氢气对中波紫外线致皮肤成纤维细胞氧化损伤的影响

【摘要】 目的 探讨氢气对中波紫外线（UVB）致人成纤维细胞氧化损伤的影响。方法 原代培养人成纤维细胞,分组如下：正常对照组,未经任何处理;氢气对照组,富氢培养液处理;UVB照射组;富氢培养液后处理组;富氢培养液预处理组。通过噻唑蓝（MTT）法观察细胞增殖情况,通过化学发光和酶联免疫吸附试验（ELISA）观察超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）的活性,丙二醛（MDA）和8异前列腺素2α（8-isoPGE2α）的水平, Western 印迹观察血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白的表达情况,采用单因素方差分析进行统计学处理。 结果 给予不同剂量的UVB照射,细胞增殖活性（A490）呈剂量依赖性降低。氢气后处理和预处理组细胞增殖活性明显高于相应UVB组（均P < 0.05）。氢气后、预处理组SOD和CAT活性以及HO-1蛋白表达水平明显高于UVB组（均P < 0.05）,但MDA和8-iso-PGE2α明显低于UVB组（均P < 0.05）。 结论 氢气可以减轻UVB诱发的成纤维细胞氧化损伤。     

自噬促进剂西罗莫司对中波紫外线诱导成纤维细胞提早衰老的影响

【摘要】 目的 研究自噬促进剂西罗莫司对反复亚毒性中波紫外线诱导提早衰老（UVB-SIPS）的影响。方法 人皮肤成纤维细胞分为6组,对照组、10 mg/L西罗莫司组、UVB组、UVB + 0.1 mg/L西罗莫司组、UVB + 1.0 mg/L西罗莫司组、UVB + 10.0 mg/L西罗莫司组。UVB照射剂量10 mJ/cm2每日1次共5次,对照组用含1%小牛血清的DMEM培养基培养5 d;西罗莫司组在每次换液后加入西罗莫司;西罗莫司 + UVB组在每次照射UVB后加入西罗莫司过夜。CCK-8检测细胞活性,β半乳糖苷酶化学染色法检测衰老细胞,吖啶橙染色检测细胞自噬,Western印迹检测衰老相关分子信号p53及自噬相关蛋白LC3-B及beclin 1的表达水平。数据用SPSS 16.0软件分析,多组间均数行单因素方差分析,结合t检验和LSD法。 结果 UVB + 0.1、1.0、10 mg/L西罗莫司组的细胞活性（A450值）分别为0.27 ± 0.02、0.36 ± 0.04、0.39 ± 0.04,呈浓度依赖性升高,与UVB组（0.26 ± 0.01）比较,差异均有统计学意义（均P ＜ 0．05）;3个组β半乳糖苷酶染色阳性细胞分别为92.50% ± 0.34%、42.40% ± 0.53%、6.20% ± 0.39%,与UVB组（95.10% ± 0.32%）比较,差异均有统计学意义（P ＜ 0．05）;3组吖啶橙染色荧光定量分别为36.43 ± 0.24、45.25 ± 0.33、48.69 ± 0.37,与UVB组（33.99 ± 0.32）比较,差异均有统计学意义（P ＜ 0．05 ）;3组p53、LC3-B及 beclin 1的表达与UVB组比较,差异均有统计学意义（P ＜ 0．05）。 结论 自噬促进剂西罗莫司在提高细胞自噬率的同时,可抑制UVB诱导的成纤维细胞提早衰老。 【关键词】 成纤维细胞; 细胞衰老; 紫外线; 西罗莫司; 自噬