五倍子水提取物对人牙周膜细胞保护作用的实验研究

目的:观察五倍子水提取物对内毒素(LPS)所致人牙周膜细胞(PDLC)活性降低、超微结构损伤、在牙骨质片表面附着减少、以及碱性磷酸酶(ALP)活性降低的影响,探讨五倍子水提取物对PDLC的保护作用.方法:采用细胞培养技术、3H-TdR掺入法、细胞计数法、透射与扫描电子显微镜技术、酶联免疫技术观察五倍子水提取物对PDLC的保护作用.结果:培养液中加入100μg/mL LPS时,PDLC活性和ALP活性受到明显抑制,超微结构损伤,细胞在牙骨质片表面附着减少.加入五倍子水提取物溶液后,对LPS抑制PDLC活性和ALP活性,以及超微结构损伤、牙骨质片表面附着减少有拮抗作用,该作用随五倍子水提取物浓度增加而增加,到10μg/mL时,达到峰值.结论:五倍子水提取物对PDLC具有保护作用,有望成为防治牙周病的药物.     

内镜直视下应用中药复方石榴皮五倍子诃子液对上消化道出血的疗效观察

目的：观察中药对上消化道出血（UGIH）的作用。方法：将102例患者按半随机法分为两组。对照组52例采用内镜直视下喷洒凝血酶治疗,观察组50例加用中药复方石榴皮五倍子诃子液。结果：观察组和对照组痊愈率分别为38．00％、19．23％,差异有统计学意义（P〈0．05）。观察纽和治疗组治疗后第1d继续出血人数分别为15例、18例;组间比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。第2d继续出血人数分别为9例、15例,第3d为4例、10例;组间比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。观察组和治疗组止血时间分别为（31．45±4．32）h、（50．25±6．68）h;住院时间分别为（7．02±0．53）d、（9．86±2．14）d;输血量分别为（15．20±3．16）U、（28．78±4．54）U。组间比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。观察组和对照组分别有3例和2例患者出现恶心、呕吐;组间比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。两组其余患者均未发现其他明显不良反应。结论：内镜直视下喷洒中药复方石榴皮五倍子诃予液可明显缩短UGIH患者的止血时间和住院时间,降低继续出血率和输血量,且不良反应轻微,临床疗效优于单纯西药治疗。     

五倍子水提取物对人牙髓细胞Ⅰ型胶原合成的影响

目的:观察五倍子水提取物对人牙髓细胞Ⅰ型胶原合成的影响。方法:取第6代体外培养的人牙髓细胞分别与终末浓度为5、10μg/m L的五倍子水提取物共同培养3 d后,采用免疫组化染色法观察人牙髓细胞中Ⅰ型胶原的表达情况,并用HPIAS-1000图像分析系统进行定量分析。结果:对照组和不同浓度五倍子水提取物作用的实验组人牙髓细胞中均有Ⅰ型胶原的表达,其免疫反应物质多定位于胞浆。人牙髓细胞经5、10μg/m L浓度的五倍子水提取物作用后,其Ⅰ型胶原的表达水平均明显增高,其中以10μg/m L组的增高程度最大,各组间两两相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:5、10μg/m L五倍子水提取物均能明显促进人牙髓细胞中Ⅰ型胶原的表达;提示其具有促进牙髓细胞向成牙本质细胞分化的作用。     

复方没食子凝胶膏剂制备工艺优选

目的:优化复方没食子凝胶膏剂基质处方及制备工艺。方法:以皮肤追随性、膜残留性、基质均匀性、延展性、黏性、硬度等为多感官指标,采用综合加权评分法,通过单因素试验优选基质配方。结果:最佳制备工艺为药物-90-CMCNa-聚丙烯酸钠NP700-丙三醇-1,2-丙二醇-EDTA(10.5∶1.4∶0.6∶5∶18∶5∶1)。结论:按优选工艺制备的复方没食子凝胶膏剂基质载药量大,黏着性好,性能较好。     

五倍子对口内菌斑生物膜活性影响的体外研究

目的应用口内菌斑生物膜模型观察五倍子水提取物对菌斑生物膜活性的影响。方法将牙釉质磨片粘结于两侧下颌第一恒磨牙颊侧获得24h口内菌斑生物膜模型,实验组和对照组分别用6mg/ml五倍子水提取物和生理盐水处理3min,应用溴化乙锭/荧光素双乙酸盐(ethidium bromide/fluorescein diacetate,EB/FDA)染色技术和激光共聚焦显微镜(confocal laser scan microscope,CLSM)观察五倍子水提取物对生物膜活性的影响。结果CLSM观察可见所有样本釉质表面均有细菌的定植,有早期的生物膜形成。对照组菌斑生物膜中细菌的活性明显高于实验组,两者相比具有显著差异(P<0.05)。结论五倍子水提取物在较短的时间内就能对生物膜中的细菌产生一定的杀伤效应,使其活性下降。     

五倍子水提取物抑制LPS对牙周膜细胞附着牙骨质片表面的影响

目的观察五倍子水提取物对LPS抑制PDLC在牙骨质片表面附着的影响。方法采用细胞培养技术,细胞计数法及扫描电镜进行观察。结果加入五倍子水提取物溶液后,对LPS抑制PDLC在牙骨质片表面的附着有明显拮抗作用,该作用随五倍子水提取物浓度增加而增加,到10μg/mL时,达到峰值。另外,培养液中先加入不同浓度的五倍子水提取物溶液,培养24h后再加入LPS时(A组),与LPS和五倍子水提取物溶液同时加入组(B组)相比,除对LPS抑制PDLC在牙骨质片表面附着有同样拮抗趋势外,当五倍子水提取物浓度为10μg/mL、20μg/mL时,A组的细胞附着数明显高于B组。扫描电镜显示,A组与B组牙骨质片表面细胞数量较多,细胞形态丰满,细胞胞突伸展明显,并相互交织成栅栏状、网状结构,部分细胞呈叠层生长,其中A组效果更明显。结论五倍子水提取物对LPS抑制PDLC在牙骨质片表面附着有拮抗和保护作用。     

五倍子水提取物对LPS抑制PDLC的ALP活性的影响

目的：观察五倍子水提取物对LPS抑制牙周膜细胞(Periodontal ligament cell，PDLC)的ALP活性的影响。方法：本实验采用细胞培养技术和酶联免疫技术，对LPS抑制PDLC的ALP活性的影响进行观察。结果：100μg／mL LPS可显著抑制ALP活性。加入五倍子水提取物后，对LPS抑制ALP活性有拮抗作用，该作用随五倍子水提取物浓度增加而增加，到10μg／mL时，达到峰值。另外，培养液中先加入不同浓度的五倍子水提取物溶液，培养24h后再加入LPS时(A组)，与LPS和五倍子水提取物溶液同时加入组(B组)相比，除对LPS抑制ALP活性有同样拮抗趋势外，A、B两组间比较，B组效果更佳。结论：五倍子水提取物对LPS抑制ALP活性具有保护作用。     

五倍子水提取物对菌斑生物膜形成过程中表面形态的影响

目的：研究五倍子水提取物在菌斑生物膜动态形成过程中对菌斑生物膜表面形态的影响。方法：采用液体二倍稀释法测得五倍子水提取物对变形链球菌、血链球菌、黏性放线菌标准株的MIC值分别为8、8、4mg／mL。在人工口腔环境下，用以上3种标准菌株在羟基磷灰石（HA）表面形成混合菌斑生物膜。在生物膜形成过程中，实验组以2mg／mL（低于3种菌株MIC值）的五倍子水提取物处理，对照组以生理盐水处理；在第6、24、48、72小时和第7天，通过扫描电镜（SEM）观察菌斑生物膜的表面形态。结果：各时期菌斑生物膜形态，实验组与对照组相比有明显差异。随着时间的变化，实验组HA表面细菌由散在分布逐渐聚集，形成简单的团块状或片状结构，而对照组细菌由疏松逐渐密集并增厚，形成较为典型的生物膜立体结构。结论：五倍子水提取物可以改变菌斑生物膜形成过程中的菌斑形态。     

金黄色葡萄球菌生物膜对五倍子提取物的抗性研究

目的研究金黄色葡萄球菌生物膜对五倍子提取物的抵抗力。方法采用平板改良法体外复制金黄色葡萄球菌生物膜模型,用载体定量杀菌试验法进行实验室检测。结果培养3 d形成的金黄色葡萄球菌生物膜对体积分数1.5%的五倍子提取物溶液耐受时间为10 m in,作用20 m in可达到完全杀灭;对0.375%五倍子提取物溶液耐受时间为30 m in,作用60 m in可达到完全杀灭。培养7 d形成的金黄色葡萄球菌生物膜对体积分数1.5%五倍子提取物溶液耐受时间为30 m in,作用60 m in可达到完全杀灭;对0.375%五倍子提取物溶液耐受时间为90 m in,作用120 m in可达到完全消失。结论经过培养可形成金黄色葡萄球菌生物膜,其对五倍子提取物耐受时间和杀灭时间均随浓度降低而增加。     

五倍子水提取物对胶原酶活性的影响

目的：观察五倍子水提取物对牙周炎组织中胶原酶活性的影响,并探讨其抗炎作用机制。方法：应用羟脯氨酸检测法,观察6．25ug／ml、12．5ug／ml、25ug／ml、50ug／ml、100ug／ml5种浓度五倍子水提取物对胶原酶活性的影响。结果：与胶原酶组比较,各浓度组五倍子水提取物均能明显降低胶原酶活性,其作用呈浓度依赖性。但浓度在100ug／ml以内时,其抑制效果比5ug／ml的强力霉素低。结论：五倍子水提取物能够阻断胶原酶对结缔组织的破坏作用,抑制或减缓牙周炎的进展。