人胰腺导管腺癌组织及癌旁组织双向电泳图谱的差异分析

目的:探讨人胰腺导管腺癌组织和癌旁组织之间差异的表达蛋白。方法:利用双向凝胶电泳（2-DE）对8例胰腺导管腺癌组织和癌旁组织的总蛋白进行分离,并用质谱仪对两组间差异蛋白质点进行肽指纹谱和串联质谱鉴定。利用蛋白质印迹分析和免疫组化法检测差异蛋白在胰腺癌和癌旁组织的表达。结果:2-DE显示,肿瘤组织中有28个蛋白质点表达上调,17个表达下调。上述蛋白质点经质谱鉴定得到30个蛋白质,包括酶类、抗氧化蛋白、信号转导蛋白、钙结合蛋白、结构蛋白及分子伴侣等。Western blot和免疫组化结果显示差异表达蛋白annexin II在胰腺癌组织中表达上调,与2-DE结果一致。结论:以2-DE为基础的蛋白质组学技术是研究肿瘤的一种重要手段。本实验所得的annexin II等差异表达蛋白可能成为潜在的诊断胰腺癌的分子标志或控制肿瘤生长的治疗靶点。     

HPCE法测定蛹虫草及其培养物中核苷类化合物的含量

目的　建立蛹虫草中核苷类化合物的高效毛细管电泳测定法 ,比较天然蛹虫草及其培养物中核苷类化合物的含量。方法　在HV - 30 1高效毛细管电泳仪上进行定量分析 ,采用石英毛细管柱 ,以pH9.0的 4 0mmol·L-1 硼砂溶液作为电极缓冲液 ;分离电压为 1 6KV ;检测波长为 2 5 4nm。结果　天然蛹虫草中核苷类化合物主要集中在子座部分。人工培养蛹虫草子座和菌丝中虫草素的含量分别是天然蛹虫草子座中的 5 .0 4倍和 1 0 .85倍 ;液体培养蛹虫草菌丝中腺嘌呤、腺苷、尿苷、鸟苷含量均高于固体培养蛹虫草子座。结论　天然蛹虫草及其培养物中核苷类化合物的种类和含量具有较大的差异。高效毛细管电泳法可以用于蛹虫草的定量分析 ,具有分离度高、简便、准确 ,样品消耗少等特点     

应用电泳技术分析飞行员富含三酰甘油脂蛋白亚组分及其代谢特征

目的 分析富含三酰甘油脂蛋白(TRLs)分子组成及其代谢特征.方法应用脂蛋白电泳技术,对30例飞行员空腹和脂肪负荷餐后血浆做脂蛋白分析,以扫描图面积表示各亚组分构成,观察脂蛋白亚组分变化特点.结果 30例飞行员TRLs清除延迟发生率46.67%.TRLs分子脂蛋白亚组分由极低密度脂蛋白(VLDL)、中密度脂蛋白(IDL)、低密度脂蛋白(LDL)、乳糜微粒(CM)和脂蛋白a[LP(a)]组成.TRLs清除延迟典型扫描图特征为LDL左侧区面积增高,呈双峰或多峰.LDL、VLDL区面积增高,伴有高密度脂蛋白(HDL)面积降低.结论 高三酰甘油血症致动脉粥样硬化作用是在代谢水平异常所致的TRLs清除延迟,TRLs清除延迟是核心环节.     

云南不同地株微小按蚊酯酶同工酶比较研究

笔者应用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）技术，比较分析了云南５个（元阳、潞西、镇康、思茅、昭通）地株微小按蚊酯酶（Ｅｓｔ）同工酶，并对各酶谱进行扫描分析。结果：Ｅｓｔ同工酶均出现Ⅰ、Ⅱ两组区带，各自具有相对稳定的酶谱，同时也存在遗传上的多态现象，各地株间的酶谱中存在着一定的差异。     

人晶状体上皮细胞蛋白质组的双向电泳和质谱鉴定

目的： 建立人晶状体上皮细胞蛋白质组研究体系，探讨双向电泳和质谱鉴定技术在人晶状体上皮细胞蛋白质组研究中的作用。 方法: 体外培养人晶状体上皮细胞株，用两种不同方法提取总蛋白，进行固相pH梯度(IPG)等电聚焦双向凝胶电泳，凝胶通过GS-800扫描仪（Bio-Rad）获取图像并使用PDQuest专业图像分析软件分析。在此基础之上，胰酶消化蛋白质斑点并进行质谱分析。 结果: 获得了重复性较好的人晶状体上皮细胞蛋白质组电泳图谱。晶状体蛋白质斑点在等电点pH值为4-7、相对分子质量为17-72 kD之间均有分布。其中高丰度蛋白点主要分布于分子量19-50 kD、PI 5-7范围内。2个蛋白点通过质谱分析和数据库的检索得到了初步的鉴定。 结论: 建立起了一个稳定的分析人晶状体上皮细胞蛋白质组学实验体系；为进一步研究人类晶状体在生理状态及白内障等病理条件下的改变提供了蛋白质组学的研究方法和途径。     

Reference ranges for haematology, biochemical profile and electrophoresis in a single herd of Ragusana donkeys from Sicily (Italy)

Donkeys, an endangered species, have recently gained a new application with the use of their milk to feed humans with allergic processes. The Ragusana donkey breed from Sicily is used to produce milk for humans with allergic diseases. In order to evaluate the hygienic, nutritional and management measures on a farm of Ragusana donkeys, complete blood counts, extended biochemical profiles and serum protein electrophoresis, as part of metabolic profile test (MPT), were performed in Ragusana donkeys. Fifty-four donkeys were studied and grouped according to their age, (1) 29 females and a single stallion (n=30), (2) young females, 1 – 3 years old (n=10) and (3) young of both sexes under 1 year old (n=14). The RBC count, RDW value, Lymp, and Mono counts, and PDW values were statistically greater in donkeys under one year old than in adult donkeys, while the Seg Neu count was lower. The CPK, ALP, iPhos, and HCO₃, values were statistically higher in the group of donkeys under 1 year of age than adult donkeys while Cl and LDH values were statistically lower in donkeys under 1 year than adult donkeys. Additionally, statistically significant increased values for CPK, ALP, Alb, Chol, iPhos, HCO₃, and UIBC in young donkeys under 1 year when compared with young donkeys, 1 – 3 years were observed. A statistically significant decreased value for Urea and an increased value for Crea in young donkeys, 1 – 3 years old were found as compared to adults. The serum protein fractions recognised by electrophoresis were: albumin, alpha globulin (subdivided into alpha-1 and alpha-2-globulins), beta globulin, and gamma globulin. In the alpha-1-globulin region three small peaks were constantly noticed, and alpha-2-globulins were statistically different between the three groups being greater in young donkeys under 1 year of age. The results obtained were used both to establish reference ranges and a data bank for the farm of Ragusana donkeys for future needs in assessing the metabolic status and health of the animals.     

皮肤角朊细胞与表皮干细胞双向电泳图谱的建立及差异分析

目的 建立皮肤角朊细胞与表皮干细胞的双向电泳图谱,并分析二者表达蛋白质的差异,为进一步研究体外调控表皮十细胞的增殖、分化提供线索.方法酶消化法获取单个表皮细胞悬液.Ⅳ型胶原快速贴壁法分选表皮干细胞.利用舣向电泳技术(2-DE)建立两种细胞的蛋白质表达图谱,并用Imagemaster 2D elite 5.0软件分析两种细胞的差异表达蛋一点.结果两种细胞的2-DE蛋白表达谱具有良好的重复性和可比性.皮肤角朊细胞与表皮干细胞的电泳图谱平均蛋白质点数分别为(982 ±18)个和(930 ±15)个,匹配点数为(850±13)个和(798±11)个,匹配率是86.56%和85.81%;两种细胞蛋白质间匹配点数是(886 ±8)个,匹配率是76.98%.找到差异蛋白点11个,其中只在表皮下细胞中表达或高表达的有8个;只在皮肤角朊细胞中表达或高表达的有3个.结论利用双向电泳法得到了分辨率较高儿重复性好的皮肤角朊细胞与表皮干细胞蛋白质组图谱,且二者存在有一定的差异.     

大白鼠三叉神经核至小脑核的纤维投射

本实验用微电泳方法将HRP分别导入20只大白鼠的小脑核,研究三叉神经各核至小脑核的纤维投射。结果表明,三叉神经各核均向小脑核发出纤维投射。其中以三叉神经脊束核极间亚核和吻侧亚核最多,三叉神经脊束核尾侧亚核和三叉神经感觉主核次之,三叉神经中脑核和三叉神经运动核最少。此外,在三叉神经运动核的腹外侧和三叉神经根内也有向小脑核投射的起源细胞。来自中脑核的纤维多终于顶核和间位核前部,来自脊束核和感觉主核的纤维较多地终止于间位核后部和齿状核。运动核的纤维终止于顶核、间位核前部和齿状核。起源于三叉神经运动核腹外侧,三叉神经根内细胞群的纤维,在小脑核中有和三叉神经感觉核簇相似的终止。三叉—小脑核的纤维投射是双侧性的,但以同侧为主。     

改良琼脂糖凝胶电泳法测定血清LDH同工酶的应用

目的 寻求更加准确、简便、快速、实用的乳酸脱氢酶同工酶（LDH）测定方法。方法 据LDH同工酶等电点不同,选择琼脂糖胶作支持物,对以往LDH同工酶测定方法进行改进,将五型LDH同工酶进行分离并定量测定。结果 改进后的LDH同工酶测定方法稳定,区带清晰,重复性好,结果可靠,试剂可长期保存。结论 改良琼脂糖凝胶电泳法测定血清LDH同工酶应用前景良好。     

前列腺雄激素受体亚型的表达及在前列腺内外带的分布

研究雄激素受体(AR)亚型在前列腺组织中的表达及内外带分布。方法采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳(IEF)技术,检测了前列腺组织标本20例。结果前列腺组织有3种AR亚型,等电点(PI)分别在6.5、6.0和5.3,3种亚型均表达13例,占65％,所有标本均表达PI6.5亚型;前列腺内带和外带均有3种亚型表达,个体间存在差异;定量分析表明,前列腺内外带AR含量,外带高于内带,但无统计学意义(P>0.05),PI6.0亚型浓度在外带明显高于内带(P<0.05)。结论前列腺AR存在亚型并且具有带性分布特征。