PCR技术鉴定南水北调中线水源地淡水虾囊蚴并行系统进化分析

目的:基于PCR结合测序分析建立一种准确判断淡水虾类感染吸虫囊蚴的分子鉴定方法,并对其系统进化进行分析,追溯其起源。方法:采用肌肉压片直接挑取法取出囊蚴,试剂盒提取基因组DNA。用吸虫通用引物对所提DNA进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳鉴定。PCR阳性样本采用各类吸虫特异性引物分别进行扩增,PCR产物电泳鉴定,阳性样本送公司进行双向测序。使用DNAstar软件拼接序列,离线软件MEGA5比对测序结果并建立系统进化树并分析其起源。结果:制作虾肌肉压片20张共挑取囊蚴32个,获取了囊蚴基因组DNA。三对通用引物均扩出480 bp左右的单一条带。吸虫特异性引物扩增时,仅有针对于吸虫异形科的ITS2和28S rRNA序列分别扩增出了约480 bp和1 300 bp的特异性条带。软件分别拼接出了419 bp和770 bp的截断序列。系统进化树分析显示,虾类所感染吸虫囊蚴有两种,分别与Neochoanostoma spp和Dimerosaccus oncorhynchi高度同源。结论:应用PCR结合测序分析在十堰地区首次建立了淡水虾类囊蚴的分子鉴定方法,为我国吸虫系统分类和南水北调中线水源地食源性吸虫病的研究奠定了基础。     

广西横县某水库小型鱼类携带吸虫囊蚴的分子生物学初步检测

目的了解广西横县鱼类吸虫感染的虫种,评价形态学结合ITS2序列分析鉴定囊蚴的有效性。方法采集横县某水库小鱼,采用人工消化法消化收集囊蚴,在解剖镜下分捡单个囊蚴,按形态学特征鉴定分类,提取不同形态囊蚴的DNA后进行ITS序列PCR扩增和测序,获得的序列在NCBI上进行Blast分析,并用Mega 6.0.6软件构建系统发生树。结果检测小型鱼类112条,吸虫囊蚴阳性率为39.29%。观察到5种不同形态的囊蚴。ITS2序列分析鉴定为4种吸虫:华支睾吸虫(Clonorchis sinensis)、钩棘单睾吸虫(Haplorchis pumilio)、台湾棘带吸虫(Centrocestus formosanus)和日本全冠吸虫(Holostephanus dubinini)。其中一种在形态学上判定为非人类吸虫的囊蚴经分子生物学鉴定为华支睾吸虫。结论在横县某水库小鱼中检出4种吸虫囊蚴,分别为华支睾吸虫、台湾棘带吸虫、钩棘单睾吸虫和日本全冠吸虫。仅靠形态学上对鱼类吸虫囊蚴进行虫种鉴定有一定的缺陷,可以结合ITS2序列分析来完善。     

斯氏狸殖吸虫成虫尿素溶解性抗原蛋白组成及活性成份

采用8M尿素和简化方法分离、提取斯氏狸殖吸虫成虫尿素溶解性抗 原(PsAWU),并对该抗原和水溶性抗原(PsAWA)的血清学特性进行了分析比较,结果表明PsAIVU的敏感性高于PsAWA,初步证明具一定的特异性,是一种可实际应用的新型抗原。为进一步分析两种抗原,对其蛋白组成及活性成份进行了初步研究。 氨基酸组成的分析 两种抗原浓度均为1 mg/ml,用稀盐酸加热处理后,以氨基酸分析仪(Beckman公司)进行测定。结果表明两种抗原的氨基酸种类基本一致,但绝大     

临沂市华支睾吸虫感染情况调查

为了解临沂市人群华支睾吸虫感染情况,我们于1989年9～11月进行了调查。 1 自然概况临沂市位于鲁东南,有30个乡镇,1132个行政村,146万人。常年积水坑塘占71.73％,群众卫生条件较差,且有煎、烧食用小鱼的习惯。 2 检查对象以乡镇为单位划为30片,每片检查1984年以来村周50米以内有常年积水坑塘     

不同临床类型肺吸虫病的检测及治疗比较

斯氏狸殖吸虫病是一种人兽共患病,湖北省十堰市及毗邻的陕西、四川地区为肺吸虫病流行区,人体感染后所致临床表现斯氏狸殖吸虫多以幼虫移行症为特征,可引起肝脏、肺脏、眼、脑部损害和心包积液,以及游走性皮下包块等。由于表现复杂,病原体检查不易,往往会造成一些误诊,现就1990年以来收治的85例不同临床类型肺吸虫病患者的临床特征、诊断与治疗的结果报告如下。1材料与方法1.1临床资料患者来自十堰城区及各县(市)以及与之毗邻的四川、陕西有关县(市),患者抗原皮内试验阳性或强阳性,血常规检查均有不同程度白细胞增高及嗜酸粒细胞直接计数升…     

斯氏狸殖吸虫感染多种动物及体内发育的研究

目的 :以不同数量斯氏狸殖吸虫囊蚴 ,分别感染大白鼠 ,小白鼠和豚鼠 ,定期解剖观察虫体。方法 :经1 5、30、45、60、75、90、1 1 0和 1 2 5d分别解剖观察虫体在实验动物体内发育 ,分布及虫体检出率。结果 :大鼠在感染 90d后虫体可以逐步发育成熟并产卵 ,而小白鼠和豚鼠体内只能查到童虫阶段。结论 :初步证实大白鼠是斯氏狸殖吸虫的适宜宿主 ,小白鼠和豚鼠体内的虫体全部处于滞育阶段 ,不能发育为成虫     

旋毛虫、卫氏并殖吸虫及华支睾吸虫之间共同抗原的研究

目的鉴定旋毛虫、卫氏并殖吸虫及华支睾吸虫之间的共同抗原,避免血清学诊断这3种寄生虫病时的交叉反应。方法应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酸胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印渍(Western blot)对旋毛虫肌幼虫、卫氏并殖吸虫成虫及华支睾吸虫成虫可溶性抗原中的蛋白组分进行研究。结果旋毛虫肌幼虫、卫氏并殖吸虫成虫及华文睾吸虫成虫3者相同蛋白带的分子量为108、65、53、43、42、31、25、16 kDa。免疫印渍结果表明,旋毛虫和卫氏并殖吸虫抗原中分子量为 65、58、53kDa的蛋白带均与旋毛虫感染的大鼠、小鼠及患者血清、肺吸虫感染的大鼠和患者血清发生反应;旋毛虫和华支睾吸虫抗原中分子量为108kDa的蛋白带均与旋毛虫感染的大鼠、小鼠及患者血清、肝吸虫病患者血清发生反应;而3种可溶性抗原中的53kDa与本实验中所有寄生虫感染的动物和患者均有交叉反应。结论 65、58、53 kDa蛋白为旋毛虫和卫氏并殖吸虫的共同抗原,108kDa蛋白为旋毛虫和华支睾吸虫的共同抗原,而53 kDa蛋白为这3种寄生虫的共同抗原。     

中药内服配合斯氏针内固定治疗高龄老人顺股骨粗隆间骨折

目的探讨中药内服配合斯氏针内固定治疗高龄老人顺股骨粗隆间骨折的临床应用和疗效.方法采用中药内服配合斯氏针内固定治疗高龄老人顺股骨粗隆间骨折32例,平均随访9个月.结果达到正常行走26例,优良率84.4%.结论中药内服配合斯氏针内固定治疗高龄老人顺股骨粗隆间骨折可获得良好的效果,特别是对身体条件较差、骨质疏松较严重的高龄老人是比较理想的治疗方法.     

纹沼螺感染华支睾吸虫尾蚴的季节性动态观察

作者等于1978年以来在辽宁铁岭县对纹沼螺感染华支睾吸虫尾蚴的消长情况,作了季节性动态观察。结果表明:纹沼螺感染华支睾吸虫有明显的季节性变化,6月下旬和7月上旬感染率最高,分别为15.8%和19.2%;纹沼螺的感染率还和螺本身的生长、发育情况有密切关系,老螺的感染率远较当年生的成螺的感染率为高;雌螺的感染率明显高于雄螺的感染率。     

斯氏狸殖吸虫在小鼠体内的滞育状态

斯氏狸殖吸虫囊蚴经口感染后 ,虫体主要在腹腔、肝脏、胸腔、肺脏和膈肌中滞留 ,所有虫体长期处于滞育状态 ,内部器官未见明显分化发育