玳玳果黄酮降脂提取物体内组织分布规律及特征研究

目的：建立UPLC-MS/MS分析方法同时测定玳玳果黄酮降脂提取物效应组分新橙皮苷和柚皮苷在大鼠10种脏器组织中含量，分布规律及特征。方法：采用UPLC-MS/MS技术建立提取物效应组分新橙皮苷及柚皮苷在大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑、胃、小肠、脂质、肌肉组织中的定量分析方法；大鼠给药后分别于0.33，0.67，1，4，8 h的5个时间点，分别摘取以上10种脏器组织，测定脏器组织及血液中效应组分的质量浓度，采用DAS（V 2.0）药动学软件对各样本的药物浓度-时间数据进行房室拟合，并计算不同组织效应组分的药-时曲线下面积（AUC）及平均滞留时间（MRT）。结果：所建立的UPLC-MS/MS定量分析方法具备良好的专属性、标准曲线及线性范围良好、方法准确度与精密度、定量下限均符合有关规定；玳玳果黄酮降脂提取物效应组分在血液中的分布符合一室模型，除肾脏及脑组织外，其余脏器中提取物效应组分的房室特征多为静脉注射的二室模型，柚皮苷在肾脏中的拟合结果为非静脉注射的二室模型，新橙皮苷在脑组织拟合结果为静脉注射的三室模型，给药后8 h各组织中效应组分新橙皮苷及柚皮苷AUC值大小顺序均为小肠 > 胃 > 肾 > 脂质 ≈ 脾脏 > 肺 > 肌肉 > 肝 > 心 > 脑，效应组分在各脏器中均无明显蓄积；效应组分在血液、肾脏、肝脏中的滞留时间较长，MRT均大于2 h，脂质最短，MRT不足1 h；各脏器中新橙皮苷的药-时曲线下面积约是柚皮苷的3倍，而心、肝、肾中则是3.5，2.1和3.4倍。结论：玳玳果黄酮降脂提取物效应组分在大鼠组织中分布迅速，达峰时间早于血液；效应组分在肠道内消除缓慢，给药8 h后在各脏器中的含量均显著下降且无特异的蓄积部位。研究结果揭示玳玳果黄酮降脂提取物效应组分在大鼠体内的分布特征及规律，为进一步理解玳玳果黄酮降脂提取物在体内的作用靶点及机制奠定了基础。     

葛根素对家兔肢体缺血再灌注后心脏功能的保护作用

目的:观察葛根素对家兔肢体缺血再灌注所致心脏损伤的保护作用并探讨其机制.方法:家兔40只,随机分4组:Ⅰ组为假手术对照组、Ⅱ组为缺血再灌注组、Ⅲ组为葛根素低剂量治疗组、Ⅳ组为葛根素高剂量治疗组.免疫组化法检测心肌组织Bcl-2和Bax蛋白表达;原位缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡;比色法测定心肌组织超氧化物岐化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)活性,丙二醛(MDA)含量,测定血清乳酸脱氢酶(LDH)活性;通过生理记录仪观察心功能指标.结果:与Ⅱ组比较,Ⅲ、Ⅳ组左心室功能增强,且Ⅳ组的左心室收缩功能比Ⅲ组增强,同时,Ⅲ、Ⅳ组心肌组织MDA含量和血清LDH活性减少,Bax蛋白表达减少,Ⅳ组的心肌凋亡指数低于Ⅱ组,心肌Bcl-2表达高于Ⅱ组.结论:葛根素促进肢体缺血再灌注后心脏功能的恢复,表现为剂量依赖效应,其作用机制与抗氧化损伤和抗细胞凋亡有关.     

钙和鸡冠花黄酮提取物对大鼠废用性骨质疏松的作用

目的探讨钙和鸡冠花黄酮提取物对废用性骨质疏松大鼠的作用,为骨质疏松的防治提供依据.方法选用健康SD大鼠40只,雄性.随机分为5组,第1、2组分别为正常对照和阳性对照,灌胃蒸馏水5 ml/(kg@d),第2～5组制造废用性骨质疏松大鼠模型,第3、4、5组为预防组,分别灌胃等量鸡冠花提取物,碳酸钙,鸡冠花提取物加钙溶液.实验8周后,测骨密度(BMD),股骨CT值,测血清MDA、SOD及24 h尿钙、羟脯氨酸(HOP)、尿肌酐含量等.结果阳性组与正常对照组比较股骨重、灰分重、CT值、血清钙下降,尿钙、尿HOP升高(P＜0.05或0.01),预防组与阳性组比较股骨重、CT值显著增加,碳酸钙组、鸡冠花加钙组灰分重显著增加(P＜0.05).与阳性组比较各预防组血清钙增加,尿钙、尿HOP减少(P＜0.05或＜0.01).鸡冠花组、鸡冠花加钙组与阳性组比较股骨BMD、血清SOD升高,MDA降低,单纯补钙组仅BMD升高(P＜0.05或＜0.01).结论鸡冠花提取物、钙对废用性骨质疏松大鼠骨质代谢均有促进作用,两者合用具有更好的预防效果,能延缓或减轻废用性骨质疏松的发生.     

舒血宁治疗脑衰弱综合征的双盲对照研究

１４３例脑衰弱综合征患者随机分成舒血宁组和对照组，进行双盲的前瞻性研究。通过脑衰弱量表，打洞试验，连线实验的回查，结果表明：应用舒血宁治疗脑衰弱综合征，整体疗效明显优于对照组，脑衰弱量表的总评分显著优于对照组，而且对脑衰弱量表各个症状都有显著改善，易激惹，烦恼两项症状降分幅度较大，打洞、连线试验表明舒血宁治疗后患者的注意力、记忆力都有明显的改善，而且没有发现明显副作用。作者认为舒血宁治疗脑衰弱综合征有显著的作用，作为一种治疗脑血管疾患伴发精神症状和早期预防脑血管痴呆的新药是可行的。     

基于混合测序策略的两品种当归中类黄酮调控基因差异分析

目的 比较2个不同茎叶色当归品种岷归1号与岷归2号转录水平差异。方法 以2种颜色当归的新鲜叶片（带叶柄）和上端茎为材料,采用混合测序策略,应用全长转录组技术构建当归无参全长转录本文库,利用RNA-seq技术对两品种进行差异基因表达分析,再利用公共数据库对差异基因的生物学功能进行注释和精细分类,筛选调控当归茎叶色差异的主要候选基因。结果 当归转录本的测序结果良好,测序数据质量较高,当归全长转录本的34 528条序列在非冗余蛋白（NR）、京都基因与基因组百科全书（KEGG）、SwissProt及KOG数据库中分别注释到33 947、33 241、29 150和22 601条。对两品种当归差异表达基因（DEGs）进行精细分类,具有生物学功能和分子功能的705个DGEs可分为11类,主要富集在初级代谢（17.87%）、逆境响应（14.47%）、次级代谢（11.49%）等功能上,与颜色有关的差异表达基因主要集中在类黄酮生物合成途径上。结论 两品种当归茎叶颜色差异的主要原因可能与调控类黄酮的生物合成基因的表达差异有关,可为后续进行功能验证,进一步明确与当归主要药效成分之间的联系奠定基础。     

葛根素对星形胶质细胞肿胀及大鼠脑水肿的对抗作用

为观察葛根素是否有对抗星形胶质细胞肿胀及脑水肿的作用 ,体外实验用培养的星形胶质细胞进行 ,整体实验用Wistar雄性大鼠tACPD(5 0 0nmol,2 μL)尾状核内微量注射的方法 ,分别测定星形胶质细胞水含量、脑组织水含量和Na+ 、K+ 、Ca2 + 含量 ,部分脑组织进行电镜观察。结果显示葛根素可以阻断tACPD引起的星形胶质细胞水含量增加 ,减轻由tACPD尾状核内注射引起的脑组织水含量和Na+ 含量增加 ,电镜检查证实葛根素可以减轻tACPD引起的星形胶质细胞肿胀及足突肿胀对毛细血管的挤压。提示葛根素可以对抗星形胶质细胞肿胀及脑水肿。     

葛根素对绝经后骨质疏松大鼠骨代谢、骨密度及骨生物力学的影响

目的研究葛根素对绝经后骨质疏松大鼠骨代谢、骨密度及骨生物力学的影响,探讨中医药防治绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的作用机制。方法48只大鼠随机分为正常组、去卵巢组、骨化三醇组和葛根素组,12只/组,构建绝经后骨质疏松大鼠动物模型并给予不同药物干预8周,正常组和去卵巢组:5 mL/kg 0.9%NaCl,ih,qd;葛根素组:葛根素35 mg/kg,ih,qd;骨化三醇组:骨化三醇0.25μg,po,qd,连续给药6周。检测各组大鼠血清骨代谢指标、骨组织(BMD、BMC)和骨生物力学指标,SP法检测各组骨组织ER表达,HE观察骨组织形态学变化。结果去卵巢组大鼠血清骨代谢指标、腰椎和股骨BMD和BMC、股骨骨生物力学指标较正常组显著降低(P<0.05),骨化三醇组和葛根素组上述指标较去卵巢组均显著增高(P<0.05),葛根素组上述指标较骨化三醇组均增高(P<0.05)。去卵巢组大鼠骨组织ER蛋白表达较正常组显著降低(P<0.05),骨化三醇组和葛根素组ER蛋白表达较去卵巢组均显著增高(P<0.05),葛根素组ER蛋白表达较骨化三醇组均增高(P<0.05)。去卵巢组骨皮质明显变薄,骨小梁稀疏纤细或断裂,排列紊乱,髓腔明显扩大,造血细胞明显减少。葛根素组骨皮质结构较完整,骨小梁数目增多,致密均匀粗壮,连接成网状,髓腔变小,造血细胞增多。结论葛根素通过提高绝经后骨质疏松大鼠雌激素水平,调节骨代谢,提高骨量和骨密度,改善骨生物力学性能和骨形态学结构,起到抗PMOP的疗效和骨保护作用。     

葛根素对兔脊髓缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究葛根素对兔脊髓缺血再灌注损伤的作用。方法：20只雄性新西兰大白兔随机分成缺血组（A组,n=10）及葛根素组（B组,n=10),夹闭腹主动脉肾下段20min,建立兔脊髓腰尾段血模型,B组于夹闭前10min静脉注射葛根素30mg.kg^-1,A组则静脉注射生理盐水,测定夹闭前、后及再灌注后血浆中丙二醛（MDA）浓度及超氧化物歧化酶（SOD)活性,再灌注4,8,12,24及48h分别对动物后肢运动功能评分;再灌注48h后,处死动物,制作切片,观察其组织病理变化。结果缺血及再灌注后B组MDA值明显低于A组（P＜0．05）,而OD活性明显高于A组（P＜0．05）;再灌注后4,8,12,24及48h时的神经功能评分B组明显高于A组（P＜0．05）;光镜下,与A组相比,B组脊髓组织损伤显著减轻,形态基本正常的前角细胞较多。结论葛根素对兔脊髓缺血再灌注损伤有显著的保护作用。     

葛根素治疗52例冠心病心绞痛疗效观察

目的：探讨冠心病心绞痛药物治疗的效果。方法：将１０４例冠心病心绞痛患者随机分成两组：Ａ组选用葛根素注射液５００ｍｇ加入５％葡萄糖５００ｍｌ静脉滴注治疗,Ｂ组采用镁－极化液５００ｍｌ静脉滴注,１次／ｄ,１４ｄ为１个观察疗程。结果：缓解心绞痛症状,Ａ组总有效率达８４．６％,与Ｂ组总有效率４２．３％相比较有非常显著差异（Ｐ〈０．０１）心肌缺血改善后心电图评定,Ａ组总有效率６９．２３％,与Ｂ组总有效率３４     

葛根素注射液对慢性乙醇中毒小鼠记忆障碍的改善作用

 目的,探讨葛根素注射液对慢性乙醇中毒小鼠记忆障碍的改善作用及其脑内机制。方法每日给予30%乙醇连续4周造成小鼠慢性乙醇中毒，同时每日ip 20,100 mg·kg^-1葛根素注射液治疗4周，用Y-迷宫检测小鼠分辨学习和记忆行为的变化，用紫外分光光度计和荧光分光光度计分别检测脑组织SOD，脂褐素生化指标；用电镜和计算机图像分析仪观测小鼠海马CA₃区Gray Ⅰ型突触界面结构参数的变化。结果葛根素注射液100 mg·kg^-1可显著改善长期给予乙醇造成的小鼠学习记忆功能障碍；显著提高脑组织SOD的活性，使小鼠脑内脂褐素含量明显下降；同时使海马突触后致密物质(PSD)厚度显著增加，突触间隙宽度显著减小。结论葛根素注射液能改善慢性乙醇中毒引起的小鼠学习记忆功能障碍，该作用可能与其提高脑组织抗氧化能力，改变海马突触界面结构有关。