首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
文章检索
  按 检索   检索词:      
出版年份:   被引次数:   他引次数: 提示:输入*表示无穷大
  收费全文   443篇
  免费   17篇
  国内免费   66篇
耳鼻咽喉   2篇
儿科学   3篇
妇产科学   1篇
基础医学   84篇
口腔科学   1篇
临床医学   30篇
内科学   87篇
神经病学   1篇
特种医学   14篇
外国民族医学   1篇
外科学   31篇
综合类   143篇
预防医学   27篇
药学   34篇
中国医学   3篇
肿瘤学   64篇
  2020年   2篇
  2019年   1篇
  2018年   2篇
  2017年   3篇
  2015年   1篇
  2014年   3篇
  2013年   4篇
  2012年   5篇
  2011年   10篇
  2010年   18篇
  2009年   16篇
  2008年   16篇
  2007年   32篇
  2006年   41篇
  2005年   40篇
  2004年   48篇
  2003年   59篇
  2002年   50篇
  2001年   35篇
  2000年   40篇
  1999年   36篇
  1998年   28篇
  1997年   11篇
  1996年   14篇
  1995年   9篇
  1992年   1篇
  1990年   1篇
排序方式: 共有526条查询结果,搜索用时 31 毫秒
1.
我们在既往的研究中 ,为探讨肝癌裸鼠移植瘤细胞DNA合成与端粒酶表达的生物节律 ,在时辰同步化裸鼠中构建了肝癌细胞SMMC 772 1裸鼠移植瘤。继续在程控光照条件下饲养 ,于光照后 3,6 ,9,1 2 ,1 5 ,1 8,2 1小时取样 ,用流式细胞仪测定各时期细胞DNA含量 ,细胞周期分布及端粒酶活性水平。结果 ,肝癌裸鼠移植瘤细胞DNA合成随昼夜节律变化 ,且伴随端粒酶活性的同步节律变化 ,均在光照后 2 1小时达高峰 ,光照后 9小时处于低谷 ;节律周期呈余弦分布。表明 ,肝癌裸鼠移植瘤的生长与端粒酶活性表达在静止相达高峰 ,为制定肿瘤时辰化疗方案提…  相似文献   
2.
3.
目的 体外研究锤头型α1Ⅰ型及Ⅲ型前胶原基因第2外显子片段核酶对各自靶RNA分子的切割活性及反应条件。同时观察两反义核酶对瘢痕中成纤维细胞胶原合成的影响。方法 将含α1Ⅰ型及Ⅲ型前胶原基因第2外显子片段的重组质粒(pT-Ⅰ、pT-Ⅲ),经体外^32P标记转录后形成产物靶RNA。同时将含特异性核酶基因的重组质粒(pT-gⅠ、pT-gⅢ)进行非标记的体外转录,产物(核酶)与各自的^32P-靶RNA按不同的条件混和反应,电泳后放射自显影观察结果。将构建好的核酶以脂质体包裹后导入培养的成纤维细胞内,采用图像分析法观察核酶对成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白mRNA合成的影响。结果 两种核酶在37℃、42℃均能有效切割各自的靶RNA,对Mg^2 浓度的要求范围较宽(10~20mmol/L);反应温度从65℃逐渐降至并维持在37℃的条件下核酶切割活性显提高。Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达明显降低,胶原蛋白生成降低,胶原生成明显受抑制。结论 针对α1Ⅰ型及Ⅲ型前胶原基因第2外显子片段的核酶能有效地在体外对靶RNA进行切割并能有效地抑制瘢痕中成纤维细胞胶原的合成。  相似文献   
4.
MDR1特异性核酶逆转肝癌多药耐药的实验研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的探讨MDR1核酶(N2A+tRNAi^met-iMDRl-sRz,sRz)在裸鼠体内逆转人肝癌组织多药耐药(MDR)的可行性。方法将原发性MDR人肝癌组织裸鼠原位移植模型第2代随机分为A组(空白对照组:生理盐水40μl+Lipofect AMINE^TM2000 10μ1)、B组(阴性对照组:N2A+tRNAi^met 10μg/40μl+Lipofect AMINE^TM2000 10μl)和C组(核酶组:sRz 10μg/40μl+LipofectAMINE^TM2000 10μl),均开腹瘤内注射。瘤内注药1周后用表阿霉素15mg/kg腹腔注射,每周1次,连续4周。彩色B超测量肿瘤体积。化疗结束后1周处死裸鼠,RT-PCR、Western blot法检测肿瘤中MDR1 mRNA及其蛋白P-gp的表达。结果C组每次化疗后肿瘤体积均较前缩小(F=659.99,P〈0.05)。除第1次化疗外,其余各次化疗后C组的抑制率均高于A、B组(F=35.36,12.77,97.60,P〈0.05)。化疗结束后,C组与瘤源以及A、B组相比,肿瘤组织中MDR1 mRNA和P-gp的表达明显降低(F=45.36,3590.40,P〈0.05)。结论sRz可有效降低肝癌细胞表达MDR1 mRNA和P-gp,一定程度上逆转MDR,提高E-ADM的化疗效果。单纯E-ADM化疗可使肝癌组织MDR1 mRNA和P-gp表达升高,诱导MDR的产生。  相似文献   
5.
抗端粒酶核酶抑制肝癌细胞裸鼠移植瘤生长的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
设计针对端粒酶RNA组分的特异性核酶,研究该核酶对肝癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响。构建含针对端粒酶RNA组分锤头状核酶基因的重组真核表达质粒pBBS212-RZ,以及建立人肝癌细胞株HepG2裸鼠移植瘤模型。将不同剂量的pBBS212-RZ用脂质体包裹后进行瘤体内多点注射,对照组注射生理盐水或空质粒载体pBBS212。连续注射2l天后,测量移植瘤体积和重量,检测瘤组织端粒酶活性。抗端粒酶特异性核酶使瘤组织端粒酶活性下降(抑制率为72%),明显地抑制了肝癌细胞裸鼠移植瘤生长(抑制率为68%),且存在剂量依赖性。抗端粒酶特异性核酶作为一种有效的端粒酶抑制剂,可抑制肝癌细胞的生长,有望在肝癌基因治疗中发挥作用。  相似文献   
6.
大隐静脉是冠脉旁路手术中重要的移植血管桥,然而其远期通畅率却较动脉桥低,10年通畅率仅有60%左右,其中又有50%的患者伴有不同程度的移植血管再狭窄,因此限制了其应用。而动脉桥来源有限且取材不便,也影响了冠脉搭桥手术的发展。我们以pUC-SRα为载体,阳离子脂质体介导的针对NF-kB mRNA的核酶R65转染冠脉旁路术模型犬静脉移植血管,观察其抑制内膜形成及中膜平滑肌增生的作用。  相似文献   
7.
识别 t RNA身份的能力对基因编码系统的功能是必需的。翻译时氨酰 t RNA合成酶 (ARSs)识别 t RNA的身份并装配上与它们关联的氨基酸。文中证明一种体外进化的核酶也能区分专一的 t RNA,并能将氨基酸转移到关联 t RNA3’端。该核酶能与 CCA-3’末端和 t RNAf Met的反密码子环相互作用 ,且它的 t RNA专一性受这些相互作用控制。利用这一特性能设计核酶对专一 t RNA的选择性 ,从而定制有效的氨酰基转移催化剂。该法可用来产生非天然氨基酸装配的氨酰 t RNA,且它们能通过无细胞翻译系统合成蛋白质一种基于可设计核酶的非天然氨基…  相似文献   
8.
核酶在病毒性感染基因治疗中的应用   总被引:1,自引:0,他引:1  
核酶与底物RNA结合后行使其切割功能,可用于降特定的mRNA,控制多种病毒感染以及用于癌症的治疗。RNA在病毒和其他疾病中具有重要的作用,针对HIV基因组的基本结构,利用核酶特异性降解靶RNA的特性,人们成功地设计对针对HIV-1不同结构RNA的核酶并成功地介导了核酶基因转入CD4^+细胞或细胞株的基因治疗。除AIDS外,核酶还成功地用于抗HBV,HPV等病毒性感染的研究中。  相似文献   
9.
切割bcl-2 mRNA核酶诱导人胆管癌细胞凋亡的形态学改变   总被引:9,自引:4,他引:5  
范敏东  赵永同 《医学争鸣》2000,21(3):324-327
研究切割bcl-2mRNA核酶诱导胆管财亡的形态学改变。方法将合成的切割bcl-2mRNA核酶民真核细胞表达载体重组,并用重组后的载体转染人胆管癌细胞,通过光镜及扫描和透射电镜手段,观察转染后的胆管癌细胞,通过光镜及扫描和透射电镜手段,观察传染后的胆管癌细胞凋亡的形态学改变。  相似文献   
10.
目的:设计与克隆特异切割多药耐药基因(MDR1) 的核酶。方法:针对人类MDR1 mRNA第Ⅶ外显子附近第196 密码子的GUC 序列,按照“锤头结构”模型,设计、合成核酶,并定向克隆入载体PGEM-3Zf(t) 中;通过PCR- SSCP法及限制性分析,确保扩增片断为外源插入的DNA序列,并经DNA测序证实。结果:重组质粒插入片断序列与设计序列一致。结论:设计、克隆核酶作用人类MDR1 mRNA是有效的  相似文献   
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号