抗隐孢子虫单克隆抗体研制及其特异性的鉴定

目的：制备抗隐孢子虫单克隆抗体（McAb）并对其特异性进行鉴定。方法：用纯化的人源微小隐孢子虫卵囊免疫BALB／c小鼠，杂交瘤技术制备McAb，间接免疫荧光（IFA）和免疫印迹试验分析其特性。结果：制备出Z4C8、Z2B6、Z3D7和Z3D2四株能稳定分泌抗隐孢子虫McAb的杂交瘤细胞株。经鉴定，Z4C8和Z3D7为IgM ，Z3D2和Z2B6为IgG1，轻链均为κ链，与多种肠道病原体及肺孢子虫无交叉反应。除Z2B6在间接免疫荧光试验中识别卵囊壁外，其余均识别隐孢子虫子孢子（CSP）。免疫印迹定位表明，四株McAb分别识别42条CSP抗原中的20．5kDa、60．5kDa、33kDa和95kDa4个条带，其中Z4C8和Z3D7均识别20．5kDa主要抗原带。结论：这四株McAb在识别CSP抗原表位上具有不同的特性，但对隐孢子虫抗原均呈高度特异性反应。