99m Tc-MAG3-ASON的制备及其在荷乳腺癌裸鼠中的分布

目的:探讨99mTc标记的反义寡核苷酸(ASON)的制备及其在荷乳腺癌裸鼠中的分布.方法:一步法合成巯基乙酰三甘氨酰-N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS-MAG3),并与c-erbB2 mRNA互补的5'末端氨基修饰的15个碱基的ASON偶联;随后进行99mTc的标记,并用SephadexG25分离纯化99mTc-MAG3-ASON,并评价其稳定性;最后检测其在荷乳腺癌BALB/c裸鼠体内的分布.结果:99mTc-MAC3-ASON平均标记率为70.6%;纯化后,在室温下放置4h,其放化纯度为94.3%;与人血清孵育后,其放化纯度为93.8%;与血浆蛋白结合率为11.8%.乳腺癌组织的摄取率2h达峰值(6.09% ID/g).结论:以NHS-MAG3为螯合剂制备的99mTc-MAG3-ASON具有良好的稳定性,在乳腺癌部位高浓聚,可望用于肿瘤的显像诊断和治疗.     

分枝型聚乙烯亚胺/寡核苷酸组装体的制备及细胞摄取研究

 目的制备分枝型聚乙烯亚胺(B-PEI)/反义寡核苷酸(ASON)超分子组装体(assembly)。方法分析(Zetasizer)组装体的粒径分布及Zeta电位,观察组装体的形态,单因素实验优化制备工艺条件。琼脂糖凝胶电泳分析组装体中ASON的包封率及组装体中ASON抗DnaseⅠ降解的能力。激光扫描共聚焦显微镜观察细胞的摄入情况。结果N/P(B-PEI含有氮原子的摩尔数/ASON含有磷原子的摩尔数)为4.0时制得粒径较小,Zeta电位较高的B-PEI/ASON超分子组装体,组装体呈球状,形态规则。N/P高于3.5时ASON的包封率接近100%,B-PEI/ASON超分子组装体荷载的有较强的抗酶解能力。共聚焦显微镜观察结果表明,组装体明显提高细胞对ASON的摄入率。结论B-PEI是一种组装能力强的多聚阳离子,B-PEI/ASON超分子组装体具有较好的物理化学性质,并能够显著增加细胞摄入率。     

反义寡核苷酸联合磁性载药微球靶向治疗耐药裸鼠人胰腺癌

目的 观察辐射及多药耐药基因逆转剂反义寡核苷酸( mdr1ASON)联合5-氟尿嘧啶磁性白蛋白微球(5-Fu-MAMS)靶向治疗耐药裸鼠人胰腺癌模型的效果.方法 构建人胰腺癌耐药细胞株(SW1990/Fu),建立裸鼠人胰腺癌耐药模型,选择适当的磁场,施加于肿瘤表面,瘤内注射mdr1ASON及5-Fu-MAMS,观察肿瘤生长,检测其对耐药裸鼠人胰腺癌的治疗效果.结果 在外加磁场的磁导向作用下,5-Fu-MAMS能定位于肿瘤组织,联合mdr1ASON能显著抑制肿瘤生长,肿瘤体积抑制率达到85.00％,肿瘤重量抑制率达到87.74％,与其他组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论　辐射促转染的mdr1ASON联合磁性载药微球对肿瘤细胞具有较好的耐药逆转作用.     

巨细胞病毒感染对SMC脂质代谢的影响及反义寡核苷酸的调节作用

目的了解体外情况下巨细胞病毒感染对平滑肌细胞（SMC）脂质代谢的影响及反义寡核苷酸的调节作用．探讨CMV感染SMC与动脉粥样硬化之间的关系。方法建立体外CMVAD169株感染SMC的模型．运用微量生化分析方法测定感染细胞脂质代谢的改变．同时观测反义寡核苷酸（ASON）和抗病毒药物GCV的调节作用。结果CMV感染后SMC内总胆固醇24～72h与对照组相比明显升高．甘油三酯水平在感染后48～72h明显增高．而ASON和GCV作用后．感染的SMC内总胆固醇和甘油三酯水平下降。结论CMV的体外感染能够促使脂质在SMC内积聚．而ASON和GCV能够下调脂质的积聚．这可能在CMV致AS的发病机制及治疗研究中具有重要意义。