香烟烟雾提取物对气道上皮细胞粘附迁移的影响及其机制研究

目的： 研究香烟烟雾提取物（CSE）对气道上皮细胞粘附迁移的影响及其作用机制。方法：利用不同浓度的CSE刺激气道上皮细胞观察其粘附迁移情况，以RT-PCR和Western blotting分别检测CSE对气道上皮细胞FIP200（FAK-family interacting protein of 200 kD） mRNA和FIP200蛋白表达水平的影响。结果：CSE干预的气道上皮细胞粘附率和迁移速度均明显降低，FIP200 mRNA和蛋白表达水平显著增高，而且这些变化均随CSE浓度的增大而增大；气道上皮细胞FIP200 mRNA和蛋白表达水平的增高与气道上皮细胞粘附迁移的降低呈显著正相关。结论：CSE显著抑制气道上皮细胞的粘附和迁移，FIP200的高表达及FIP200对FAK的抑制可能是其作用机制之一。     

An evaluation of the suitability,readability, and quality of online resources for the self-management of depression

Objective

To evaluate online depression self-management (SM) resources based on their readability, suitability, and quality to determine their appropriateness for use by patients.

烟雾与弹性蛋白酶联合应用对兔阻塞性肺气肿形成的影响

目的探讨烟雾与弹性蛋白酶联合应用对兔阻塞性肺气肿形成过程中肺功能和组织结构的影响.方法将48只新西兰大白兔随机分为吸烟组、注酶组、联合组及对照组,分别给予香烟熏吸、气管内注入猪胰弹性蛋白酶或生理盐水.7周后进行肺功能、动脉血气和肺组织学检查. 结果注酶组和联合组的潮气量(VT)、0.3s用力呼气容积(FEV0.3)、FEV0.3/FVC(用力肺活量)、PaO2、平均肺泡数(Na)和肺泡隔面密度(Ds)减少,功能残气量(FRC)、PaCO2、肺总容积(TLC)和肺泡直径(Da)增加,与对照组比较,差异有显著性(P＜0.05,P＜0.01),而吸烟组变化不明显(P>0.05).联合组肉眼及光镜下可见有明显阻塞性肺气肿表现,注酶组有轻度肺气肿变化,吸烟组无明显变化.结论烟雾可强化弹性蛋白酶的作用,二者联合应用可加快兔肺气肿的诱导过程.     

香烟烟雾暴露对支气管哮喘大鼠CD4+ CD25+调节性T细胞及转录因子Foxp3表达的影响

目的 探讨香烟烟雾暴露对支气管哮喘(简称哮喘)大鼠CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)数量及转录因子Foxp3表达的影响.方法 将40只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为生理盐水组、烟雾暴露组、哮喘组和哮喘+烟雾暴露组,每组10只;哮喘组采用卵清白蛋白(OVA)致敏并吸入激发制备哮喘模型,生理盐水组雾化生理盐水,烟雾暴露组采用吸入香烟烟雾,哮喘+烟雾暴露组于每日雾化激发OVA前给予香烟烟雾吸入.流式细胞仪检测外周血CD4+ CD25+Treg细胞占CD4+T细胞的比例,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血和肺组织γ干扰素(INF-γ)以及白细胞介素4(IL-4)含量;Western blot检测肺组织Foxp3蛋白表达水平.结果 (1)哮喘组大鼠CD4+CD25+Treg为(6.4±1.0)%,低于生理盐水组的(9.9±1.0)%,差异有统计学意义(F=92.59,P＜0.01);哮喘+烟雾暴露组为(3.3±0.8)%,低于生理盐水组和哮喘组,差异有统计学意义(F=92.59,P＜0.01).(2)哮喘组大鼠血浆和肺组织中IL-4含量[(22.6±4.3)ng/L、(0.8±0.1)ng/L]高于生理盐水组[(11.4±2.9)ng/L、(0.3±0.1)ng/L],差异有统计学意义(F值分别31.69和49.29,P＜0.01);哮喘+烟雾暴露组血浆和肺组织中IL-4含量[(34.1±6.1)ng/L、(1.4±0.3)ng/L]高于生理盐水组和哮喘组,差异有统计学意义(F值分别为31.69和49.29,P＜0.05);哮喘组血浆中INF-γ含量[(59±20)ng/L]低于生理盐水组[(151±56)ng/L],差异有统计学意义(F=21.83,P＜0.05),哮喘+烟雾暴露组INF-γ含量[(10±3)ng/L]低于生理盐水组和哮喘组,差异有统计学意义(F=21.83,P＜0.05).(3)哮喘组Foxp3蛋白表达为8.18±0.26,低于生理盐水组的10.27±0.33(F=43.33,P＜0.01);哮喘+烟雾暴露组为6.36±0.38,低于生理盐水组和哮喘组(F=43.33,P＜0.05).结论 香烟烟雾暴露可能通过下调CD4+CD25+Treg数量并抑制Foxp3蛋白表达,进一步加重哮喘的Th1/Th2失衡.     

分泌型白细胞蛋白酶抑制剂对香烟烟雾提取物诱导人支气管上皮细胞炎症介质表达的影响

目的 检测分泌型白细胞蛋白酶抑制剂(SLPI)对香烟烟雾提取物(CSE)诱导体外培育的正常人支气管上皮细胞(NHBE)炎症介质表达水平的影响,探讨SLPI对慢性气道炎症局部保护作用的机制.方法 实验设对照组、CSE组、SLPI组和SLPI+CSE组,均采用免疫细胞化学方法检测NHBE细胞中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白的表达,采用酶联免疫吸附试验检测各组培养上清液中白细胞介素8(IL-8)的表达.应用SPSS 11.5软件进行统计学处理,多样本均数比较采用单因素方差分析和SNK检验,若方差不齐进行校正,P<0.05为差异有统计学意义.结果 对照组能少量表达MMP-9(积分值为3.1±0.5)和IL-8[(4.9±0.6)ng/L];用CSE干预NHBE细胞能诱导MMP-9和IL-8的表达,且在一定范围内与CSE干预时间呈依赖性,24 h达峰值,MMP-9积分值和IL-8浓度分别为6.6±0.4和(17.7±1.9)ng/L,随后呈明显下降趋势;用SLPI干预NHBE细胞能明显抑制MMP-9(积分值为0.8±0.5)和IL-8[(0.7±0.6)ng/L]的表达.结论 SLPI能抑制CSE诱导的NHBE细胞的MMP-9和IL-8表达.     

妊娠早期环境有害因素的暴露与胚胎停育

目的：研究妊娠妇女在妊娠早期环境有害因素的暴露情况与胚胎停育之间的关系,从生活习惯及暴露环境的角度探讨影响胚胎生长发育的可能危险因素。方法：收集2009年4月—2010年4月天津市4家综合性医院计划生育门诊的胚胎停育新发病例,选取同期正常妊娠要求终止妊娠行人工流产术者作为对照,由统一培训的调查员进行问卷调查,收集其妊娠期及妊娠前3个月生活习惯及环境有害物质的暴露情况。对问卷调查表进行统计学分析,通过卡方检验、多元线性回归、Logistic回归探讨胚胎停育的可能环境危险因素及其危险度的大小。结果：妊娠妇女在妊娠期经常做饭、户外交通时间过长、妊娠早期家庭装修、其配偶于妊娠前3个月接触油漆涂料等物质均可能对胚胎发育有不良影响,而学历较高的妊娠妇女发生胚胎停育的危险性相对较低。结论：妊娠早期暴露于交通、烹调及装修产生的环境有害物质对胚胎的正常发育有潜在的威胁。     

腔镜甲状腺手术的暴露技巧

目的:探讨完全腔镜甲状腺手术的暴露技巧及术中烟雾的处理技巧。方法:回顾分析76例完全腔镜甲状腺手术患者的临床资料,总结术中视野暴露技巧及烟雾处理技巧。结果:74例成功完成腔镜手术,成功率97.4%;2例中转开放手术。手术时间1.4~5.1 h,平均(2.5±0.7)h;病理结果示甲状腺乳头状癌12例,2例伴淋巴结转移,1例隐匿性癌,8例甲状腺腺瘤,余者均为结节性甲状腺肿。36例行双侧切除术,25例行单侧切除术,13例行单纯肿物切除术。术后平均住院(1.55±0.6)d,术后引流量平均(45±5)ml/d。结论:术者巧妙应用手术工具、熟练掌握视野暴露及烟雾处理技巧,术中可创造良好的手术视野,节省操作时间。     

香烟提出物对被动吸烟大鼠肺泡巨噬细胞源性明胶酶的表达和酶活性的影响

目的： 探讨香烟烟雾对被动吸烟大鼠肺泡巨噬细胞源性明胶酶A（MMP-2）和明胶酶B（MMP-9）表达及酶活性的影响。 方法： 复制被动吸烟大鼠模型，从其支气管肺泡灌洗液(BALF)中分离与培养大鼠肺泡巨噬细胞（AM），经Giemsa染色法鉴定，以台盼蓝染色计数和检测其活性；制备香烟提出物（CSM），刺激培养的AM。以半定量RT-PCR法检测MMP-2、MMP-9 mRNA表达水平；以明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9酶活性水平。 结果： 以0%、1%、3%、5%、10%、15%CSM刺激AM时，MMP-9和β-actin mRNA灰密度值比分别为：0.095±0.006、0.215±0.018、0.468±0.038、0.837±0.047、0.159±0.028、0.092±0.002；而MMP-2和β-actin mRNA灰密度值比分别为：0.109±0.023、0.176±0.036、0.317±0.024、0.370±0.051、0.274±0.025、0.087±0.005。MMP-2酶活性的相对灰密度值分别为 6 007.83±147.39、38 202.00±3 160.40、70 532.00±3 225.18、90 074.00±925.62、70 070.17±2 060.33、17 487.67±2 060.33；MMP-9酶活性的相对灰密度值分别为 10 904.67±1 697.00、52 627.83±3 974.05、95 284.83±3 098.89、103 400.50±3 441.30、94 650.33±3 825.08、27 571.17±2 129.48。组间均存在显著差异（P<0.05）。 结论： 香烟烟雾可诱导AM源性MMP-2和MMP-9 mRNA的表达，并导致其酶活性升高；AM及其分泌的明胶酶活性异常可能在吸烟相关的COPD中起重要作用。     

熏香烟加气管注内毒素和单纯熏香烟法建立大鼠COPD模型

目的:模拟人类吸烟及反复呼吸道感染可导致慢性阻塞性肺病(COPD)的过程,采用熏香烟加气管注内毒素和单纯熏香烟法复制大鼠COPD模型,比较两种方法复制COPD模型的效果。方法:48只Wistar大鼠随机分为①健康对照组(对照I组饲养4周;对照II组,饲养3个月);②模型I组:分别于第(1、14)d经气管注入内毒素200μg,熏5%香烟(第1d、14d除外),0.5h/d,共28d;③模型II组:单纯熏5%香烟0.5h/d,共3个月。测定各组肺功能及血气。HE染色及三联染色,并与COPD尸检支气管肺组织病理所见对比。生化法测定支气管肺组织羟脯氨酸含量,测量小支气管上皮层、固有膜层及平滑肌层截面积,支气管粘膜下层淋巴细胞及肺泡区巨噬细胞计数。结果:病理观察示两模型组支气管肺组织病变与COPD患者尸检所见相符,但程度较轻。三联染色示两模型组气道壁胶原沉积显著多于对照组,模型II组较模型I组略少;两模型组上皮层及平滑肌层截面积显著大于对照组(P＜0.01或P＜0.05),FEV_0.3/FVC%显著低于对照组(P＜0.01或P＜0.05),模型I组吸气及呼气阻力显著高于对照组(P＜0.05),模型II组分钟通气量则显著低于对照组(P＜0.01);两模型组PaCO₂显著高于对照组(P＜0.01及P＜0.05),模型I组PaO₂及SaO₂显著低于对照组(P＜0.01及P＜0.05);两模型组支气管肺组织羟脯氨酸含量显著高于对照组(P＜0.05),其与各自FEV_0.3/FVC%呈负相关(r＝-0.8983及r＝-0.6521;均P＜0.01),与模型I组吸气阻力及与呼气阻力呈显著正相关(r分别为0.6468及0.7597,P＜0.05及P＜0.01)。结论:熏香烟加气管注内毒素及较长期单纯熏香烟,可复制较理想的COPD大鼠模型,其病理改变与COPD尸检所见基本相符。单纯熏香烟组气流阻塞与熏香烟加气管注内毒素组无显著性差异。