephadex G-100层析及HPLC分析，证实Ⅲ峰中的A峰和B峰对神经细胞生长有明显的促进作用，其相对分子质量分别为18000和14000。结论骨髓基质细胞条件培养液中相对分子质量为18000和14000两组分对神经元有营养活性。     

十二烷基硫酸钠在天然水体中的降解作用

本文研究了十二烷基硫酸钠在天然水体中的降解作用,结果表明十二烷基硫酸钠在天然水体中的降解主要依赖于微生物的降解。微生物最适降解条件为ｐＨ６．５～９．４和３６℃左右。降解作用随温度升高（４～３６．５℃）和微生物浓度增大而加快,用十二烷基硫酸钠预先驯化微...     

重组人肝再生增强因子的克隆、表达及纯化

目的通过构建原核表达系统，在大肠埃希菌中表达重组人肝再生增强因子（hALR）蛋白，为各种急慢性肝损伤及肝衰竭的治疗提供新的治疗方法奠定基础。方法利用正常人肝组织提取总RNA，经一步法逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）获取hALR cDNA全序列，构建原核表达载体hALR—pET28a（＋）转化大肠埃希菌（BL21），诱导表达重组hALR蛋白，以组氨酸为标签进行蛋白纯化。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和Western Blot鉴定重组蛋白。结果经双酶切和DNA测序证实hALR cDNA正确插入表达载体pET28a（＋），成功表达并纯化得相对分子质量为23000的重组蛋白，低温诱导表达使可溶蛋白明显增加，与预期结果相符。结论成功表达和纯化获重组hALR蛋白。     

GC测定非诺贝特制剂中十二烷基硫酸钠含量

目的 建立非诺贝特制剂中十二烷基硫酸钠的GC测定方法。方法 采用HP-5（30 m×0.53 mm,2.65 μm）毛细管柱,以氮气为载气,氢火焰离子化检测器,程序升温,直接进样,以十二烷醇为对照品外标法测定十二烷基硫酸钠的含量。结果 十二烷醇在0.165~1.32 mg·mL^-1内具有良好的线性关系,相关系数为0.999 5。国内企业产品的十二烷基硫酸钠用量远低于安全用量,但部分国内企业可能存在过量添加和非法添加的问题。结论 本方法准确,专属性强,可作为非诺贝特制剂中十二烷基硫酸钠的检测方法。     

十二烷基硫酸钠中脂肪醇组成及含量的测定

目的：研究十二烷基硫酸钠中脂肪醇组成的测定方法。方法：采用加酸回流的前处理方法将烷基硫酸钠转化为脂肪醇;采用气相色谱直接进样,HP-5（30m×320μm,0.25μm）、RTX-5（30m×320μm,0.25μm）毛细管色谱柱;进样口温度为270℃,FID检测器温度为300℃;分流比为10：1;升温程序：80℃保持5min,以10℃?min-1的速率升至180℃,保持6min,以10℃?min-1的速率升至280℃,保持5min。采用面积归一化法计算各脂肪醇组成。结果：在选定的色谱条件下,辛醇、癸醇、十二烷醇、十四醇和十六醇5个组分可达到有效分离;精密度和稳定性的RDS均不大于2.0%,各脂肪醇的检出限均为2μg?mL-1。测定供试品15批,国产和进口十二烷基硫酸钠辅料样品其脂肪醇组成差别显著;分析纯和色谱纯十二烷基硫酸钠试剂其脂肪醇组成差别显著。结论：本方法适用于十二烷基硫酸钠中脂肪醇组成的测定,为十二烷基硫酸钠品种的标准完善、产品的控制和分型提供技术支撑。