补肾中药对自然衰老雄性大鼠骨髓微环境中Smad1基因表达的影响

目的:研究补肾中药对自然衰老雄性大鼠骨髓微环境中Smad1基因表达的影响。方法:以12月龄自然衰老雄性大鼠60只为模型,随机分为两组,每组30只。自鼠龄12月龄始,分别给予生理盐水、补肾方(密骨胶囊)灌胃,在给药8、16、24w末三个时间点,各时间点每组各取10只大鼠,取股骨骨髓,Trizol法抽提总RNA,RT-PCR技术半定量检测Smad1基因表达,采用天能GIS凝胶图像处理系统分析各组表达灰度值。结果:补肾方组大鼠骨髓微环境中Smad1基因表达明显优于生理盐水组。在8、16、24w末,补肾方组与生理盐水组的基因表达灰度值分别为0.61(95% CI=0.41,0.83)VS0.76(95% CI=0.56,0.98)、0.97(95% CI=0.81,1.13)VS0.61(95% CI=0.45,0.78)、1.75(95% CI=1.59,1.92)VS0.56(95% CI=0.40,0.73)。两组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:补肾中药(密骨胶囊)可以上调骨髓微环境中Smad1基因表达水平,可能是其促骨形成、修复骨损伤作用的分子机制之一。     

补肾中药对自然衰老雄性大鼠骨髓微环境中Smadl基因表达的影响

目的：研究补肾中药对自然衰老雄性大鼠骨髓微环境中Smadl基因表达的影响。方法：以12月龄自然衰老雄性大鼠60只为模型，随机分为两组，每组30只。自鼠龄12月龄始，分别给予生理盐水、补肾方（密骨胶囊）灌胃，在给药8、16、24w末三个时间点，各时间点每组各取10只大鼠，取股骨骨髓，Trizol法抽提总RNA，RT—PCR技术半定量检测Smadl基因表达，采用天能GIS凝胶图像处理系统分析各组表达灰度值。结果：补肾方组大鼠骨髓微环境中Smadl基因表达明显优于生理盐水组。在8、16、24w末，补肾方组与生理盐水组的基因表达灰度值分别为0．61（95％CI=0．41，0．83）VS0．76（95％CI=0．56，0．98）、0．97（95％CI=0．81，1．13）VS0．61（95％CI=0．45，0．78）、1．75（95％CI=1．59，1．92）Vs0．56（95％CI=0．40，0．73）。两组间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：补肾中药（密骨胶囊）可以上调骨髓微环境中Smadl基因表达水平，可能是其促骨形成、修复骨损伤作用的分子机制之一。     

丹皮酚通过调节Wnt途径对强直性脊柱炎小鼠疗效及滑膜组织中RANKL和Smadl水平的影响

目的分析丹皮酚对强直性脊柱炎(AS)小鼠治疗疗效及对Wnt通路与RANKL和Smadl水平的影响。方法取100只小鼠随机分为模型组、阳性药物组、空白组、丹皮酚组;除空白组外,其余三组均使用100μl蛋白聚糖+100μl弗氏完全佐剂建立强直性脊柱炎模型;造模成功后开始给药,阳性药物组给予柳氮磺吡啶9 mg/kg进行灌胃,丹皮酚组给与丹皮酚3 mg/kg进行灌胃,模型组及空白组给予等体积的蒸馏水。各组每天给药1次,连续进行20 d。在造模前及造模后每一周对小鼠的后足关节炎体征进行评分;采集所有小鼠关节滑膜细胞,采用PCR法检测细胞中RANKL、Smadl水平;采用Westernblot法检测细胞中碱性磷酸酶(ALP)、骨谷氨酸蛋白(BGP)、DKK1、Wnt5a水平。结果造模后模型组、阳性药物组、丹皮酚组小鼠关节炎症评分无显著差异(P>0.05),但均高于空白组(P<0.05);治疗1周、治疗2周及治疗3周时阳性药物组及丹皮酚组小鼠后足关节炎体征评分均明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,模型组小鼠RANK、Smadl、Wnt5a水平均高于空白组,ALP、BGP、DKK1水平低于空白组(均P<0.05);阳性药物组、丹皮酚组小鼠RANK、Smadl、Wnt5a水平均明显低于模型组,滑膜细胞中ALP、BGP、DKK1水平明显高于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05);阳性药物组与丹皮酚组小鼠各指标比较无显著差异(P>0.05)。结论采用丹皮酚对AS小鼠治疗后可有效改善小鼠后足炎症评分,并可有效调节Wnt通路,降低滑膜组织中RANKL及Smadl水平。     

骨形成蛋白-2在结肠癌中的表达及意义

目的研究骨形成蛋白-2（BMP-2）在结肠癌中表达及其与临床病理参数间的关系。方法选取结肠癌标本30例作为肿瘤组，正常结肠黏膜标本15例作为对照组，运用免疫组化法检测肠黏膜组织中BMP-2和Smad蛋白表达。结果BMP-2在正常结肠黏膜中和结肠癌组织的阳性表达率分别为100％（15／15）和53．33％（16／30），两组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）；Smad1在正常结肠黏膜和结肠癌组织的阳性表达率分别为100％（15／15）和50％（15／30），两组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）；BMP-2和Smad1在结肠癌中的表达之间无相关性（P〉0．05）；BMP-2和Smad1的表达与患者年龄、性别、有无淋巴结转移和有无远处转移无相关性（P〉0．05）。结论BMP-2和Smad1蛋白存在于正常结肠黏膜组织中，BMP-2和Smad1蛋白表达的改变可能参与结肠癌发生发展过程。BMP-2和Smad1蛋白可能与结肠癌细胞生物学行为无关。     

BMP-2及Smad1在兔下颌骨垂直牵张中的表达和意义

目的：观察BMP-2及其信号传导分子Smad1在兔下颌骨垂直牵张后新骨组织中的分布和表达,探讨其在新骨形成中的作用。方法：36只兔子随机分成6组,用自制的种植型牵张器对兔下颌骨垂直牵张,以1mm/天的速度牵张4天,分别于牵后第1天、1周、2周、4周、6周取材,6只作为正常对照组。用ABC免疫组织化学法,检测兔下颌骨垂直牵张过程中不同时期BMP-2及Smad1的表达与分布。结果：免疫组化观察,牵张结束后BMP-2及Smad1阳性信号主要在间充质细胞和新生骨小梁边缘的成骨细胞表达,表达高峰在牵张后1周,以后逐渐下降,牵张后4周在骨细胞微弱表达,6周时无表达。正常对照组无表达。结论：BMP-2及Smad1/5参与兔下颌骨垂直牵张过程,并在牵张成骨的早期起作用;Smad1/5可能介导了BMP-2在牵张成骨中的信号传导。     

辛伐他汀对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织BMP-2及信号转导蛋白Smad1／5表达的影响

目的:研究辛伐他汀对去卵巢(OVX)骨质疏松大鼠骨形成蛋白BMP-2及其信号转导蛋白Smad1/5表达的调节,探讨BMP-2及其信号转导蛋白Smad1/5在骨质疏松发病机制中的作用机制及辛伐他汀对其调节作用.方法:54只3个月龄雌性SD大鼠,随机分成3组,实验组、对照组、模型组,每组18只.适应性喂养1周后进行手术,术后8周开始给药,实验组给予辛伐他汀5 mg/(kg·d)灌胃,其余2组用等量生理盐水灌胃.用药后第4周每组随机处死半数大鼠,12周后处死剩余大鼠,分离胫骨,免疫组化检测胫骨干骺端BMP-2及其信号转导蛋白Smad1/5的表达.结果:①用药4周,大鼠胫骨干骺端BMP-2表达:实验组、对照组较模型组增加(P＜0.05或P＜0.01);②用药12周,大鼠胫骨干骺端BMP-2表达、Smad1/5表达:实验组、对照组较模型组增加(P＜0.05或P＜0.01);③用药12周较4周,实验组Smad1/5表达明显增加(P＜0.01).结论:BMP-2及信号转导蛋白Smad1/5表达水平的下调可能是原发性骨质疏松发生的重要机制,辛伐他汀能上调BMP-2的表达,长期用药能促进信号转导蛋白Smads1/5的表达,可能与其防治绝经后骨质疏松症的作用机制有关.     

密骨胶囊对自然衰老雄性大鼠骨髓Smadl、Smad5、Smad6基因表达的影响

目的研究密骨胶囊对自然衰老雄性大鼠股骨骨髓中Smadl、Smad5、Smad6基因表达的影响。方法取12月龄自然衰老SD雄性大鼠100只随机分为2组,每组50只。自鼠龄12月龄始,分别给予生理盐水、密骨胶囊灌胃,在鼠龄14、16、18、20、22月龄时,每组各取10只大鼠,取右股骨,DEXA检测BMD,取左股骨骨髓,RT—PCR半定量检测Smadl、Smad5、Smad6基因表达。结果在14～22月龄阶段,密骨胶囊组与空白对照组相比较,密骨胶囊可维持股骨BMD（P=0．797）,上调Smadl、Smad5mRNA表达水平（P〈0．01）,下调Smad6mRNA表达水平（P〈O．01）。结论密骨胶囊可以上调股骨骨髓中Smadl、Smad5基因表达水平,下调Smad6基因表达水平,这可能是其促骨形成、修复骨损伤作用的分子机制之一。     

MiR-26a与Smad1在垂体腺瘤中的作用机制体外研究

目的探讨垂体腺瘤中miR-26a与Smad1的关系以及对垂体腺瘤细胞生长以及激素分泌的影响。方法体外培养小鼠垂体腺瘤细胞(AtT-20),转染miR-26a抑制剂(miR-26a inhibitor),实时荧光定量多聚酶链反应检测Smad1 mRNA表达情况,Western blot检测Smad1蛋白的表达,双层软琼脂克隆形成实验分析细胞增殖情况,流式细胞技术检测细胞周期,电化学发光法检测培养基中促肾上腺皮质激素(ACTH)的浓度。结果抑制miR-26a后在垂体腺瘤中Smad1基因转录的mRNA没有明显变化,Smad1翻译的蛋白量增多,细胞增殖能力降低,停留在S期的细胞比例增多,ACTH分泌量下降。结论 Smad1是miR-26a的靶基因,miR-26a通过干扰Smad1 mRNA的翻译调控Smad1。miR-26a在ACTH型垂体腺瘤的生长以及激素分泌过程中起到重要作用。