蓬子菜化学成分研究

目的:对茜草科拉拉藤属植物蓬子菜Galium verum全草的95%乙醇提取物进行分离并鉴定.方法:经反复纯化制备化合物,并根据化合物的理化性质分析、波谱解析、对照品比较及与文献报道对比鉴定化合物的化学结构.结果:从95%乙醇提取物中分离得到11个化合物,分别鉴定为(+)-松脂素4,4'-o-二-β-D-吡喃葡萄苷(1),表松脂醇(2),右旋杜仲树脂酚(3),异鼠李素(4),异鼠李素3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1-6)-β-D-吡喃葡萄苷(5),香叶木素(6),香叶木素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7),异槲皮苷(8),熊果酸(9),熊果醛(10),茜草萜酸(11).结论:化合物1～5,9～11为从本属植物中首次分离得到.     

蓬子菜总黄酮对四氯化碳诱导的小鼠肝损伤的保护作用及机制

目的 探讨蓬子菜总黄酮（total flavonoids extracts of Galium verum L.,TFG）对CCl₄致小鼠急性肝损伤的影响及其机制。方法 60只昆明小鼠随机分成正常组、模型组、阳性对照组、TFG组。各治疗组予以相应的药物灌胃6 d后,除正常组外其余各组腹腔注射6% CCl₄造模,24 h后取样,肝组织HE染色,检测血清中谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）以及肝肾组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）水平,分析血清中TNF-α和IL-6水平。昆明小鼠50只,随机分成正常组、模型组、TFG组（200 mg·kg^-1）、抗IL-6单抗（40 mg·kg^-1）+TFG（200 mg·kg^-1）组、抗TNF-α单抗（5 mg·kg^-1）+TFG（200 mg·kg^-1）组,各治疗组予以相应的药物处理6 d后,除正常组外,其余各组腹腔注射6% CCl₄造模,24 h后取血清分析AST、ALT水平。结果 与模型组比较,蓬子菜总黄酮能改善肝损伤,降低血清中AST、ALT活性以及肝肾中MDA含量,提高肝肾SOD活性、GSH含量,降低血清中TNF-α和IL-6表达（P<0.05或P<0.01）。抗IL-6、TNF-α单抗能明显降低血清中AST、ALT活性（P<0.05）。结论 蓬子菜总黄酮能通过清除自由基、抑制脂质过氧化,保护细胞膜和线粒体膜的完整性。同时减少IL-6、TNF-α的释放,改善急性肝损伤。     

UPLC-TOF-MS analysis of Galium spurium towards its neuroprotective and anticonvulsant activities

Ethnopharmacological relevance

Galium species have been reported to be used against epilepsy in traditional Turkish folk medicine.

Aim of study

The present work was undertaken to evaluate the in vivo anticonvulsant and in vitro neuroprotective effects of Galium spurium L. and to determine the major constituents by UPLC–TOF-MS.

Materials and methods

Anticonvulsant activity of the aerial parts of Galium spurium was investigated using pentylenetetrazole, picrotoxin, and maximal electroshock-induced seizure animal models. In order to evaluate the safety, neurotoxicity (Rota rod test) of the ethanol extract was also determined. In vitro neuroprotective effect of the ethanol extract of Galium spurium was assessed by acetylcholinesterase and butrylcholinesterase inhibitions. Ultra Performance Liquid Chromatography–Time of Flight Mass Spectrometer (UPLC–TOF-MS) was used to identify the major compounds in the extract.

Results

In pentylenetetrazole-induced seizure, the ethanol extract at doses of 250 and 1000 mg/kg prolonged the onset of seizures. Similarly, Galium spurium (250 and 500 mg/kg) significantly delayed the onset of picrotoxin-induced seizures in mice and these doses also exhibited 12.5% and 17% protection, respectively, against picrotoxin-induced seizures. Furthermore, Galium spurium extract showed a significant protective effect against maximal electroshock-induced seizures at doses of 250 and 1000 mg/kg (50% and 37.5%, respectively) and also all tested doses prolonged the onset of seizures. No motor co-ordination was observed with intraperitoneal injection of Galium spurium extract at doses of 500 and 1000 mg/kg. The extract exhibited 16.2% inhibition against butrylcholinesterase at 200 μg/mL concentration, whereas it did not inhibit acetylcholinesterase. Phytochemical analysis of the extract based on the MS data by UPLC–TOF-MS, ten major compounds (phenolic and triterpenic acids, flavonoids and iridoids) were determined.

Conclusions

The results indicate that Galium spurium may have anticonvulsant activity against picrotoxin and maximal electroshock-induced seizures in mice. Phenolic acids, flavonoids and iridoids might be responsible for anticonvulsant activity. The results offer possible beneficial effects by the plant's aerial parts and may suggest a realistic explanation for its traditonal usage in epilepsy.     

蓬子菜多糖分离纯化及其性质的研究

目的：从蓬子菜中提取分离水溶性多糖,并分析其理化性质,为板蓝根质量控制与进一步开发利用提供参考。方法：主要采用Sephadex G-100凝胶色谱柱分离纯化,测定各部位中性糖和酸性糖的含量。结果：从蓬子菜水溶性多糖中分离纯化得到2种不同的均一多糖组分TP-1、TP-2,总糖含量均达到90%以上。结论：2种均一多糖首次从蓬子菜中分离得到。     

八仙草化学成分研究

目的研究八仙草（Galium aparineL.）全草的60%乙醇提取物的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及制备薄层等方法进行分离纯化,通过波谱解析和理化鉴别进行结构鉴定。结果分离鉴定了8个黄酮类化合物,分别为槲皮素（1）,木犀草素（2）,芹菜素（3）,橙皮素（4）,醉鱼草苷（5）,山奈酚-3-新橙皮糖苷（6）,柽柳素-3-芸香糖苷（7）,橙皮苷（8）。结论化合物3～7首次从该植物中分离得到。     

八仙草化学成分研究

目的 研究八仙草（Galium aparine L.）全草的60%乙醇提取物的化学成分。方法 采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及制备薄层等方法进行分离纯化,通过波谱解析和理化鉴别进行结构鉴定。 结果 分离鉴定了8个黄酮类化合物,分别为槲皮素（1）,木犀草素（2）,芹菜素（3）,橙皮素（4）,醉鱼草苷（5）,山奈酚-3-新橙皮糖苷（6）,柽柳素?鄄3?鄄芸香糖苷（7）,橙皮苷（8）。结论 化合物3～7首次从该植物中分离得到。     

藏药材猪殃殃质量标准研究

目的：建立猪殃殃药材中绿原酸的薄层色谱鉴别与含量测定方法。方法：采用TIE法对猪殃殃进行鉴别;采用HPLC法测定绿原酸含量,色谱条件为：色谱柱：Phenomenex Luna C18（4．6mm×150mm,5μm）;流动相：乙腈-0．4％磷酸溶液（10：90）;检测波长：327nm;流速：1．0ml/min;柱温：35℃。结果：各批猪殃殃药材TLC色谱中均能检出绿原酸;绿原酸眦色谱峰与其它色谱峰分离良好,进样量在0．0892-0．4460μg范围内,呈良好线性关系（r=0．9997）,平均回收率为96．99％,RSD=1．17％（n=6）。结论：本法简便快捷,结果可靠．为控制猪殃殃药材的质量提供参考。     

猪殃殃酚性成分研究

目的:对猪殃殃Galium aparine var.tenerum全草中酚性成分进行研究.方法:采用各种色谱法分离,运用多种波谱技术鉴定化合物结构.结果:从猪殃殃乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部位分离鉴定了6个化合物,分别鉴定为对羟基苯乙酮(1),香草酸(2),3,4-二羟基苯甲酸(3),对羟基桂皮酸(4),没食子酸(5),4-羟基古柯间二酸(6).结论:化合物6为首次从天然产物中得到,并运用二维核磁共振波谱技术(~1H-~1H COSY,HMQC和HMBC)首次对其碳谱和氢谱数据进行了全归属,化合物1-5均为首次从该属植物中得到.     

猪殃殃的生药学研究

目的研究猪殃殃的生药鉴定特征。方法对猪殃殃的药材性状、显微特征及理化性质进行研究。结果详细描述了猪殃殃全苹的生药鉴定特征及其所含的各类成分。结论猪殃殃具有独特的生药学特征,可为其鉴定、开发利用及质量标准的制订提供依据。     

蓬子菜黄酮类化合物对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的机制研究

目的 探讨莲子菜黄酮类化合物香叶木素-7-O-β-D-木糖-(1→6)-β-D-葡萄糖苷(DXG)对人肝癌细胞株HepG2增殖的抑制作用及其诱导HepG2细胞凋亡的机制.方法 台盼蓝染色法检测DXG对HepG2细胞生长的影响;MTT法检测DXG对细胞增殖的抑制作用;吖啶橙/溴乙(AO-EB)荧光染色法观察DXG对HepG2细胞凋亡的形态学影响;琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA图谱变化;反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测凋亡相关基因bcl-2及bax的表达.结果 台盼蓝染色和MTT检测显示,DXG 50、100、200 μg/mL能明显抑制HepG2细胞增殖,与对照组相比差异显著(P＜0.05).AO-EB染色可见DXG诱导HepG2细胞凋亡并发生形态学改变,且随DXG的质量浓度升高,凋亡细胞的比例显著增加.琼脂糖凝胶电泳显示,HepG2细胞经DXG 100、200 μg/mL处理48 h后,可见DNA“梯形”碎片条带.RT-PCR实验表明,DXG下调细胞凋亡的抑制基因bcl-2 mRNA表达,促使凋亡基因bax mRNA表达增强.结论 DXG具有显著抑制人肝癌细胞HepG2增殖、诱导其凋亡的作用,其作用机制与调控bax/bcl-2的表达有关.