朝鲜淫羊藿酸性多糖的理化特性及对HepG2细胞脂质堆积的改善作用＊

目的 对比研究朝鲜淫羊藿酸性多糖酯化还原前后的理化特性，并探讨其改善油酸诱导的肝癌HepG2细胞脂质堆积活性的差异。方法 采用高效凝胶渗透色谱法测定朝鲜淫羊藿酸性多糖（EFPA）的均一性和分子量，高效液相色谱法测定EFPA和酯化还原后朝鲜淫羊藿酸性多糖（EFPA-R）的单糖组成；采用油酸（OA）处理HepG2细胞诱导建立脂质蓄积模型，不同浓度EFPA与EFPA-R（10、30、100、300 μg·mL^-1）分别和OA共同作用于细胞24 h，采用CCK-8试剂盒测定细胞存活率，油红O染色观察细胞内脂滴蓄积情况，并采用试剂盒测定细胞内总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）含量。结果 EFPA为成分均一的多糖组分，分子量为125.8 kDa，由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、葡萄糖醛酸和阿拉伯糖组成，摩尔比为1.7∶7.4∶1.4∶1.8∶1.0，葡萄糖占比最大，EFPA-R由甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成，摩尔比为0.8∶10.6∶2.1∶1.0；在10-300 μg·mL^-1范围内，EFPA和EFPA-R对HepG2细胞的抑制作用较弱，作为给药浓度；与空白组相比，模型组细胞中TC、TG含量显著升高（P < 0.01），细胞内红色脂滴显著增多，与模型组相比，EFPA可显著降低细胞中TC、TG含量（P < 0.01），明显减少细胞内红色脂滴（P < 0.05或P < 0.01），EFPA-R干预后细胞则无明显变化。结论 EFPA可明显改善HepG2细胞脂质堆积情况，且呈现剂量依赖性，而半乳糖醛酸（GalA）的存在可能是其抑制HepG2细胞脂质蓄积的关键因素。     

箭叶淫羊藿叶水提取液抗心律失常作用的研究

目的：了解箭叶淫羊藿叶（Epimedium Breuicornum Maxin EBM)水提取液的抗心律失常作用。方法：常规抗心律失常的方法。结果：箭叶淫羊藿叶水提取液对氯仿诱发的小鼠室颤，氯化钙诱发的大鼠室颤均有明显的预防作用，对乌头碱诱发的大鼠心律失常有明显的治疗效果。但不能对抗肾上腺素诱发的家兔心律失常。箭叶淫羊藿叶水提取液可降低蟾蜍离体坐骨神经动作电位。结论：提示箭叶淫羊藿叶水提取液抗心律失常作用可能与其抑制Na^ ,Ca^2 内流有关。进一步提示箭叶淫羊藿叶水提取液抗心律失常作用可能与其抑制Na^ ，内流有关。而与阻断β－肾上腺素受体无关。     

三种淫羊藿的总黄酮分极提取物对小鼠免疫功能的影响

观察了巫山淫羊藿、柔毛淫羊藿和粗毛淫羊获的总黄酮正丁醇提取物（代号Ａ１、Ａ２、Ａ３）和巫山淫羊藿总黄酮乙酸乙酯提取物（Ｂ１）对正常小鼠免疫功能的影响。结果；Ａ１可以明显促进脾脏抗体形成细胞的功能（Ｐ＜０．０５），Ａ２、Ａ３虽也有一定的促进作用，但无统计学意义；４种提取物在体外实验中均没有协同ＣｏｎＡ诱导牌细胞增殖作用，只有提取物浓度在１００μｇ／ｍｌ时，有一定抑制作用。４种提取物对２４小时培养脾细胞存活率无明显影响。     

箭叶淫羊藿不同时期根际微生物群落组成及其与有效成分累积的相关性分

目的 通过分析箭叶淫羊藿Epimediumsagittatum不同生育期根际微生物群落结构及其与主要药用有效成分累积之间的相关性,探讨箭叶淫羊藿根际土壤微生物对其药材有效成分的影响,为箭叶淫羊藿的优质高产栽培提供科学依据。方法 以三年生箭叶淫羊藿的根际土为研究对象,采用高通量测序技术对根际细菌和真菌群落结构进行分析,同时测定根际土壤理化性质、酶活性及不同生育期药材总黄酮、淫羊藿苷等有效成分含量,通过皮尔逊相关性分析探究土壤生态因子与有效成分之间的关系。结果 高通量测序结果显示,箭叶淫羊藿根际细菌优势菌属包括Candidatus＿Solibacter、苔藓杆菌属、嗜酸栖热菌属、芽单胞菌属等,其中,Candidatus＿Solibacter属在5个生长时期的平均丰度值最高。根际真菌优势菌属中被孢霉属相对丰度占比最大,在花蕾期样品中的丰度值高达44.27%。UPGMA聚类和非度量多维标定法（NMDS）分析表明,花蕾期、盛花期、果实膨大期及盛果期的根际土壤细菌和真菌结构相似,而药材质量稳定期与前4个时期的根际微生物群落结构存在明显差异。同时,皮尔逊相关性分析结果显示：总黄酮含量与有效磷呈显著正...     

淫羊藿醇提物调节M2样巨噬细胞极化减少乳腺癌细胞迁移和集落形成的研究

目的 探讨淫羊藿Epimedium brevicornu醇提物对体外巨噬细胞极化调控机制及对M2样巨噬细胞促进4T1细胞迁移和集落形成的影响。方法 采用CCK-8法检测不同浓度淫羊藿醇提物对骨髓来源巨噬细胞（bonemarrowderived macrophages,BMDM）活力的影响,确定淫羊藿醇提物的安全作用浓度;采用Western blotting和q RT-PCR检测淫羊藿醇提物对M2样巨噬细胞标志物精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)和CD163表达的影响;采用q RT-PCR检测淫羊藿醇提物对M2-肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages,TAMs）相关基因炎症区域1(found in inflammatory zone 1,Fizz1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)、几丁质酶3样分子3(chitinase 3-like 3,Ym1)、趋化因子24(C-C motif chemokine ligand 24,CCL24)、巨...     

复方仙灵脾注射液对大鼠局灶性脑缺血的实验研究

目的 探讨复方仙灵脾注射液对大鼠局灶性脑缺血的治疗作用。方法 将SD大鼠60只，随机均分为假手术组，模型组，川芎嗪对照组，复方仙灵脾大，中，小剂量组，通过结扎大鼠一侧大脑中动脉（MCAO）造成局灶性脑缺血模型。观察复方仙灵脾注射液对血浆中的血栓素，前列环素，血小板聚集，超氧化物歧化酶，丙二醛及脑梗塞面积的影响。结果 复方仙灵脾注射液不仅能明显提高血浆中的前列环素水平，降低血小板聚集率，增加超氧化物歧化酶活力，而且能明显减少血栓素水平和丙二醛的含量。缩小脑梗塞面积，结论复方仙灵脾注射液在改善血浆TXA2-PGI2的平衡，抑制血小板聚集，增加脑血流量的同时，又有清除自由基，改善脑功能，减轻急笥脑梗塞所致的缺血损伤。     

RP-HPLC法测定补肾强身片中淫羊藿苷的含量

采用高效液相色谱法测定补肾强身片中淫羊藿苷的含量 ,以C18化学键合硅胶柱分离淫藿苷 ,以乙腈 -水 -醋酸(2 5∶75∶1)为流动相 ,UV检测波长 2 70nm进行测定。淫羊藿苷峰与其它组分峰的分离度为 6 0 ,理论塔板数以淫羊藿苷计算为 12 5 0 0 ;方法的平均回收率为 97 6 % ,RSD为 0 5 % (n =5 ) ,淫羊藿苷进样量与吸收面积分值呈良好的线性关系。线性范围 0 2 5～ 2 5 μg。本法测定补肾强身片中淫羊藿苷的含量 ,结果准确 ,重复性好     

桔梗扦插繁殖试验

对桔梗进行扦插繁殖试验，结果看出：用茎基部作插条的成活率最高（５２．２３％），茎梢部作插条成活率很低（１．１１％）；用激素处理可大大提高插条的成活率，其中ＮＡＡ（萘乙酸）１００ｐｐｍ处理３ｈ最显著，比对照组提高２３．３３％；扦插基质湿度过大，会引起插条腐烂。     

高压技术提取朝鲜淫羊藿总黄酮的研究

目的:为淫羊藿总黄酮的分离提取提供方法。方法:采用高压技术提取淫羊藿总黄酮,与乙醇回流提取方法进行比较;淫羊藿中总黄酮含量由UV-VIS测定,采用淫羊藿苷作为对照品。结果:高压技术提取朝鲜淫羊藿总黄酮,提取率为9.67%,提取时间5 min;乙醇回流法提取率为6.14%,提取时间为4 h。结论:采用高压法提取淫羊藿总黄酮提取率高,提取时间短,这一方法在中药有效成分的提取分离中会具有很好的应用前景。     

淫羊藿中重金属超临界CO2流体净化技术研究

目的利用超临界CO2萃取技术(SFE)净化淫羊藿中重金属.方法①以二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDC-Na)为金属络合剂,用超临界流体萃取技术净化药材中的重金属,并对萃取方案进行最优化.②选择不同的混合酸消化液完全消解药材后,以空气-乙炔火焰原子吸收法(AAS)和氢化物发生AAS法分别测定其中的铅(Pb)、镉(Cd)以及砷(As)、汞(Hg).③采用Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm )色谱柱,以甲醇-水(60∶40)为流动相,检测波长为270 nm,测定淫羊藿中淫羊藿苷的含量.结果在最佳萃取条件下,重金属净化率达到90%以上,中药材有效成分的损失＜5%.结论确定了药材中重金属的最佳萃取条件.