LncRNA MIAT靶向miR-206促进食管鳞状细胞癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用研究

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)MIAT靶向微小RNA(miR)-206促进食管鳞状细胞癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用。方法 将食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞分为ctrl组(正常培养的ESCC细胞)、si-NC组、si-MIAT组、si-MIAT+miR-NC组和si-MIAT+miR-206 inhibitor组。实时qRT-PCR检测各组细胞MIAT、miR-206表达;CCK-8法检测细胞增殖情况;划痕实验检测细胞迁移能力;流式细胞术分析细胞凋亡情况;蛋白质印迹技术检测PCNA、MMP-9蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证MIAT和miR-206的关系。结果 与ctrl组、si-NC组比较,si-MIAT组ESCC细胞中miR-206表达、细胞凋亡率升高,MIAT、OD₄₅₀值(24、48、72 h)、划痕愈合率、PCNA和MMP9蛋白表达降低(P<0.05);干扰LncRNA MIAT表达能降低ESCC细胞增殖、迁移、侵袭能力,提高细胞凋亡能力,MIAT靶向调控miR-206表达。结论 干扰LncRNA MIAT表达能够阻滞ESCC...     

葛根素通过lncRNA TUG1或MIAT1抑制心肌肥厚进程的研究

目的:探讨葛根素治疗心肌肥厚的机制。方法:利用Ang II法建立心肌细胞肥厚模型,加入不同浓度葛根素处理24 h。采用细胞免疫荧光检测心肌细胞大小;Western blot法检测ANP(心房利钠肽)、BNP(B型钠尿肽)和β-MHC(β肌球蛋白重链)蛋白表达;荧光定量PCR检测lncRNA(CHRF、NEAT1、GAS5、MIAT、TUG1和SNHG1)表达水平。结果:和正常对照组相比,Ang II组心肌细胞显著增大(P <0.01),低、中、高3个浓度的葛根素均可以显著抑制心肌细胞增大的进程(P <0.05或0.01);Ang II组心肌细胞ANP、BNP和β-MHC的蛋白表达均显著升高(P <0.01),低、中、高3个浓度的葛根素均可以显著抑制其表达水平(P <0.05或0.01),并呈剂量依赖;Ang II组心肌细胞CHRF、NEAT1、GAS5、MIAT表达水平升高,而TUG1、SNHG1表达显著降低(P <0.01),低、中、高3个浓度的葛根素均可以显著促进TUG1的表达增加,抑制MIAT的表达(P <0.05或0.01)。结论:葛根素可能通过TUG1或者MIAT抑制心肌肥厚的进程。     

LncRNA MIAT靶向 miR-204对氧糖剥夺 /复氧诱导 PC12细胞损伤的保护作用

目的 探究氧糖剥夺/复氧（OGD/R）诱导大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株PC12细胞损伤的分子调控机制,以期为临床上靶向治疗缺血性卒中提供新的思路。方法 该研究于2021年6—12月进行,购买PC12细胞后对其进行OGD/R诱导,在诱导后的细胞中分别转染长链非编码RNA(LncRNA)心肌梗死相关转录本（MIAT）过表达载体及微RNA-204模拟物（miR-204mimic）,以对应的载体阴性对照（pcDNA3.1-NC）或模拟物阴性对照（mimic-NC）作为阴性对照,以未转染PC12细胞作为空白对照。使用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测LncRNA MIAT与miR-204的表达;CCK-8与流式细胞术分别检测细胞活力与凋亡;Elisa试剂盒检测炎性因子白细胞介素（IL）-6、IL-1β,抗炎性因子IL-10的表达。RNA下拉检测MIAT在miR-204上的富集;通过starbase预测LncRNA MIAT与miR-204的结合位点,随后采取双萤光素酶报告实验验证LncRNA MIAT与miR-204的靶向结合。结果 与空白对照组[1.011±0.113,1.00...     

长链非编码 RNA MIAT 在肾透明细胞癌中的表达情况和预后意义

目的 探讨长链非编码RNAMIAT在肾透明细胞癌中的表达情况及与患者临床指标的相关性,分析其作为肾透明细胞癌分子标记物的可能性。方法 通过荧光定量PCR方法 检测MIAT在40例肾透明细胞癌组织和40例癌旁正常组织中的表达情况,同时结合TCGA数据库分析MIAT表达水平与肾透明细胞癌患者临床指标和预后的关系。结果 MIAT在肾透明细胞癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织,在肾癌细胞系中的表达明显高于正常肾小管上皮细胞,差异均具有统计学意义（P<0.05）。TCGA数据库资料分析表明,MIAT表达水平与肾癌患者T分期（P<0.001）、M分期呈正相关（P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析表明,高表达MIAT的肾癌患者总体生存时间明显低于低表达MIAT的肾癌患者（Log-rankP<0.05）。结论 MIAT在肾透明细胞癌组织和肾癌细胞系中高表达,有可能成为肾透明细胞癌的分子标记物。     

长链非编码RNA MIAT通过miR-124促进鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的：探究长链非编码RNA MIAT是否通过miR-124调节鼻咽癌细胞增殖、迁移与侵袭。方法：采用荧光定量PCR检测鼻咽癌细胞中MIAT水平,通过检测荧光素酶活性评估MIAT和miR-124之间的相互作用。随后将si-MIAT与miR-124 inhibitor分别或同时转染鼻咽癌细胞,检测其对鼻咽癌细胞生长、迁移与侵袭的影响。采用Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白的表达情况。结果：与正常鼻咽上皮细胞NP-69相比,鼻咽癌细胞HONE-1中MIAT的表达水平显著提高。在线软件与双荧光素酶活性实验分析证实MIAT与miR-124之间存在相互作用。进一步实验表明,si-MIAT可上调miR-124水平,从而抑制鼻咽癌细胞增殖、迁移与侵袭。Western blot分析显示si-MIAT通过miR-124抑制Wnt/β-catenin信号通路在鼻咽癌细胞中发挥促癌作用。结论：MIAT通过miR-124调节Wnt/β-catenin信号通路进而影响鼻咽癌细胞增殖、迁移与侵袭。MIAT靶向调控miR-124,可作为鼻咽癌诊断与治疗的一个潜在靶点。     

Rs1894720 polymorphism is associated with the risk of age-related cataract by regulating the proliferation of epithelial cells in the lens via the signalling pathway of MIAT/miR-26b/BCL2L2

IntroductionCataracts caused by old age are one of the most frequent causes for blindness and poor vision worldwide. In this study, we aimed to clarify the possible role of rs1894720 polymorphism in the pathogenesis of age-related cataract.Material and methodsRs1894720 polymorphism genotype was detected by TaqMan. Bioinformatics analysis, luciferase assay, real-time PCR, western blot, and protein density analysis were conducted to establish the correlations between MIAT and miR-26b as well as between BCL2L2 and miR-26b. Flow cytometry and MTT assay were also performed to observe the effect of MIAT/miR-26b/BCL2L2 signalling pathway on the status of cell apoptosis and viability.ResultsMIAT functioned as an endogenous competing RNA to sponge miR-26b. In addition, BCL2L2 was identified as a target of miR-26b. Therefore, the expression of miR-26b was obviously suppressed by MIAT or anti-miR-26b, while the mRNA and protein expression of BCL2L2 was up-regulated in the presence of MIAT or anti-miR-26b. Moreover, the positive effect of MIAT on BCL2L2 expression was exerted via inhibition of the expression of miR-26b. In addition, the cells transfected with MIAT or anti-miR-26b showed suppressed expression of caspase-3 and reduced apoptosis index but higher cell viability, indicating that MIAT could suppress cell apoptosis via inhibition of miR-26b expression. Furthermore, the subjects carrying the GT and TT genotypes of single-nucleotide polymorphism (SNP) rs1894720 were associated with a higher risk of age-related cataracts, as indicated by their odds ratio (OR) and p-values.ConclusionsRs1894720 SNP could down-regulate the expression of MIAT, thus leading to reduced BCL2L2 expression and enhanced epithelial cell apoptosis in the lens, eventually increasing the incidence of age-related cataract.