多药耐药与泛耐药鲍氏不动杆菌的临床分布及耐药性研究

目的 探讨多药耐药与泛耐药鲍氏不动杆菌(ABA)的临床分布及耐药性特征,为临床抗感染治疗提供试验依据.方法 ABA分离、鉴定按照《全国临床检验操作规程》进行;药敏试验采用K-B法,依据CLSI最新折点判读结果.结果191株ABA在呼吸道标本中检出率占首位,达70.2％;ABA对临床常用抗菌药物均产生了非常严重的耐药性,对亚胺培南和美罗培南耐药率分别为45.5％、44.5％,ABA泛耐药菌株检出率为15.2％.结论 应坚持动态监测ABA耐药性的变迁,控制ABA耐药性不断增长的不良趋势.     

多药耐药肺炎克雷伯菌可移动遗传元件研究

目的了解多药耐药肺炎克雷伯菌(MDR-KPN)耐药基因载体-可遗传元件分布状况。方法运用PCR法对20株MDR-KPN进行了接合性质粒遗传标记(traAt、rbC)、插入序列遗传标记(IS1133I、SEcp1)、转座子遗传标记(merAt、npUt、np513)、整合子遗传标记(intⅠ1i、ntⅠ2i、ntⅠ3)等4类可移动遗传元件检测。结果 trbC、ISEcp1、merAt、npUt、np513i、ntⅠ1检出阳性率分别为:55.0%、65.0%、25.0%、20.0%、50.0%、65.0%,其余4种基因均未检测到可移动性元件;20株菌株每株至少检出1种可移动遗传元件遗传标记,其中在MDR-KPN中检出ISEcp1、merA、tnpUt、rbC基因属国内首次。结论多药耐药肺炎克雷伯菌易检出各类可移动遗传元件,与医院多耐药肺炎克雷伯菌耐药机制相关的可移动遗传元件主要有trbCI、SEcp1、merAt、npUt、np513i、ntⅠ1。     

多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶检测与分析

目的了解本地区多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶产生情况,为临床治疗及控制医院感染提供依据。方法用K-B法进行常规药敏试验,筛选出50株多重耐药铜绿假单胞菌,用改良三维试验检测各种β-内酰胺酶,同时用2-巯基丙酸抑制试验检测金属酶。结果50株多重耐药铜绿假单胞菌中产ESBLs2株(4%)、产AmpC酶20株(40%),11株同时产ESBLs和AmpC酶(22%),金属酶筛选出8株(16%)阳性。结论本地区多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶以AmpC酶为主,临床应根据药敏试验结果,合理选用抗生素,以减少耐药菌株产生和控制医院感染。     

从携带多种耐药基因认识鲍曼不动杆菌多重耐药性

目的了解多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药基因和耐药性。方法用MIC法检测鲍曼不动杆菌的耐药性,用PCR方法检测各种耐药基因。结果2株菌对亚胺培南耐药,1株中介;所测菌均呈多重耐药性。23株菌均扩增到blaTEM和aacA4基因;22株菌检测到ampC基因,22株菌aacC1、aadA1基因为阳性,2株菌aphA1基因为阳性;2株菌blaPER基因为阳性,3株菌blaOXA-23型基因阳性。结论携带am-pC、blaPER、blaOXA-23、aacA4、aadA1等多种耐药基因是我院鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因。     

3株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌临床株耐药机制的研究

目的 研究鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）对碳青霉烯耐药的分子机制。方法 采用琼脂纸片扩散法（KB法）及微量肉汤法筛选出3株对碳青霉烯耐药的鲍曼不动杆菌临床株，PCR扩增blaox-23基因和测序、提取外膜蛋白及进行聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）。结果 3株耐碳青霉烯的鲍曼不动杆菌具有多重耐药性；耐药基因PCR扩增和测序证实3株耐药菌均有blaOX-23 基因；其中1株耐药菌AB173的外膜蛋白电泳条带在28．8ku处出现明显缺失，其余2株耐药菌在该条带处与敏感菌相比较无明显差异。结论 本次试验中对碳青霉烯耐药的鲍曼不动杆菌全部含有blaoxhm基因，其中一株耐药菌还出现了外膜蛋白孔道的缺失可能与其多重耐药性有关。     

Characterization of tetracycline and methicillin resistant Staphylococcus aureus strains in a Spanish hospital: Is livestock-contact a risk factor in infections caused by MRSA CC398?

Tetracycline-resistance (Tet^R) has been postulated as a marker of the livestock-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) lineage CC398. Objectives of the study: to determine the spa-types and assigned MLST clonal complexes (CCs) among all 98 MRSA-Tet^R strains recovered during 2011–2012 (from different patients) in a Spanish Hospital, analyzing the possible correlation with livestock-contact of the patients. All 98 strains were assigned to 9 CCs: CC398 (60.2%), CC1 (19.4%), CC5 (12.2%), and other CCs (8.2%). The 98 patients were classified into three groups: (A) contact with livestock-animals (n = 25); (B) no-contact with livestock-animals (n = 42); (C) no information about animal contact (n = 31). A significant higher percentage of CC398 strains was obtained in group A (76%) than in group B (50%) (p < 0.05), being the percentage in group C of 61.3%. Most of MRSA-Tet^R-CC398 strains presented a multi-resistance phenotype, including erythromycin, clindamycin, and ciprofloxacin, and the most prevalent detected genes were tet(M) and erm(C). Three strains presented the phenotype macrolide-susceptibility/lincosamide-resistance and contained the vga(A) gene. MRSA-CC1 strains showed higher percentages of erythromycin/clindamycin resistance (95%/89%) than MRSA-CC398 strains (58%/63%), and this resistance was usually mediated by erm(C) gene. Most of MRSA-CC5 strains showed resistance to ciprofloxacin, tobramycin/kanamycin and erythromycin. None of the strains presented the genes lukF/lukS-PV, tsst-1, eta, etb or etd. All MRSA-CC398 strains lacked the genes of the immune-evasion-cluster, but MRSA-CC1 strains carried these genes (type E). In conclusion, although MRSA CC398 is detected in a significant higher proportion in patients with livestock-contact; its detection in people without this type of contact also indicates its capacity for human-to-human transmission.     

鲍曼不动杆菌多重耐药与胞膜主动外排作用关系的研究

目的 观察外排泵抑制剂对多重耐药不动杆菌耐药水平的降低作用,并扩增外排泵蛋白编码基因,以探讨不动杆菌多重耐药与细胞膜主动外排作用的关系.方法 用琼脂稀释法测定30株鲍曼不动杆菌对环丙沙星、四环素、阿米卡星和亚胺培南的最小抑制浓度(MIC)值,并观察在含10μg/ml利血平或25μg/ml羰基氰氯苯腙(CCCP)条件下MIC值的变化.用PCR法扩增外排泵编码基因adeB.结果 以环丙沙星、四环素、阿米卡星和亚胺培南作为底物,分别有12、5、6、6株菌在10μg/ml CCCP或含25μg/ml利血平的条件下MIC值降低4倍或4倍以上.6、11、17号菌都同时对3种药物有明显的外排作用.以利血平和CCCP作为抑制剂所得的结果一致.18株菌经PCR扩增得到与目的片段大小一致的阳性片段,经测序证实与GenBank登录号为AF370885的鲍曼不动杆菌RND族药物外排泵编码基因adeB的同源性达99%.该序列已在GenBank登录,登录号为DQ2945294.结论 主动外排作用是鲍曼不动杆菌多重耐药的重要原因之一.     

多药耐药铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的检测

目的 分析多药耐药铜绿假单胞菌临床分离株中金属β-内酰胺酶的产生情况,并对其检测方法进行评价.方法 按Aloush等的推荐标准,用K-B法对临床分离的铜绿假单胞菌进行多药耐药株的筛选,双重底物双重酶抑制剂的纸片协同法对多药耐药的铜绿假单胞菌进行产金属β-内酰胺酶表型检测,用PCR方法进行金属β-内酰胺晦IMP、VIM基因型的检测.结果 1081株铜绿假单胞菌临床分离株中共筛选出192株多药耐药株;药敏结果显示,多药耐药株对环丙沙星和哌拉西林的耐药率最高,为92.5%,其次为氨曲南和复方新诺明,为91.5%.对多黏菌素全部表现为敏感;该192株多药耐药株中共检出67株金属β-内酰胺酶表型阳性,其中65株扩增出IMP或VIM基因.结论 多药耐药铜绿假单胞菌的耐药机制呈复杂化、多样化表现,临床实验室应加强对此类菌株产金属β-内酰胺酶的检测.