P21waf1/cip1基因在原发性肝细胞肝癌中的表达

目的：研究原发性肝细胞肝癌（HCC）中p21^wafl/cipl(简称p21)基因的表达。方法：利用组织芯片技术和免疫组织化学技术（SP法）检测40例HCC及其癌旁,远癌正常组织中p21蛋白的表达情况。结果：40例原发性HCC肿瘤组织中11例有p21蛋白表达缺失,而癌旁组织中有2例p^21蛋白表达缺失,远癌正常组织仅1例p^21分级有密切联系。结论：p21蛋白的缺失与HCC的发生,发展有关。     

p53、p21wafl和PCNA诊断肺癌价值研究

 目的　筛选肺癌诊断标志物。方法　运用病例—对照研究 ,评价p53、p2 1wafl及PCNA蛋白诊断肺癌价值。结果　 ( 1)肺癌p53、p2 1wafl及PCNA蛋白表达阳性率均明显高于慢性肺良性疾病。 ( 2 )p53蛋白诊断肺癌的阳性似然比为 13 97,其特异度显著高于p2 1wafl和PCNA。 ( 3)p53阴性者联合p2 1wafl和PCNA平行试验的阴性似然比为 0 10 5。结论　 ( 1)肺癌p53、p2 1wafl和PC NA蛋白表达上调 ,三者均与肺癌有很强联系。 ( 2 )p53是较好的肺癌诊断单项指标。三项蛋白表达均为阴性时 ,倾向于排除肺癌诊断。     

丁酸钠对小鼠大肠组织抑癌基因表达的影响

目的：观察大肠癌变过程中不同类型腺体组织抑癌基因p21waf1、bax、gadd45的表达及丁酸钠对其表达的影响。方法：利用二甲基肼（DMH）制作昆明小鼠大肠癌模型,通过免疫组化和RT-PCR分别检测大肠癌变过程中,小鼠大肠粘膜不同病理状态下3种抑癌基因的表达与变化。结果：在正常粘膜发展至腺瘤的过程3种基因的表达水平逐渐升高,而癌组织中3种抑癌基因的表达不同程度的降低。丁酸钠灌肠组各基因表达明显高于对照组和DMH组,其中以p21waf1的升幅最大。结论：大肠粘膜癌变与抑癌基因p21waf1、bax、gadd45的表达有关,丁酸钠可以通过调控3种抑癌基因的表达发挥抗肿瘤作用。     

大肠瘤-癌序列中细胞凋亡及其相关调控基因表达的生物学意义

为探讨细胞凋亡状态及其相关调控基因表达水平与人大肠癌演进的关系,作者分别采用ＦＣＭ检测短期原代培养的人大肠粘膜、腺瘤及癌细胞不同时相凋亡频率;ＴＵＮＥＬ技术检测２５例腺瘤和７７例腺癌组织中原位凋亡指数（ＡＩ）;免疫组化ＡＢＣ法检测原位增殖指数（ＫＩ）及ｂｃｌ－２、ｂａｘ、ｗａｆ１及ｐ５３基因表达。结果显示：体外培养癌细胞生长期凋亡频率明显低于粘膜细胞;体内瘤－癌组织中ＡＩ与ＫＩ相平衡;高分化和早期癌中ｂｃｌ－２呈高表达,癌前腺瘤、癌栓及远处转移病例中ＡＩ／ＫＩ增高并与ｂａｘ阳性表达和ｗａｆｌ缺失表达有一定联系,ｐ５３突变与高增殖水平有关。从而提示凋亡易感性改变可能在结直肠肿瘤形成早期起着重要作用;ＡＩ可能是一个反映增殖活性的指标;Ｂｃｌ家族基因与大肠癌细胞自发性凋亡及生物学行为有密切关系。     

电离辐射对小鼠骨髓细胞p53、Wafl、gadd45基因转录水平的影响

目的研究X射线全身照射对小鼠骨髓细胞p53、wafl、gadd45基因转录水平的影响,以探讨电离辐射诱导小鼠骨髓细胞G1阻滞的分子机理.方法采用Northern blot和半定量RT-PCR方法分别检测p53、wafl、gadd45基因转录水平变化.结果2GyX射线全身照射后2～72 hp53基因转录水平均有不同程度的升高,wafl基因在照射后2 h开始升高,4 h达峰值,一直持续到照后48 h开始恢复,gadd45转录水平除在照射后2 h一过性升高外,从8 h即开始不同程度下降,照射后72 h开始恢复.分别以0.5～6.0 Gy X射线全身照射后12 h取小鼠骨髓细胞作量效研究表明,p53的改变在照射后各组虽有不同程度的升高,但未见明显的剂量依赖,wafl基因转录呈明显的剂量依赖性升高,6.0 Gy X射线照射后达对照组的3.41倍,gadd45未见升高趋势.结论在电离辐射诱导的小鼠骨髓细胞周期G1阻滞中p53-wafl通路起重要作用,而gadd45可能不参与该过程调控.     

自拟消斑通脉合剂对血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

[目的]观察中药复方消斑通脉合剂药物血清对体外培养的VSMCs凋亡的影响。[方法]体外培养VSMCs,取对数生长期细胞用于实验,MTT方法观察VSMCs增殖活性;流式细胞仪检测体外培养的VSMCs的凋亡率;透射电镜观察VSMCs形态变化;免疫组织化学方法检测药物血清对VSMCs中P21蛋白表达。[结果]流式法细胞仪显示药物血清可明显诱导VSMCs凋亡,与对照组比较有统计学差异(P<0.01);免疫组化结果提示药物血清可提高VSMCs中P21蛋白表达,与对照组比较有统计学差异(P<0.01)。[结论]中药复方消斑通脉合剂药物血清通过促进VSMCs中P21~(wafl/cipl)蛋白表达而达到抑制VSMCs增殖与诱导凋亡作用。     

P21~(cipl/wafl)基因在C57BL/6N系小鼠腭突发育中对细胞增殖周期的调控作用

目的：探讨腭裂形成过程中腭突间充质细胞的增殖周期的变化及其调节基因Ｐ２１ｃｉｐｌ／ｗａｆｌ基因表达的意义。方法：用原位杂交、ＴＵＮＥＬ染色检测两组小鼠腭突间充质细胞增殖周期调控基因Ｐ２１ｃｉｐｌ／ｗａｆｌ基因的表达及细胞程序性死亡的发生。结果：在腭突发育的垂直生长期、上抬期,实验组中ＴＵＮＥＬ阳性指数明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。同时,Ｐ２１ｃｉｐｌ／ｗａｆｌ基因ｍＲＮＡ的转录水平也比同期对照组腭突间质细胞中Ｐ２１ｃｉｐｌ／ｗａｆｌ基因的表达增高（Ｐ＜０．０５）。结论：在腭突发育时期,实验组小鼠腭突间充质未分化细胞增殖周期抑制。Ｐ２１ｃｉｐｌ／ｗａｆｌ基因表达升高提示可能参与了细胞增殖周期抑制过程     

Inhibitory effect of tumor suppressor p33(ING1b) and its synergy with p53 gene in hepatocellular carcinoma

AIM: To investigate the inhibitory effect of tumor suppressor p33ING1b and its synergy with p53 gene in hepatocellular carcinoma (HCC). METHODS: Recombinant sense and antisense p33ING1b plasmids were transfected into hepatoma cell line HepG2 with lipofectamine. Apoptosis, G0/G1 arrest, cell growth rate and cloning efficiency in soft agar of HepG2 were analyzed after transfection. In three hepatoma cell lines with different endogenous p53 gene expressions, the synergistic effect of p33ING1b with p53 was analyzed by flow cytometry and luciferase assay was performed to detect the activation of p53 downstream gene p21WAF1/CIP1. In addition, the expression and mutation rates of p33ING1b in HCC tissues were measured by immunohistochemistry and polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism (PCR-SSCP). RESULTS: Overexpression of p33ING1b inhibited cell growth of HepG2, induced more apoptosis and protected cells from growth in soft agar. Combined transfer of p33ING1b and p53 gene promoted hepatoma cell apoptosis, G0/G1 arrest and elevated expression of p21WAF1/CIP1. Immunostaining results showed co-localized P33ING1b with P53 protein in HCC tissues and there was a significant relation between protein expression rates of these two genes (P<0.01). Among 28 HCC samples, p33ING1b presented a low gene mutation rate (7.1%). CONCLUSION: p33ING1b collaborates with p53 in cell growth inhibition, cell cycle arrest and apoptosis in HCC. Loss or inactivation of p33ING1b normal function may be an important mechanism for the development of HCC retaining wildtype p53.     

急性白血病p27kipl、cyclinE及p21 wafl、p16的表达及其意义

目的 :探讨在急性白血病 (AL )中 p2 7kipl、cyclin E及 p2 7kipl、p16的表达情况及其临床意义。方法 :用免疫组化 SP法检测 39例 AL中 p2 7,cyclin E及 p2 1、p16的表达 ,并观察临床化疗效果。结果 :139例 AL中 p2 7,cyclin E,p2 1,p16阳性表达分别为 2 8例 (71.8% )、2 9例 (74.4% )、19例 (4 8.7% )、14例 (35 .9% ) ,阳性反应部位以胞核分布为主。2 p2 7与 cyclin E的表达呈显著正相关 (r=0 .83,P<0 .0 1) ,在 2 8例 p2 7过表达的 AL中有 2 2例 cyclin E表达亦增强 (78.6 % )。p2 7与其它两种蛋白 p16、p2 1之间表达无明显相关 (P>0 .0 5 )。3p2 7高表达伴或不伴随cyclin E过表达的 AL完全缓解率高 ,预后较好。反之 p2 7低表达或阴性者完全缓解率低 ,早期复发率高 ,预后差。结论 :p2 7及 cyclin E的协同表达异常对 AL的发生、发展有一定作用 ,是反映 AL复发难治 ,判断预后的重要指标     

抗纤灵对人肝癌细胞裸鼠复种移植瘤的抑制作用

为证实中药抗纤灵的抑癌作用，采用人肝癌细胞裸鼠复种移植瘤，分抗纤灵组，环磷酰胺（ＣＴＸ）组和空模组对照治疗试验。结果：治疗前３组移植瘤体积差异无显著性。治疗后抗纤灵组及环磷酰胺组移植瘤体积分别小于空模组，而抗纤灵组及环磷酰胺组和抑瘤率无显著性差异，抑瘤率为３３．０％，表明中药抑瘤与环磷酰胺相当。其机理与提高Ｐ＾Ｗａｆｌ／Ｃｉｐｌ２１表达有关。