Ataxin-3与相关疾病的分子机制的研究进展

Ataxin-3 (AT3,ATXN3)是一种重要的去泛素化酶,正常情况下,它参与基因转录、蛋白代谢、磷酸化以及自身泛素化水平的调节。然而突变的Ataxin-3的表达可致转录失调,导致细胞毒性和神经退行性变疾病,如脊髓小脑共济失调3(SCA3)。AT3的异常不仅能导致神经性病变,而且据最近世界各地的研究表明,AT3的失调可能涉及一些人类癌症或者癌症前期病变(如胃癌、乳腺癌、肺癌、睾丸癌、肝硬化等)的发病机制。虽然目前国内关于ATXN3的研究较少,但在国外已经有大量研究报道,该综述主要总结它的功能与疾病的关系。     

帕金森病相关致病基因的研究进展

近年来，帕金森病(PD)的遗传学研究取得了较大的进展，迄今为止已经确定了PARK1-PARK10等10个单基因与PD的发生有关。其中三个基因产物与家族性PD有关，它们分别是a-synuclein(PARK1)、parkin(PARK2)和泛素蛋白C末端羟化酶-L1(PARK5)，它们均参与Lewy小体．的形成，在PD的发病过程中扮演重要的角色。虽然另外几个基因对应的蛋白或对应蛋白的功能未知，但已经在染色体上找到相应的位置。PD遗传学的研究将有助于PD的早期诊断．并且有可能为PD的治疗提供新的靶点。本文概述了PD相关基因的最新研究进展。     

泛素在危重病医学中的研究

20世纪70年代，研究人员发现，胸腺组织以外其他组织的提取物也有着与胸腺生成素（thymopoietin）相似的促T淋巴细胞分化的作用；基于这一发现，1975年美国纽约大学医学院的Gideon Goldstein、Margrit Scheid等从牛胸腺中分离纯化出一种参与T、B淋巴细胞分化，分子量在8500左右的多肽，并证明其广泛存在于各类真核细胞中，在各物种间具有高度的结构、功能和免疫学上的相似性；Goldstein等推断这种遗传保守性是其在生命活动中发挥重要作用的一种体现，并将其命名为ubiquitous immunopoietic polypeptide（UBIP），即是后来被人们称为“泛素”（ubiquitin）的物质。虽然，关于这种由76个氨基酸组成的泛素（亦被为泛蛋白）是否具有促免疫细胞分化的作用曾存在过争议，但是进一步的研究表明，泛素及其对蛋白质的标志修饰（即泛素化，ubiquitination or ubiquityrmtion）除了参与细胞内ATP依赖的选择性蛋白质降解过程（ATP-dependent selective protein degradation，即泛素-蛋白酶体途径，ubiquitin—proteasome pathway），还与泛素依赖性的蛋白质分类（ubiquitindependent protein sorting，即膜运输membrane trafficking）等过程有关；它们介导着细胞内蛋白酶体依赖性的和非蛋白酶体依赖性的蛋白降解过程，在细胞分化、抗原呈递、细胞凋亡、热休克反应、炎症反应、蛋白质的翻译转录及相互的作用等细胞内生命活动中发挥着重要的作用。作为仅次与磷酸化的、一种重要的蛋白质转录后的修饰过程，它与磷酸化一样都有着功能多、发生迅速的特点，可以通过专门的酶（去泛素化酶deubiquitination enzymes，磷酸化为磷酸酶）逆转，同时接受着细胞外信号的调节。     

烧伤刺激大鼠骨骼肌组织泛素活化酶的转录表达

严重烧伤不仅导致显著病理生理和免疫功能的改变 ,而且严重影响机体的物质和能量代谢。目前公认 ,出现机体能量消耗明显增加、体重减轻、骨骼肌萎缩等是严重烧伤后显著的代谢特征。然而严重烧伤后骨骼肌蛋白降解率的变化规律及其分子机制仍不清楚。一、材料和方法1.动物模型和标本采集 :雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 60只 (中国医学科学院动物中心提供 ) ,体重 5 0～ 60ｇ ,随机分为正常组、烧伤后 2、6、12及 2 4ｈ组 ,每组 12只 ,活杀取材。试验前 12ｈ禁食 ,自由饮水。复方氯胺酮 ( 0 1ｍｇ/ｋｇ)腹腔注射麻醉 ,脱毛器背部体侧脱毛。麻醉满意后…     

蛋白泛素途径及其非降解功能研究新进展

泛素化是单个或多个泛素在泛素激活酶、泛素结合酶及泛素蛋白连接酶的作用下共价修饰底物蛋白质的过程。在蛋白质降解的过程中，泛素化标记被蛋白水解酶体特异性识别，发挥着枢纽的作用。而近年来的研究发现。泛素化不仅仅是蛋白质降解的标志，它有更为广泛的用途，参与了大量的生命活动。这些研究极大地丰富了对泛素化蛋白水解系统的认识，也使得在分子水平上对蛋白质降解异常导致的顽疾进行治疗不再是梦想。     

泛素蛋白酶体系统与肾脏疾病

泛素蛋白酶体系统是ATP依赖的特异降解胞浆内蛋白的主要途径,它涉及DNA的修复、内质网中蛋白折叠的质量控制、细胞周期的调控、细胞凋亡、信号传导及转录活性的调节等.其成分的改变将引起蛋白降解异常,导致细胞功能紊乱.现已证明,一些肾脏疾病及肾组织损伤均与泛素蛋白酶体系统成分的缺陷或功能异常有关.     

Bre1与Rad6形成的复合物的表达、纯化和结晶

目的：建立Bre1及Rad6的表达和纯化方法,构建Bre1-Rad6的复合物,寻找复合物的结晶条件,为使用X射线晶体学的方法解析复合物的结构奠定基础。方法：使用大肠杆菌表达系统表达蛋白质;使用共纯化的方法组装复合物;使用气象扩散的方法结晶复合物。结果：建立了来源于Lodderomyces elongisporus的Bre1(LeBre1)氮端与Rad6相互作用的结构域（RBD）和Rad6(LeRad6)在大肠杆菌中大量表达的方法;通过使用共纯化的方法,成功组装了LeBre1 RBD-Rad6复合物,并进一步通过两步凝胶过滤层析纯化的方法精细纯化,获得了纯度超过95%的蛋白复合物;使用气象扩散的方法结晶复合物,在18℃通过对1 000多个结晶条件的筛选,确定了复合物的两种结晶条件,进一步对该条件优化,获得了质量相对较好的晶体。结论：成功的构建了LeBre1 RBD-Rad6复合物的表达、纯化和结晶的方法,为使用X射线晶体学方法解析复合物的结构奠定了基础。     

电针预处理对小鼠脑缺血再灌注时脑组织SENP3表达的影响

目的 探讨电针预处理对小鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)后脑组织小泛素样修饰蛋白特异性蛋白酶3(SENP3)表达的影响。方法 将72只雄性10周龄C57BL/6健康小鼠分为3组:假手术组(S组)、CIRI组(I/R组)和电针预刺激组(EA组),每组各24只。I/R组采用双侧颈总动脉夹闭15 min后恢复脑血流的方法建立小鼠CIRI模型。EA组在模型建立前5 d使用电针刺激百会穴,频率1次/d,每次持续电刺激30 min,连续5d,最后1次电针预刺激后24h建立模型。分别于再灌注4、8、12及24 h时处死小鼠取海马CA1区脑组织,TUNEL法计算细胞凋亡率,Western Blot法检测SENP3的相对表达水平。结果 与S组比较,I/R组和EA组海马CA1区细胞凋亡率明显升高(均P <0.05),SENP3表达上调(均P <0.05);与I/R组比较,EA组细胞凋亡率显著降低(P <0.05),SENP3表达下调(P <0.05)。结论 电针预处理可以减少CIRI时神经细胞凋亡,其机制可能与下调SENP3的表达有关。     

依达拉奉联合瑞舒伐他汀治疗心源性脑梗死的疗效及对血清CXCL12、UCH-L1、HC-gp39水平的影响

目的 探究依达拉奉联合瑞舒伐他汀治疗心源性脑梗死的疗效及对血清趋化因子12（CXCL12）、泛素C末端水解酶L1（UCH-L1）、人类软骨糖蛋白-39（HC-gp39）水平的影响。方法 选取2020年3月—2022年4月达州市中心医院收治的90例心源性脑梗死患者作为研究对象,随机分为对照组和观察组,各45例。对照组给予瑞舒伐他汀治疗,观察组给予依达拉奉联合瑞舒伐他汀治疗。比较两组疗效、CXCL12、UCH-L1、HC-gp39、血液流变学指标、血脂水平及美国国立卫生研究院脑卒中量表（NIHSS）评分。结果 观察组总有效率高于对照组（P <0.05）。观察组治疗前后血清CXCL12、UCH-L1、HC-gp39水平的差值高于对照组（P <0.05）。观察组治疗前后全血低切黏度、全血高切黏度及纤维蛋白原水平的差值高于对照组（P <0.05）。观察组治疗前后TC、TG、LDL-C水平的差值高于对照组（P <0.05）。观察组治疗前后NIHSS评分的差值高于对照组（P <0.05）。结论 依达拉奉联合瑞舒伐他汀治疗心源性心肌梗死可有效提高患者临床疗效,改善血液流变学指标、血脂、神经功能及炎症反应。