斯氏狸殖吸虫感染多种动物及体内发育的研究

目的 :以不同数量斯氏狸殖吸虫囊蚴 ,分别感染大白鼠 ,小白鼠和豚鼠 ,定期解剖观察虫体。方法 :经1 5、30、45、60、75、90、1 1 0和 1 2 5d分别解剖观察虫体在实验动物体内发育 ,分布及虫体检出率。结果 :大鼠在感染 90d后虫体可以逐步发育成熟并产卵 ,而小白鼠和豚鼠体内只能查到童虫阶段。结论 :初步证实大白鼠是斯氏狸殖吸虫的适宜宿主 ,小白鼠和豚鼠体内的虫体全部处于滞育阶段 ,不能发育为成虫     

三峡库区重庆段斯氏肺吸虫病流行病学及临床研究-附58例斯氏肺吸虫病误诊原因分析

目的为了解重庆地区人群斯氏肺吸虫病流行的现状、临床表现和诊断，并分析导致其误诊的原因。方法进行肺吸虫病现场流行病学调查和收集误诊病例的临床资料。采用肺吸虫抗原皮试（IDT）和ELISA检测易感人群；检测中间宿主溪蟹的肺吸虫囊蚴携带率以及保虫宿主犬、猫的肺吸虫感染情况。结果重庆地区人群的IDT阳性率为14．36％（104／724），ELISA为21．96％（92／419），当地溪蟹的肺吸虫囊蚴携带率为4．08％，虫种鉴定为斯氏肺吸虫（Pagumogonimus skrjabini）。三峡库区的人群有生食和半生食溪蟹的习惯，且感染与职业、年龄有关，差异有统计学意义（P〈0．05）；并分析了58例斯氏肺吸虫病的误诊原因。结论重庆地区人群的肺吸虫病呈点状、散在流行，并有局部扩散流行的可能性。应加强肺吸虫病防治知识的宣传和教育，制定相应的防制措施，阻断该病在重庆地区的流行。     

福建北部地区斯氏并殖吸虫疫源地宿主感染情况分析

目的考察福建北部地区斯氏并殖吸虫中间宿主螺、蟹种群及其孳生地,比较生态环境改变前后感染率,并分析其变化原因。方法 2009-2019年,以并殖吸虫病例为线索,对福建省北部南平市的建瓯市小桥镇涤上村、东峰镇桂林村、城关镇七里街村和建阳区崇雒乡上洋村、政和县东平镇西表村、岭腰乡前溪村以及三明市的三元区居阳村等11处调查点进行现场采集螺、蟹,并考察其生态环境,设框(33 mm2)检测螺分布密度,计算螺的并殖吸虫尾蚴感染率和蟹的并殖吸虫囊蚴感染率、感染度。囊蚴采用人工感染健康犬(2只)和PCR扩增内转录间隔区2 (ITS2)序列、线粒体细胞色素氧化酶1 (CO1)基因进行鉴定。考察原孳生地生态环境的变化,复查螺、蟹的感染率、感染度,分析环境变化对感染率的影响。结果 11处调查点查见唐氏拟小豆螺、建瓯拟小豆螺和小桥拟钉螺等3种螺。山涧水源小沟或渗水湿地等微型生态环境为螺的适宜孳生地,螺多栖息于沟内水线上下5 mm的潮湿环境,主要附着于沟内潮湿的陈旧落叶、枯枝,其次为石块上,泥砂中较少。唐氏拟小豆螺、建瓯拟小豆螺和小桥拟钉螺的平均分布密度分别为156/框、179~291/框和12~266/框;各调查点均有螺查出斯氏并殖吸虫尾蚴,唐氏拟小豆螺、建瓯拟小豆螺和小桥拟钉螺的感染率分别为0.22%(4/1 851)、0.38%(36/9 420)、1.10%(102/9 247)。11处调查点查见福建华溪蟹、福建博特溪蟹、角肢华南溪蟹和待定种华南溪蟹等4种溪蟹。溪蟹多栖息于水流缓慢的山涧,白天潜伏于石块下,夜间四出觅食。溪蟹的斯氏并殖吸虫囊蚴感染率为38.99%~96.77%,平均感染率为80.21%(231/288),平均感染度为19.8个囊蚴/蟹。PCR结果显示,囊蚴样品扩增出的ITS2序列约500 bp,与GenBank中斯氏并殖吸虫相似性为99%;CO1基因序列约450 bp,与GenBank中宫崎并殖吸虫相似性为100%。人工感染实验结果显示,2只感染犬解剖后分别获得6和8条成虫,经鉴定均为斯氏并殖吸虫。孳生地环境改变有山洪暴发、垦植、干旱和人为破坏等原因,孳生地环境改变后对11处19次复查中,有10次未采集到螺,有5次未采集到蟹。5个调查点孳生地环境变化为山洪暴发所致,灾后进行7次调查均未查见螺,其中3处未查见溪蟹。11处调查点孳生地环境改变后,蟹的斯氏并殖吸虫囊蚴感染率为36.11%(91/252),平均感染度为4.9个囊蚴/蟹。孳生地环境改变前后的感染率差异具统计学意义(P<0.05)。结论福建北部建瓯等地为斯氏并殖吸虫高度感染的自然疫源地。孳生地生态环境改变后螺、蟹斯氏并殖吸虫尾蚴/囊蚴感染率下降明显,其中山洪暴发和垦植等是影响螺、蟹感染率下降的主要因素。     

斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段的克隆和序列分析

目的　克隆斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,并对其进行测序和序列分析。方法　利用简并引物 ,进行RT PCR ,扩增斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段。TA克隆装入pUCm T载体 ,进行鉴定、测序 ;利用DNASIS程序推导其所编码的氨基酸序列 ,并与相关虫种半胱氨酸蛋白酶进行氨基酸序列的同源性分析。结果　RT PCR扩增出了一约5 0 0bp的cDNA片段 ,对阳性克隆测序后获得其核酸序列 ,长 4 95bp。将推导的氨基酸序列作同源性分析显示 ,该序列与相关虫种半胱氨酸蛋白酶存在着较高的同源性 ,组成半胱氨酸催化三联体的半胱氨酸、组胺酸和天冬酰胺残基高度保守。结论　克隆获得了斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,该片段包含了与半胱氨酸蛋白酶活性和空间结构相关的重要基因位点。     

日本血吸虫和斯氏狸殖吸虫的cox1遗传多态性研究

目的分析日本血吸虫和斯氏狸殖吸虫线粒体cox1基因的遗传多态性。方法检获日本血吸虫和三峡库区上下游流行区斯氏狸殖吸虫样本,提取其细胞DNA,PCR特异性扩增线粒体cox1基因并测序;分别用Clusterx和DNAsis软件对两虫种线粒体cox1基因片段进行序列的变异分析和转录因子基因序列分析。结果PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳,日本血吸虫与斯氏狸殖吸虫cox1基因片段大小分别为445 bp和418 bp。两虫种cox1基因序列有138位碱基相同,占斯氏狸殖吸虫cox1碱基的33.01%。两虫种cox1基因包含的转录因子基因序列全部相同,均为12种,18个。结论日本血吸虫和斯氏狸殖吸虫在基因水平上存在明显差异,但在遗传进化上具有明显的相似性,从基因水平上证明了两虫种存在交叉抗原的可能性。     

斯氏狸殖吸虫卵黄细胞发育的透射电镜研究

本文描述了斯氏狸殖吸虫卵黄细胞四期发育的超微结构形态特征。卵黄细胞由第一期发育至第四期的过程中,外形由不规则而变为圆形。卵黄滴在第三期卵黄细胞的发育中形成,并沿细胞的边缘分布。高尔基氏复合体存在。粗面内质网逐惭丰富至是网络状并与核外膜相联,而至细胞成熟时又明显减少。核糖体复合物在卵黄细胞第四期的早期极为丰富,糖原颗粒在成熟的卵黄细胞中也大量增加。而当卵黄细胞退化时,这些细胞器也随之逐渐消失。并揭示成熟的卵黄细胞不仅释放卵黄滴中的颗粒球以供制造卵壳物质,而且还提供营养以助胚胎发育。     

鄂西北斯氏并殖吸虫第二中间宿主自然感染情况的监测

目的调查斯氏并殖吸虫第二中间宿主孳生环境及自然感染情况的变化并对其影响因素进行分析。方法调查收集部分县（市）斯氏并殖吸虫自然疫源地中间宿主溪蟹及动物宿主自然感染情况,观察和分析人类行为、局部环境的改变对中间宿主孳生、感染的影响。结果调查显示环境因素、人类行为对斯氏并殖吸虫疫源地、第二中间宿主溪蟹孳生和囊蚴自然感染有明显的影响,平均感染率由1985—1995年的17．08％降为1996～2007年的5．96％。结论生态环境改变和人类的行为直接影响了野生动物的活动范围及中间宿主的孳生,导致中间宿主囊蚴的感染率逐渐降低。但随着退耕还林实施,生态环境的改善,有利于中间宿主螺和溪蟹的孳生和繁殖,可能形成新的疫源地。溪流中蟹类肺吸虫囊蚴感染可能随之加重,人群感染肺吸虫的机会也可能随之增加。     

鄂西北十堰市斯氏狸殖吸虫病的分布及流行趋势分析

目的了解十堰地区斯氏狸殖吸虫病的分布及流行趋势,为制定防治策略提供科学依据。方法流行区采获溪蟹镜检囊蚴,检查动物体内斯氏狸殖吸虫的感染情况,收集既往资料与现场肺吸虫抗原和酶联免疫吸附试验调查的数据作统计,分析人群肺吸虫感染情况。观察人类行为、局部环境的改变对中间宿主孳生的影响。结果环境因素、特别是人类的行为对肺吸虫中间宿主的孳生有较大的影响,局部流行的区域已不具备中间宿主孳生所需的环境,水位的提升可形成更多的溪沟和山涧,有利于螺和溪蟹的孳生。调查显示人群感染率为23.37%,经防治人群肺吸虫和中间宿主囊蚴感染率都有较大幅度降低。结论鄂西北地区作为斯氏肺吸虫病的流行区,原有的部分斯氏狸殖吸虫第二中间宿主孳生环境己发生了改变,动物宿主肺吸虫囊蚴的感染率及人群感染率呈现逐渐下降的趋势。同时随着退耕还林的实施,区域生态环境将得到进一步改善,适合中间宿主的繁殖和野生动物的活动,肺吸虫病的疫源地也将会长期存在。     

感染斯氏狸殖吸虫大鼠IL-4、IL-6、TSLP、TGF-β1水平检测

目的研究斯氏狸殖吸虫感染引起的SD大鼠Th2免疫反应产生的细胞因子IL-4、IL-6、TSLP、TGF-β1水平,探寻寄生虫感染所致大鼠细胞免疫反应情况。方法用斯氏狸殖吸虫囊蚴感染SD大鼠5只,于感染后16周对其血清进行IL-4、IL-6、TSLP、TGF-β1的ELISA检测。结果 IL-4、TSLP、TGF-β1无显著变化,分别为0.34 pg/ml、8.69 pg/ml、2 06681.86 pg/ml(P0.05),IL-6显著升高到40.45 pg/ml,具有统计学意义(P0.05)。结论感染SD大鼠Th2免疫反应活化,IL-6表达显著上调。     

鄂西北斯氏狸殖吸虫中间宿主生态学的研究

目的调查分析鄂西北生态环境对斯氏狸殖吸虫中间宿主密度和感染度的影响。方法定期对中间宿主孳生环境和中间宿主的密度观察，并解剖检查中间宿主自然感染情况。结果斯氏狸殖吸虫第一中间宿主拟钉螺和第二中间宿主华溪蟹的密度受水温、气温和雨量影响明显，5—10月螺与蟹的密度达高峰，其密度螺为95，蟹为22。11月至次年3月螺与蟹密度最低，皆不易捕捉。结论鄂西北是斯氏狸殖吸虫病的流行区，中间宿主孽生环境的改变对该地区斯氏狸殖吸虫病的流行有重要意义。