血糖稳定对大鼠脑缺血后海马神经元凋亡的影响

目的探讨血糖稳定对大鼠脑缺血所致的神经元凋亡的影响。方法将正常SD大鼠随机分为4组,假手术组(CON),全脑缺血再灌注组(I/P),血糖水平波动组(BGF)和血糖水平稳定组(BGS),水迷宫观察动物空间分辨力,使用免疫印迹技术对比研究细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的磷酸化,同时采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记方法观察神经细胞凋亡。结果大鼠全脑缺血再灌注后3h和5d时海马区磷酸化ERK1/2表达明显增加;胰岛素控制输注维持血糖变动水平在术前水平的±0.5mmol/L组时可进一步增加海马ERK1/2磷酸化;但血糖变动水平在±1.2mmol/L组ERK1/2磷酸化表达与缺血再灌注组没有明显差异。再灌注5d时大鼠水迷宫结果与脑组织凋亡一致,血糖水平稳定组脑组织凋亡较缺血组明显减轻,磷酸化ERK1/2的程度与脑组织凋亡结果相反。结论术中维持血糖稳定可能通过ERK1/2信号通路调节大鼠缺血性脑损伤所致的神经元凋亡。     

芦荟苷预处理对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的研究芦荟苷(Barb)对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支复制心肌缺血再灌注损伤模型,实验分为假手术组,缺血再灌注组(IR),Barb高、低剂量预处理组。采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡指数(AI),酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定心肌细胞肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,化学法测定线粒体Ca2+-ATPase活性。结果与IR组比较,Barb组AI和TNF-α水平显著降低(P<0.01或P<0.05),Ca2+-ATPase活性明显增高(P<0.05)。结论Barb能明显抑制IR引起的心肌细胞凋亡,其作用可能与降低TNF-α水平和提高Ca2+-ATPase活性有关。     

阿霉素对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察阿霉素对大鼠肺缺血再灌注损伤(LIRI)的保护作用及其可能的机制。方法建立大鼠在体肺缺血再灌注模型。将健康Wistar大鼠54只随机分为手术对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)、阿霉素组(A组)。每组分别在缺血45min,再灌注60、120min3个时点处死6只大鼠,留取血浆和右肺组织,测定血清丙二醛(MDA)含量、肺组织干湿质量比值(D/W)、髓过氧化物酶(MPO)活性及肺组织中细胞凋亡指数(AI),并进行肺组织病理学检查。结果再灌注期间IR组MPO活性、AI、血清MDA升高,D/W降低,而预先给予阿霉素干预后可以减弱缺血再灌注诱导上述指标的变化。肺组织病理学检查显示阿霉素预先给药减轻肺缺血再灌注损伤。结论阿霉素对肺缺血再灌注损伤有保护作用,可能与其抑制氧自由基生成、中性粒细胞浸润及细胞凋亡有关。     

离体猪肾自体全血再灌注损伤模型

缺血再灌注 (ｉｓｃｈｅｍｉａｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ,ＩＲ)肾损伤 ,在临床常见于机体处于失血或中毒性休克以及肾移植、肾部分切除、肾实质切开取石等手术的过程中。目前对ＩＲ肾损伤的研究所采用的动物模型可分为在体和离体两类。在离体研究中 ,国外多选用大鼠和猪的肾制备ＩＲ肾损伤模型 ;灌注液常用ＵＷ (Ｕｎｉ ｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷｉｓｃｏｎｓｉｎ)液和ＥＣ(Ｅｕｒｏ -Ｃｏｌｌｉｎｓ)液[1,2 ] ;但由于灌注液配制复杂、价格昂贵 ,国内在此方面的研究尚无法广泛开展。为了寻找从生物源性接近于人类的器官和既廉价又近于体内状态的…     

肌肽对大鼠失血性休克再灌注后肝组织损伤的保护作用

组织或器官在一定时间缺血缺氧后会造成损伤，血供恢复后损伤进一步加重称为缺血一再灌注损伤（IRI）。在肝外科IRI是造成术后肝功能衰竭的重要原因之一。肌肽是含组氨酸的二肽类物质的代表，因其具有抗氧化、保护膜完整性、鳌合金属离子、质子缓冲、调节巨噬细胞活性等功能，被认为是具有前景的抗缺血损伤药物。研究认为肌肽对肾脏、心脏、脑的IRI具有保护作用，但肌肽抗肝脏IRI的作用研究较少。     

大豆异黄酮对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)的机制尚未阐明,可能与活性氧(ROS)生成、细胞因子参与、肝细胞内钙离子超载、细胞凋亡等有关[1].大豆异黄酮(SI)是人们公认的抗氧化剂及抗炎药物.研究结果表明,其对心肌、脑等器官缺血再灌注损伤具有保护作用[2-3].但对HIRI是否具有保护效应,鲜见报道.本研究通过动物实验观察了SI对HIRI的保护作用.     

Omi/HtrA2抑制剂对肾脏缺血再灌注损伤诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的研究Omi/HtrA2抑制剂(UCF-101)对大鼠肾脏缺血/再灌注(I/R)损伤诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法雄性Wistar大鼠随机分为5组:假手术组(DMSO)、模型1组(I/R+R前DMSO)、模型2组(I/R+R后DMSO)、治疗1组(I/R+R前UCF-101)和治疗2组(I/R+R后UCF-101)。双侧肾动脉夹闭45min再灌注24h制作动物模型;比色法测定血清肌酐和尿素氮浓度;Western blot法检测肾组织中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3、caspase-9的蛋白质表达;原位末端标记TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡。结果肾脏缺血45min再灌注24h后,大鼠肾功能明显减退(P<0.05);肾组织中caspase-3、caspase-9蛋白质表达显著增加(P<0.05),大量肾小管上皮细胞凋亡(P<0.05)。再灌注前给予UCF-101能显著改善肾功能(P<0.05),并显著下调caspase-3、caspase-9蛋白质表达(P<0.05),减轻肾小管上皮细胞凋亡(P<0.05),而再灌注后给药不能改善肾功能及caspase-3、caspase-9蛋白质的表达(P>0.05)。结论再灌注前给予UCF-101能抑制肾脏I/R损伤诱导的肾小管上皮细胞凋亡,对肾脏I/R损伤具有保护作用。     

缺血预处理与肝脏缺血再灌注损伤的研究

目的 :观察缺血预处理对肝脏再灌注损伤的影响。方法 :通过构建正常大鼠和肝硬化大鼠肝脏 70 %的原位热缺血再灌注损伤模型 ,比较缺血预处理和无预处理组及间歇阻断肝门法对再灌注损伤的影响 ;以肝功酶、能量代谢和过氧化损伤等生物化学指标、组织学病理和细胞超微结构的形态学指标 ,观察不同预处理条件对结果的影响。结果 :各项指标显示 ,正常大鼠中 ,缺血预处理与无预处理组相比 ,可显著减轻再灌注损伤 (P <0 .0 5 ) ,与间歇性阻断肝门组相比也有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;在各个缺血预处理组内 ,缺血预处理 5min(IPC5min)组较IPC10min组和IPC5min× 2 组效果好 (P <0 .0 5 ) ,证实缺血预处理对肝硬化大鼠肝脏再灌注损伤有保护作用。结论 :缺血预处理可减轻肝脏再灌注损伤 ,并优于间歇性阻断肝门法 ,是一种应用方便、效果较好、前景广阔的阻断肝脏血供的新方法     

异甘草酸镁对大鼠肢体缺血再灌注肝损伤时磷脂酶A2的影响

目的 探讨异甘草酸镁(MI)对大鼠肢体缺血再灌注肝损伤时磷脂酶A2(PLA2)的影响.方法 选取健康、雄性、清洁级SD大鼠24只,体质量(230±30)g,随机分成3组(每组8只):对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、异甘草酸镁治疗组(MI组).C组仅麻醉,肢体没有缺血操作; I/R组于再灌注前颈外静脉注入生理盐水1 ml;MI组于再灌注前同法给异甘草酸镁30mg/kg,计1ml.以橡皮带环绕结扎大鼠左后肢根部至趾掌无血流信号达4h后放开橡皮带,再灌注6h建立大鼠后肢缺血再灌注肝损伤模型.再灌注6h后各组处死动物采集标本,分别取大鼠的血清测定ALT、AST、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK),取肝组织做10％的匀浆,采用硫代巴比妥酸法测匀浆及血清的丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)值,采用酶联免疫法测匀浆及血清PLA2、肿瘤坏死因子α(TNF α),电镜观察肝组织的超微结构改变.结果 (1)C组肝匀浆PLA2、TNFα、MDA、MPO分别为(74.1± 3.1)μg/g、(152.4±7.9)ng/g、(2.02±0.16)nmol/g、(0.20±0.03)活力单位/g；血清PLA2、TNFα、MDA、MPO分别为(80.3±3.9)μg/L、(121.7± 6.6) ng/L、(4.89±0.64) nmol/ml、(65.62±8.33)活力单位/ml; I/R组肝匀浆PLA2、TNFα、MDA、MPO分别为(94.83±21.99)μg/g、(361.3±46.6)ng/g、(3.038±0.391)nmol/g、(0.422±0.062)活力单位/g;血清PLA2、TNFα、MDA、MPO分别为(118.4±9.3) μg/L、(152.7±15.7) ng/L、(7.30±0.73) nmol/ml、(94.83±21.99)活力单位/ml;MI组肝匀浆PLA2、TNFα、MDA、MFO分别为(84.3±5.8) μg/g、(314.4±13.9)ng/g、(2.49±0.07) nmool/g、(0.31±0.05)活力单位/g ;血清PLA2、TNFα、MDA、MPO分别为(96.0±4.4) μg/L、(137.0±5.5) ng/L、(5.61±0.36) nmol/ml、(74.26±5.81)活力单位/ml,与C组比较,I/R组肝匀浆及血清PLA2、TNFα、MDA、MPO均升高,t值分别为10.743、12.504、5.458、8.939和12.303、5.154、7.019、3.513,P值均＜0.01,差异有统计学意义.与I/R组比较,MI组肝匀浆及血清PLA2、TNFα、MDA、MPO均降低,t值分别为6.170、2.726、3.409、3.946和6.543、2.676、5.926、2.558,P值均＜0.05,差异有统计学意义.(2)C组血清中ALT、AST、CK、LDH分别为(64.0±8.9)U/L、(113.4±18.2) U/L、(286.5±26.5) U/L、(190.8±39.0) U/L;I/R组分别为(381.0±133.8) U/L、(1227.0±383.8)U/L、(3944.9±552.0)U/L、(3050.0±833.3)U/L; MI组分别为(205.6±68.7) U/L、(851.8±126.7)U/L、(1252.5±196.3) U/L、(1177.5±244.0)U/L,与C组比较,I/R组血清中ALT、AST、CK、LDH均明显升高,t值分别为6.687、8.197、19.188、9.376,P值均＜0.01,差异有统计学意义.与I/R组比较,MI组血清中ALT、AST、CK、LDH均明显降低,t值分别为3.298、2.626、12.998、6.100,P值均＜0.05,差异有统计学意义.(3)电镜下组织超微结构I/R组中肝组织损伤明显,而用MI组肝组织的损伤明显减轻. 结论 异甘草酸镁能够通过降低PLA2和TNFα生成而减少炎症介质的释放、抑制氧自由基代谢产物MDA的产生和减少MPO的活性,对肢体缺血再灌注过程中的肝损伤有一定的保护作用.     

IGF-1对大鼠局灶性脑损伤c-fos表达的影响

目的研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后c-fos表达的影响及与缺血时间关系,探讨IGF-1对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法制作SD大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。将55只SD雄性大鼠随机分为假手术组(n=5)、对照组(n=25)、IGF-1治疗组(n=25),其中后2组按缺血再灌时间(6h、12h、1d、3d、7d)不同可分为5个亚组,每组5只,治疗组于缺血2h再灌注1h后经腹腔注入40μg/kg稀释为1 ml的IGF-1,假手术组及对照组同时腹腔注入生理盐水1 ml。以上动物均在再灌注后规定时间点用4%多聚甲醛经心脏灌注固定,取大鼠脑组织,应用免疫组化S-P法和HE染色检测c-fos蛋白表达及脑组织结构病理变化。结果与对照组相比,治疗组大鼠脑组织c-fos表达明显减少,神经细胞坏死程度明显减轻。结论IGF-1在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中起保护作用,其作用机制包括降低c-fos的表达,发挥神经保护作用。