蚯蚓用于抗血栓的加工方法

目的:为干品蚯蚓的临床应用提供依据。方法:采用冷冻干燥、晒干、不同温度烘干等方法干燥,以溶栓效价的测定为指标。结果:晒干、40℃烘干、40℃减压干燥的效价与冷冻干燥品效价无差异,温度>50℃则效价显著下降。结论:蚯蚓的干燥方法可确定为晒干或者40℃烘干。     

龙心素胶囊质量标准提高研究

目的研究提高龙心素胶囊的质量标准。方法用蚓激酶活性测定替代原标准第1项化学显色鉴别。引入蚓激酶标准品,采用生物统计的量反应平行线法统计计算效价,并对效价测定的琼脂糖纤维蛋白平板法进行了方法学研究。结果新的鉴别方法能反应蚓激酶的活性特征。效价测定的线性范围为8 250～33 000 U/mL(r=0.998 6),精密度RSD为4.71%;重复性RSD为6.54%;平均回收率(n=9)94.63%,RSD为7.69%;不同的溶剂对效价测定影响较小,阴性对照无干扰;供试品溶液在4℃下72 h内稳定。结论提高后的质量标准专属性强,准确性高,可控制测定方法的误差,能更有效地控制龙心素胶囊的质量。     

斑点免疫印迹法快速测定地龙炮制品中蚓激酶及其水解产物

目的测定参环毛蚓、秉氏环毛蚓、日本杜拉蚓和天锡杜拉蚓炮制品中蚓激酶及其水解产物,建立斑点免疫印迹法评价相应生药材药效成分明确的中药炮制品质量新方法。方法以兔抗蚓激酶单抗为一抗,应用斑点免疫印迹法对地龙炮制品中蚓激酶及其水解产物作定性检测,杂交信号应用Quantity One软件作定量分析。结果现行中药材参环毛蚓与山东产地方品种:秉氏环毛蚓、日本杜拉蚓、天锡杜拉蚓炮制品中蚓激酶及其水解产物的质量分数分别为125.23、118.34、81.05、72.13μg/g。结论秉氏环毛蚓炮制品中蚓激酶及其水解产物与现行地龙炮制品参环毛蚓无显著差异,理论上可作为广地龙的替代品。斑点免疫印迹法简便快捷,结果准确,无需大型设备,可用于地龙与类似中药材炮制品的品质评价。     

蚯蚓纤溶酶PI_(239)基因在杆状病毒中的表达

利用基因重组技术将PI2 39基因通过细菌 /杆状病毒 (Bac to Bac)表达系统构建重组杆状病毒表达载体 ,载体采用苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒 ,将重组病毒转染昆虫Sf9细胞 ,细胞出现明显病变。SDS PAGE电泳可以见到相对分子质量 3 .0万位置有蛋白表达 ,免疫印记结果表明该条带可以与PI2 39抗体反应。提示蚯蚓纤溶酶PI2 39重组蛋白已经获得表达 ,为进一步研究蚯蚓纤溶酶PI2 39基因的生物学活性奠定了基础     

斑点免疫印迹法快速测定地龙炮制品中蚓激酶及其水解产物

目的测定参环毛蚓、秉氏环毛蚓、日本杜拉蚓和天锡杜拉蚓炮制品中蚓激酶及其水解产物,建立斑点免疫印迹法评价相应生药材药效成分明确的中药炮制品质量新方法。方法以兔抗蚓激酶单抗为一抗,应用斑点免疫印迹法对地龙炮制品中蚓激酶及其水解产物作定性检测,杂交信号应用Quantity One软件作定量分析。结果现行中药材参环毛蚓与山东产地方品种:秉氏环毛蚓、日本杜拉蚓、天锡杜拉蚓炮制品中蚓激酶及其水解产物的质量分数分别为125.23、118.34、81.05、72.13μg/g。结论秉氏环毛蚓炮制品中蚓激酶及其水解产物与现行地龙炮制品参环毛蚓无显著差异,理论上可作为广地龙的替代品。斑点免疫印迹法简便快捷,结果准确,无需大型设备,可用于地龙与类似中药材炮制品的品质评价。     

蚓激酶或阿司匹林预防脑梗死复发的疗效分析

目的探讨长期服用蚓激酶或小剂量阿司匹林对脑梗死复发的预防作用。方法对127例脑梗死患者进行回顾性调查,分别统计分析42例(观察组)长期服用蚓激酶(22例,一日120~180U,服药时间>150 d)或小剂量肠溶阿司匹林(20例,一日50~70 mg,服药时间>150 d)的患者及85例(对照组)未正规服用抗凝药物患者的脑梗死复发率。结果脑梗死复发率观察组为9.52%,对照组为30.58%,前者明显低于后者(P<0.05)。结论长期服用蚓激酶或小剂量肠溶阿司匹林对脑梗死复发有一定的预防作用。     

量反应平行线法在溶栓胶囊蚓激酶效价测定方法学研究中的应用

目的:建立蚓激酶的效价测定方法,并引入生物检定统计法控制实验误差。方法:用标准曲线法和生物检定的量反应平行线法统计计算效价,从方法耐用性、专属性、线性范围、供试品处理方法、精密度、重复性、溶液稳定性、回收率、统计计算方法等方面对溶栓胶囊中蚓激酶效价测定的琼脂糖纤维蛋白平板法进行了方法学研究。结果:不同琼脂糖、不同纤维蛋白原对本法测定影响较小,阴性对照无干扰;本法线性范围为12.5~400 U,精密度RSD 3.2%,重复性RSD 8.3%,回收率97.0%,RSD 16.6%;供试品溶液在4℃下72 h内稳定;用本法可以将测定误差由60%~70%降低到2%左右。结论:琼脂糖纤维蛋白平板法可以快速、简便、准确地测定蚓激酶的活性,用生物检定的量反应平行线法可以控制测定的误差。     

蚓激酶治疗急性脑梗死的疗效观察

目的:观察蚓激酶治疗急性脑梗死的疗效。方法:79例急性脑梗死患者随机分为蚓激酶治疗组(39例)和对照组(40例),除常规治疗外,蚓激酶组每天给予蚓激酶120 mg,对照组则每日给予丹参20 mL静注,治疗14 d后比较两组疗效及治疗有关的并发症。结果:经Ridit分析显示蚓激酶组与对照组的疗效有显著差异(P<0.01)。治疗前后临床神经功能缺损评分和生活功能状态评价差值蚓激酶组分别为9.86±7.40和2.06±1.07,对照组分别为5.08±5.18和1.17±0.64;两组间差异显著(P<0.01)。蚓激酶组和对照组出血发生率无显著差异(12.8％V 10％,P>0.05)。结论:蚓激酶治疗急性脑梗死有较好的疗效。     

疏血通对髋关节置换术后患者血栓调节蛋白的影响及意义

目的评估疏血通对髋关节置换手术患者术后血栓调节蛋白(TM)的影响.方法本科2002年7月～2003年4月髋关节置换手术共25例,其中男13例,女12例,年龄52～74岁,平均(64.6±13.2)岁.根据入院时间单双日分为治疗组(14例)和对照组(11例),术前3d开始分别采用疏血通和低分子肝素治疗共14d,于用药前、术前1d、术后1、3、7、10d采用酶联免疫双抗体夹心法(ELISA)测定血浆血栓调节蛋白,用酶联免疫检测仪直接测定其含量,所有患者均行静脉造影检查.结果疏血通治疗组和低分子肝素治疗组DVT发病率分别为23.1%、27.7%,术前对照组和治疗组相比TM无显著差异,术后各时间点,对照组和治疗组相比TM有显著差异(P<0.05).结论 PTM作为内皮细胞损伤的标志物,它能反映内皮细胞的损伤程度,疏血通在预防和治疗髋关节术后静脉血栓形成中,不仅有抗凝、激活纤溶的作用,还能保护内皮细胞.