血清乳腺珠蛋白与乳腺癌的相关性及临床意义探讨

目的探讨血清人乳腺珠蛋白(hMAM)水平与乳腺癌早期诊断和癌微转移的相关性及其临床意义。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测68例乳腺癌患者、40例其他癌症患者(前列腺癌、胃癌、卵巢癌、直肠癌各10例)、35例良性乳腺疾病患者以及40名体检正常女性(正常对照组)血清hMAM水平并做比较。将68例乳腺癌患者按临床TNM分期、是否存在雌激素受体(ER)表达、是否有腋窝淋巴结转移以及是否绝经分别分组并做比较。通过受试者工作特征(ROC)曲线确定乳腺癌血清hMAM的Cut-off值。结果血清hMAM的ROC曲线下面积为0.825,即诊断乳腺癌的可信度为82.5%[95%可信区间(CI):72.6%~92.4%];当hMAM的Cutoff值为8.43 ng/mL时,敏感性和特异性分别为76.5%、82.9%。乳腺癌组血清hMAM水平及阳性率明显高于良性乳腺疾病组、其他癌症组和正常对照组(P0.05),而良性乳腺疾病组、其他癌症组和正常对照组之间差异均无统计学意义(P0.05)。Ⅲ和Ⅳ期乳腺癌患者的血清hMAM阳性率(55%、75%)明显高于Ⅰ和Ⅱ期患者(25%、40%,P0.05),但hMAM水平无差异(P0.05)。有腋窝淋巴结转移的乳腺癌患者血清hMAM阳性率(88%)明显高于无转移的患者(30%,P0.05),但hMAM水平无差异(P0.05)。不管乳腺癌患者血清中是否存在ER、原癌基因C-erb-2表达及是否绝经,其hMAM水平及阳性率均无差异(P0.05)。结论 hMAM的表达与乳腺癌临床分期和是否有腋窝淋巴结转移相关;检测乳腺癌高危人群血清hMAM水平有助于提高乳腺癌的早期诊断和癌微转移的早期发现。     

Risk Factors for Non-Sentinel Lymph Node Metastases in Patients with Breast Cancer. The Outcome of a Multi-institutional Study

Background In this multi-institutional prospective study, we evaluated whether we could identify risk factors predictive for non-sentinel lymph node (non-SN) metastases in breast cancer patients with a positive sentinel lymph node (SN). Methods In this multi-institutional study, 541 eligible breast cancer patients were included prospectively. Results The occurrence of non-SN metastases was related to the size of the SN metastasis (P = .02), primary tumor size (P = .001), and lymphovascular invasion (P = .07). The adjusted odds ratio was 3.1 for SN micro-metastasis compared with SN isolated tumor cells, 4.0 for SN macro-metastasis versus SN isolated tumor cells, 3.1 for tumor size (>3.0 cm compared with ≤3.0 cm), and 2.0 for lymphovascular invasion (yes versus no). There were no positive non-SNs when the primary tumor size was ≤1.0 cm (n = 24) [95% confidence interval (95% CI) 0%–14.0%]. The proportion of positive non-SNs ranged in a prognostic logistic regression model from 9.7% (95% CI 4.0%–23.0%) for patients with SN isolated tumor cells, tumor size of 1.1–3.0 cm, and without vessel invasion, to 72.6% (95% CI 47.0%–89.0%) for patients with SN macro-metastasis, tumor size >3.0 cm, and with vessel invasion. Conclusion We identified three predictive factors for non-SN metastases in breast cancer patients with a positive SN: size of the SN metastasis; primary tumor size; and vessel invasion. We were not able to identify a specific group of patients with a positive SN in whom the risk for non-SN metastases was less than 5%.     

PTEN抑癌基因在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌微小转移灶的关系

目的:研究PTEN抑癌基因在乳腺癌组织中的表达,探讨其与乳腺癌病人的外周血、骨髓及前哨淋巴结微小转移灶之间的关系。方法:选择53例乳腺癌病人的组织标本,用免疫组织化学方法检测原发肿瘤PTEN蛋白的表达;用定量RT鄄PCR法测定原发肿瘤PTENmRNA的表达。以免疫细胞化学法检测外周血和骨髓中的微小转移灶;HE染色和免疫组织化学法检测前哨淋巴结中的微小转移灶。结果:外周血、骨髓及前哨淋巴结中微小转移灶的检出率分别是24.5%,56.6%,26.4%和41.5%。乳腺癌组织中PTEN蛋白表达呈丢失者占35.8%,后者与外周血和骨髓微小转移灶间无显著关系,而与前哨淋巴结中的微小转移密切相关(P≤0.001)。PTENmRNA的表达与外周血、骨髓及前哨淋巴结中的微小转移灶之间均无显著相关性。结论:乳腺癌组织中PTEN蛋白表达的丢失与前哨淋巴结中的微小转移有密切关系,可作为预测其早期转移的重要指标。     

hnRNP A2/B1 mRNA在非小细胞肺癌和转移淋巴结中表达及意义

目的：探讨肺癌早期诊断基因核内不均一核糖体表达对肺癌淋巴结微转移的作用。观察hnRNP A2/B1 在各组织类型肺癌中的表达。方法：42例非小细胞肺癌患者开胸手术纵隔淋巴结清扫获取原发灶及纵隔淋巴结病理标本,12例肺良性病变手术切除标本作正常对照。荧光定量PCR检测切除肿块和淋巴结的hnRNP A2/B1 mRNA表达。结果：(1)转移性淋巴结中hnRNP A2/B1 mRNA 表达水平561.393显著高于无转移淋巴结156.669 (P＜0.05)。(2)Ⅲ期肺癌组织中hnRNP A2/B1 mRNA 表达水平305（249,533）显著高于Ⅰ期和Ⅱ期肺癌组织(2＝13.453,P＜0.01)。(3)hnRNP A2/B1 mRNA在鳞癌和腺癌中的表达水平分别为207(152,305)和249(177,476), Z=-0.899,P>0.05。(4)58组淋巴结阳性,84组阴性,42个病人142组区域淋巴结hnRNP A2/B1 mRNA阳性率为40.84%(58/142),12例肺良性疾病组织均阴性,HE染色42个病人的50组转移淋巴结阳性率为35.21%,与FQ-PCR 58枚（52.11%）无显著差异（P>0.05）。结论：NSCLC 癌组织存在着hnRNP A2/B1 的过度表达。NSCLC癌组织中hnRNP A2/B1表达水平与淋巴结转移状态及P-TNM 分期有关。 hnRNP A2/B1 检验敏感性、特异性高,可用于肺癌的辅助诊断的标记。     

膀胱尿路上皮癌患者外周血CK20、CD105及CD146表达的临床意义

目的检测膀胱尿路上皮癌患者外周血中血清肿瘤标志物CK20、CD105和CD146的表达,探讨CK20、CD105和CD146作为膀胱尿路上皮癌微转移指标的应用价值。方法采用流式细胞仪检测50例膀胱尿路上皮癌患者、30例健康志愿者外周血中CK20及CD105/CD146的表达情况。分析膀胱尿路上皮癌患者外周血中CK20及CD105/CD146的阳性表达率及其与临床病理学指标的关系;CK20及CD105/CD146在膀胱尿路上皮癌患者外周血中表达的相关性及联合检测的意义。结果CK20和CD105/CD146在膀胱癌组中的阳性表达率分别为28.0%和48.0%,其表达与肿瘤分期、病理分级、有无远处转移、肿瘤直径、病灶数量等相关（P〈0.05）,而与患者性别、年龄无相关性（P〉0.05）。患者中有10例同时出现CK20及CD105/CD146阳性表达,两者的表达有相关性（χ2=4.276,r=0.281,P〈0.05）。联合检测与单独检测CK20相比,阳性率有所提高,差异有统计学意义（P=0.005）;联合检测与单独检测CD105/CD146相比,阳性率差异无统计学意义（P=0.423）,但阳性率仍有提高。结论CK20及CD105/CD146对于预测膀胱尿路上皮癌微转移具有较高的敏感性。联合检测CK20及CD105/CD146与单项检测相比,具有更高的敏感性。CK20及CD105/CD146可以作为膀胱尿路上皮癌微转移早期诊断、早期治疗和预后判断的生物学指标。     

检测MUC-1 mRNA对诊断非小细胞肺癌患者外周血微转移的意义

背景与目的:粘蛋白家族,包括MUC-1,通常被认为是上皮组织及其来源的肿瘤的产物.理论上如果在间叶组织来源的血液中找到MUC-1 mRNA即意味着癌转移.本研究探讨MUC-1 mRNA作为分子指标检测非小细胞肺癌患者外周血微转移的可行性.方法:应用巢式RT-PCR技术检测60例非小细胞肺癌患者外周血中MUC-1基因的表达,并以15例肺良性疾病患者及20名健康人外周血作为对照,同时使用相同的方法,扩增非上皮细胞来源的细胞株K562,HL-60及上皮细胞来源的细胞株A549、MCF-7,以观察靶基因的表达情况.结果:病患组MUC-1 mRNA表达阳性率达80.0%(48/60).15例肺良性疾病患者及20例健康人外周血中MUC-1 mRNA表达阳性率分别为60.0%(9/15),65.0%(13/20),K562、HL-60及A549、MCF-7细胞株经巢式RT-PCR也可以扩增出靶基因的条带.结论:MUC-1 mRNA不是检测非小细胞肺癌外周血微转移的可靠指标.     

分析PSM-E和PSMA在预测前列腺癌生化复发中的价值

目的：分析前列腺特异性膜抗原（PSMA）及其新型剪接变异体（PSM-E）在预测前列腺癌患者生化复发上的作用。方法选取行前列腺癌根治术,影像学资料未提示转移而Gleason评分＞7分的局限性前列腺癌患者15例,荧光定量PCR检测PSM-E和PSMA在术前外周血及切出肿瘤组织中的RNA表达,分析外周血及组织中PSM-E和PSMA相对表达的差异。术后随访患者前列腺特异性抗原（PSA）的变化。结果 PSM-E和PSMA在前列腺癌组织中表达高于外周血,差异具有统计学意义（P＜0.01）。在前列腺癌组织中,PSM-E的表达明显低于PSMA;在前列腺癌患者的外周血中,PSM-E的表达明显高于PSMA,差异具有统计学意义（P＜0.01）。外周血PSM-E和PSMA表达阳性的患者术后生化复发率为66.7%（8/12）,远处转移率为25.0%（3/12）,均高于表达阴性的患者（0.0%,0/3）,3例远处转移者表现为骨转移。结论在前列腺癌患者中,外周血检测PSM-E与PSMA均能地作为预测前列腺癌生化复发的指标。     

乳腺癌细胞CD44V6的表达与淋巴结微转移

目的　探讨乳腺癌原发灶CD44V6的表达与淋巴结微转移及CD44V6,CEA和CK19在检测淋巴结微转移中的作用。方法　采用SP免疫组化染色法检测 10 5例乳腺癌原发灶CD44V6的表达及腋下淋巴结 (转移阳性 5 4例 ,阴性 5 1例 )CD44V6,CEA和CK19阳性表达检出率。结果　淋巴结转移阳性 5 4例 ,CD44V6,CEA和CK19阳性表达百分率分别为 85 2 % ,90 7%和 10 0 %。淋巴结阴性 5 1例 ,有CD44V6,CEA和CK19阳性表达百分率分别为 15 7% ,9 8%和15 7% ,三者共在淋巴结转移阴性 5 1例中检出有微转移病灶存在 13例。原发灶CD44V6阳性表达百分率为 74 3 % ,与腋下淋巴结转移有关 (χ2 =8 3 8,P <0 0 0 5 ) ,淋巴结转移灶CD44V6阳性表达百分率为 89 6%。结论　乳腺癌腋下淋巴结常规检查阴性病例 ,若原发灶表达CD44V6阳性 ,则行淋巴结CD44V6和CK19免疫组化检测 ,有助于淋巴结微转移灶的检出     

以CK20为标志物对乳腺癌微转移检测的研究

目的探讨乳腺癌微转移的标志基因。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法 ,检测了20例乳癌病人正常乳腺组织、癌组织、淋巴结、外周血、10例乳腺纤维瘤,10例非肿瘤病人淋巴结及外周血中细胞角蛋白19（CK19）、角蛋白20（CK20）的表达。结果乳癌组织、正常乳腺组织、转移淋巴结、纤维腺瘤中CK19、CK20均有很高的表达率。CK20在非肿瘤病人淋巴结和外周血中无表达,而CK19有40%表达。结论来源于上皮细胞的良、恶性肿瘤均遗留上皮细胞表达角蛋白的特征;CK20可以作为乳腺癌病人病理检查为非转移淋巴结和外周血中微小转移的标志基因,CK19则不适合。     

CD44v6 in peripheral blood and bone marrow of patients with gastric cancer as micro-metastasis

AIM:To detect the expression of CD44 correlated withthe ability of micro-metastasis in peripheral blood andbone marrow of patients with gastric cancer and to de-duce its clinical significance.METHODS:Preoperative peripheral blood and bonemarrow specimens from 46 patients with gastric cancerand 6 controls were studied by semi-quantitative RT-PCR amplification of CD44v6mRNA.Preoperative andpostoperative peripheral blood specimens from 40patients with gastric cancer and 14 controls were studiedby quantitative RT-PCR amplification of CD44v6rnRNA inthe corresponding period.RESULTS:Semi-quantitative RI-PCR amplificationshowed that CD44v6mRNA expression of peripheralblood and bone marrow was positive in 39 (84.8%)and 40 (86.9%) of 46 patients with gastric cancer,respectively.In peripheral blood,CD44v6mRNAexpression was positive for diffuse type in 30 (93.8%)of 32 patients and for intestinal type in 9 (64.3%)of 14 patients.On the other hand,in bone marrow,CD44v6mRNA expression was positive for diffuse typein 31 (96.9%) of 32 patients and for intestinal typein 10 (71.4%) of 14 patients.There was a significantdifference between the diffuse type and intestinal type.Quantitative RT-PCR amplification demonstrated thatCD44v6mRNA was not expressed in the peripheral bloodof controls and CD44v6mRNA expression was positivefor preoperative peripheral blood in 40 patients withgastric cancer,the expression levels being from 4.9×102 to 3.2×10~5 copies/g RNA.The average expressionlevel of CD44v6mRNA in peripheral blood was 3.9×10~(10) copies/g RNA.The expression levels of CD44v6mRNAin peripheral blood in gastric cancer patients aftercurative operation increased from 5.5×100 to 7.6×10copies/g RNA (P=0.00496).After curative operation,theexpression level decreased markedly.CONCLUSION:Semi-quantitative and quantitative RT-PCR amplification for CD44v6mRNA is a sensitive andspecific method for the detection of micro-metastasis inperipheral blood and bone marrow,which might be usedas an indicator of tumor burden and therapeutic effect.