雌素受体在胃癌细胞的表达和意义

目的 检测雌激素受体（ＥＲ）在胃癌的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法 应用免疫组化Ｓ－Ｐ法。结果 ＥＲ在慢浅表性胃炎、异型增生中表达均为阴性,在胃癌阳性率为４０％,三组 比较比较有显著性差异（Ｐ〈０．０５）。ＥＲ在进展期胃癌的阳性率显著高于早期胃癌（Ｐ〈０．０５）。胃癌有淋巴结转移组的阳性率显著高于无淋巴结转移组（Ｐ〈０．０５）。ＥＲ的表达在分化不良型胃癌高于分化型胃癌,但无统计学意义（Ｐ〉０     

肾上腺髓质素及其受体系统抑制溶血磷脂酸诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖

目的观察溶血磷脂酸对肾上腺髓质素及其受体系统生成的影响和肾上腺髓质素在溶血磷脂酸促进血管平滑肌细胞增殖中的作用。方法贴块法培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,H3-TdR掺入测定血管平滑肌细胞DNA合成,γ-32P-ATP标记的同位素法测定丝裂原活化蛋白激酶活性,放射免疫法测定血管平滑肌细胞中肾上腺髓质素的含量。结果溶血磷脂酸促进大鼠血管平滑肌细胞肾上腺髓质素生成,上调血管平滑肌细胞肾上腺髓质素及其受体CRLR、RAMP2和RAMP3mRNA表达;肾上腺髓质素可抑制溶血磷脂酸刺激大鼠血管平滑肌细胞3H-TdR掺入,抑制溶血磷脂酸诱导的丝裂原活化蛋白激酶激活。结论溶血磷脂酸上调血管平滑肌细胞肾上腺髓质素及其受体系统,肾上腺髓质素及其受体抑制血管平滑肌细胞增殖的作用与其抑制丝裂原活化蛋白激酶激活有关。     

EGFR反义脱氧寡核苷酸硫代修饰片段对人肝癌细胞中血管内皮生长因子mRNA表达的研究

目的：探讨表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）反义脱氧寡核苷酸硫代修饰片段对人肝癌细胞血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）基因表达的影响。方法：应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法,以次黄嘌吟磷酸核糖转移酶（hypoxanthine phosphoribosyltransferase．HPRT）为内标．分析从1．6～3．2μmol／L浓度的EGFR反义脱氧寡核苷酸硫代修饰片段在84h时对人肝癌细胞VEGF基因mRNA表达水平的影响。结果：EGFR反义脱氧寡核苷酸硫代修饰片段有明显的抑制人肝癌细胞表达VEGF的作用．且这种抑制作用随着EGFR反义脱氧寡核苷酸硫代修饰片段浓度的增高而加强。结论：EGFR反义脱氧寡核苷酸硫代修饰片段能抑制人肝癌细胞VEGF基因的表达．为肝癌的抗血管治疗提供了新的途径和方法．     

HIF-1α沉默对鼻咽癌CNE-1细胞移植瘤生长和转移的影响

目的 低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1alpha,HIF-1α)在鼻咽癌组织中存在高表达,与淋巴结转移和临床分期偏晚密切相关,是鼻咽癌患者独立的不良预后因子.前期研究显示,沉默HIF-1α可有效降低鼻咽癌CNE-1细胞的黏附和侵袭能力.本研究通过探讨沉默HIF-1α对鼻咽癌CNE-1细胞移植瘤生长和转移能力的影响,进一步为临床提供参考和实验依据.方法 采用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默鼻咽癌CNE-1细胞中HIF-1α表达,RT-PCR检测其沉默效果;15只雄性裸鼠随机分为未转染组、阴性对照组和RNAi组,每组5只.将CNE-1细胞分别接种于裸鼠右大腿外侧皮下,建立鼻咽癌CNE-1细胞裸鼠移植瘤模型,观察各组成瘤时间并记录其生长情况,待分别形成肉眼可见的肿瘤后再培养20 d.收集移植瘤组织及裸鼠两侧腹股沟淋巴结.测量移植瘤大小并计算其体积.采用HE染色,计算各组淋巴结转移率及阳性率;蛋白质印迹法检测3组移植瘤中HIF-1α、E-钙粘蛋白(E-cadherin)及CX-CR4蛋白的表达.结果 RNAi可有效沉默鼻咽癌CNE-1细胞中HIF-1α表达;成功构建了裸鼠移植瘤模型;未转染组、阴性对照组和RNAi组裸鼠成瘤时间分别为(8.3±1.2)、(7.8±1.5)和(15.6±2.1)d,差异有统计学意义,F=21.181,P=0.002;最终成瘤体积分别为(1184.4±145.8)、(1254.0±130.5)和(322.7±118.2) mm3,F=82.081,P＜0.001.淋巴结转移率及阳性率均明显降低;与未转染组及阴性对照组比较,HIF-1α(P＜0.001)和CXCR4 (P=0.001)蛋白在RNAi组中表达明显降低,而E-cadherin则明显增强,P=0.003.结论 RNAi沉默HIF-1α可有效抑制鼻咽癌CNE-1细胞移植瘤的生长和转移,其机制可能与上调E-cadherin、下调CXCR4蛋白表达有关.