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1.
2.
Infectious laryngotracheitis is a significant respiratory disease of chickens that causes huge economic losses due to high morbidity and mortality and reduced egg production. A real-time recombinase polymerase amplification (RPA) assay was developed to accurately detect ILTV. The specific probe and primer sets were carefully designed and screened. The real-time RPA assay was carried out at 39 °C for 30 min, and results were obtained within 15 min. The results of the specificity assay showed no fluorescence signals with other avian-related viruses. The sensitivity of the assay was 1 × 102 copies/μL. The low CV value showed that the assay was reproducible. A total of 115 clinical samples were tested using the real-time RPA assay and the real-time PCR assay in parallel; the coincidence rates of the two detection methods were 100%. The results indicated that the real-time RPA assay is a specific, sensitive, rapid, and useful tool for epidemiological studies and clinical diagnosis, especially in the field and in resource-poor areas. 相似文献
3.
目的分析一腓骨肌萎缩症家系的临床表现及不同基因检测方法的特点。方法收集一CMT家系8名成员临床资料,并应用等位基因特异性PCR-双酶切方法及多重连接依赖的探针扩增技术(MLPA)检测PMP22基因突变情况,同时选择60名性别、年龄无明显差异的健康人做为对照组。结果该家系中患病者以行走不稳、跨阈步态,伴有弓形足为主要临床表现。该家系中5名成员经等位基因特异性PCR-双酶切及MLPA方法均检测出PMP22基因重复序列,其中出现临床症状的有4名(Ⅱ3、Ⅱ9、Ⅱ11、Ⅲ7),未出现临床症状但基因检测结果示PMP22基因重复序列的为携带者有1名(Ⅲ5),家系中余3名成员及对照组60名均未见重复序列。结论基因检测在明确CMT诊断中起重要作用,且MLPA法筛查基因时操作更简便、灵敏度更高、特异性更好。 相似文献
4.
人端粒酶RNA的cDNA探针制备及其对胃粘膜细胞端粒酶RNA表达的检测 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 建立人端粒酶RNA表达的检测方法。方法 制备人端粒酶RNA,(human telomeraseRNA,hTR)的cDNA探针,分别应用RNA斑点杂交与端粒重复序列扩增法(TRAP)分析检测不同胃粘膜的端粒酶RNA的表达与端粒酶活性。结果 人端粒酶RNA的cDNA探针制备成功。18例活检胃癌组织及45例手术胃癌组织RNA斑点杂交检测的阳性率均为l00%,相应TRAP分析的阳性率分别为88.89%、86.67%,低于RNA斑点杂交(P<0.05)。同时RNA斑点杂交结果提示在非癌胃组织中随着肠化程度增高人端粒酶RNA表达也增强。结论 RNA斑点杂交检测人端粒酶RNA,具有高度的敏感性和特异性,弥补了TRAP分析敏感性不足的缺点。 相似文献
5.
6.
采集23名产妇的脐带血和8名正常成人的外周血制备LAK细胞,随机分为4组,在培养第3,5,7,14天,分别利用MTT法和^125I-UdR释放法对4组LAK细胞的增殖力和杀伤活性进行了测定,同时用细胞毒方法测定培养7天的LAK细胞的免疫表型。结果发现,在不同培养时间,脐血来源的LAK细胞增殖力显著高于成人血LAK细胞(P〈0.05或P〈0.01),成人血清组,脐血血清组,红细胞组LAK细胞增殖力有 相似文献
7.
目的:研究中国汉族群体中α艾杜糖苷酶基因D4S111位点的遗传多态性。方法:采用扩增片段长度多态性(AmpFLP)分析技术,检测了广州地区汉族无血缘关系健康个体97名。结果:D4S111位点,在97名无关个体中发现5个等位基因和9种基因型,等位基因片段长度为830~510bp,基因频率为00052~03608,PIC为05966,杂合性为078。结论:中国汉族群体中D4S111位点具有高度多态性,并与其它种族间存在差异性。 相似文献
8.
致倦库蚊有机磷抗性相关扩增酯酶B基因的多样性 总被引:5,自引:0,他引:5
本实验从佛山和成都两地的致倦库蚊群体中筛选出3个酯酶类型不同的有机磷(OP)抗性品系,FS-1、FS-2和CD-1品系。各品系的酯酶基因B扩增水平、酯酶活性和OP抗性水平三者一致。各品系酯酶B基因限制性酶切片段比较分析表明,我国的OP抗生库蚊群体中不仅有世界性分布的酯酶B1和B2,而且在佛山和成都地区各有一个新的独立扩增的酯酶B,分别命名为B6和B7。 相似文献
9.
Beeri Rachel; Gnatt Averell; Lapidot-Lifson Yaron; Ginzberg Dalia; Shani Moshe; Soreq Hermona; Zakut Haim 《Human reproduction (Oxford, England)》1994,9(2):284-292
Gene amplification occurs frequently in tumour tissues yet is,in general, non-inheritable. To study the molecular mechanismsconferring this restraint, we created transgenic mice carryinga human butyrylcholinesterase (BCHE) coding sequence, previouslyfound to be amplified in a father and son. Blot hybridizationof tail DNA samples revealed somatic transgene amplificationswith variable restriction patterns and intensities, suggestingthe occurrence of independent amplification events, in 31% (11/35)of mice from the FII generation but in only 3.5% (2/58) of theFII and FIV generations. In contrast, >10-fold amplificationsof the BCHE transgene and the endogenous acetylcholinesteraseand c-raf genes appeared in both testis and epididymis DNA from>80% of FIII mice. Drastic, selective reductions in testisBCHEmRNA but not in actin mRNA were detected by the PCR amplificationof testis cDNA from the transgenic mice, and apparently resultedin the limited transmission of amplified genes. The testicularamplification of the BCHE transgene may potentially representa general phenomenon with clinical implications in human infertility. 相似文献
10.
应用对应于Dystrophin基因缺失热区的二对PCR引物和一对内对照无关引物,在同一反应体系中扩增,检测66例DMD/BMD患者。发现其中25例存在17号或49号外显子缺失,与同时采用cDNA探针杂交检测出的35例基因缺失相比.检出率达71.4%。说明该扩增系统能够作为快速筛查缺失型DMD/BMD患者的有效手段。这对指导合理选用探针,尤其在产前诊断方面,具有重要意义。 相似文献