新生大鼠大脑皮质星形胶质细胞纯化及培养方法的改进

目的快速纯化大鼠大脑皮质原代星形胶质细胞并进行传代培养。方法取新生2日龄SD大鼠大脑皮层,每2只为一组,将剥除软脑膜的大脑皮层剪碎,添加0. 25%胰蛋白酶-EDTA溶液500μL,37℃消化15 min,将细胞悬液接种于未用多聚赖氨酸处理过的培养瓶中,37℃、5%CO_2细胞培养箱中孵育15 min后,将细胞以5×10~6个/m L接种于L-多聚赖氨酸包被的T75培养瓶中。待细胞长满瓶底,200 r/min 37℃恒温摇18 h,加入1 m L 0. 25%胰蛋白酶,待大部分细胞悬浮后收集细胞。在倒置相差显微镜下对细胞进行形态学观察,胶质纤维酸性蛋白免疫荧光染色法进行星形胶质细胞纯度鉴定,并以MTS法测定传代后细胞增殖活力。结果星形胶质细胞纯度达到(97. 86±0. 91)%,细胞传代后生长情况及增殖活力良好。结论该方法可以高效获取原代及传代的大鼠大脑皮质星形胶质细胞。     

孕期血清IL-6与胎膜早破、绒毛膜羊膜炎相关性研究

目的探讨孕妇血清白细胞介素-6(IL-6)与胎膜早破及绒毛膜羊膜炎的关系.方法选择2004年1月～2005年3月在广州花都区人民医院分娩的胎膜早破孕妇50例和正常孕妇50例,采用ELISA法测定血清中IL-6水平,分娩时取胎盘胎膜组织作病理检查.结果胎膜早破孕妇血清中IL-6水平明显高于对照组(P<0.05),并随着破膜时间延长,孕妇血清IL-6水平有增加趋势;有绒毛膜羊膜炎者血清IL-6水平高于无绒毛膜羊膜炎者及对照组(P<0.05).结论血清IL-6水平升高对诊断胎膜早破合并绒毛膜羊膜炎有重要意义.     

超声诊断双胎输血综合征1例

患者女,29岁。孕2流1,停经17周例行产前检查。其夫家族中有多胎妊娠史。超声显示:宫内大小不一的双胎,小胎儿死亡,沉于宫底。大胎儿可见胎动及胎心搏动,头皮及胸腹壁组织水肿,胎心率143次/分,律齐,心胸比0.41,三尖瓣关闭不全,三尖瓣-右房大量花束样返流,肠间隙可见积液的无回声区。脐动脉:S/D:4.5;RI:0.78;PI:1.34。大小胎儿径线测值对比:双顶径36/29mm;头围121/103mm;腹围133/85mm;股骨长20/14mm;估计体重189/97g;估计孕周17周/15周。两胎儿共用一胎盘,大胎儿(受血儿)侧胎盘厚径33mm,内部回声稍增强;小胎儿(供血儿)侧胎盘厚径20mm,内部…     

大鼠胚胎神经干细胞两种不同分离、传代方法的比较

目的体外培养大鼠胚胎神经干细胞(NSCs),比较不同分离、传代方法对其生长的影响。方法取怀孕15d的大鼠,分别用机械分离法和含0.01%EDTA的胰蛋白酶消化法分离海马区细胞,均以1×106/mL的活细胞密度接种到无血清的NSCs培养基中培养,分离纯化至P5代。以含10%胎牛血清(FBS)和2%多聚赖氨酸的DMEM/F12诱导分化,免疫细胞化学鉴定。结果机械分离组获得的活细胞及培养后的神经干细胞球数目明显多于胰蛋白酶消化组,其细胞贴壁率却高于胰蛋白酶消化组。取神经干细胞球及诱导分化后的细胞作免疫细胞化学染色鉴定,细胞分别呈Nestin、β-tubulin-Ⅲ、GFAP和O4阳性反应。结论大鼠胚胎海马区有NSCs存在,离体培养时能分裂增殖,并能被诱导分化。机械分离法和胰蛋白酶消化法各有利弊,可以根据实验情况交叉采用两种不同的分离方法,以稳定高效地培养出NSCs。     

异常妊娠

061482 米非司酮和利洛司酮对人早孕绒毛、蜕膜分泌功能的影响;061483 类胰岛素样生长因子结合蛋白1—3介导孕激素在人孕早期的作用；061484 脂源性细胞因子与子痫前期关系的研究；061485 子痫前期患者血脂代谢调节的探讨；061486子 痫前期患者血清瘦素及可溶性瘦素受体水平变化及临床意义。     

MNNG诱导日本血吸虫成虫培养细胞的扫描电镜观察

目的 观察甲基硝基亚硝基胍(MNNG)对不同培养时间日本血吸虫成虫培养细胞作用的变化，确定培养细胞发生转化进而增殖的最佳诱导时间。方法 将23～28d虫龄的日本血吸虫成虫制成细胞悬液，接种于小盖玻片上，培养于含20％小牛血清及常量抗生素的RPMI-1640常规培养基中。将接种培养第4、5、6、7、8d的细胞分别设为5个实验组及其相应的对照组。实验组用含终浓度为3μg／ml MNNG的常规培养基处理48h，对照组用不含MNNG的常规培养基处理相同时间，嗣后换用常规培养基培养4周，再改用含5％小牛血清的培养基继续培养。MNNG诱导后每周取各组培养细胞固定、制样，每组随机取3张小盖玻片进行电镜扫描观察，连续取样11周。结果 经MNNG诱导的日本血吸虫成虫培养细胞表面出现形态各异的结构，既有与对照组类似的表面较光滑和有乳突的培养细胞，也有表面光滑如玻璃珠状的细胞，还有具长纤突、微嵴、皱褶、微绒毛、蜂窝和仙人球状等形态的细胞；实验1组培养至第5周即出现大量分裂细胞。结论 MNNG诱导培养第4d的日本血吸虫成虫细胞培养至第5周可发生转化而出现分裂、增殖。     

涎腺上皮细胞培养及其应用

涎腺上皮细胞体外培养为研究其分化，形态，功能及其在物理，化学，生物等因素影响下生理，病理改变提供了一个理想的实验模型。本文就涎腺上皮细胞培养系统建立的条件，表型鉴别，应用及展望进行综述。     

高危妊娠患者早孕绒毛染色体分析

高危妊娠患者早孕绒毛染色体分析韩维田，曲鸥我们对有自发性流产可能的高危妊娠患者行绒毛染色体检查，并分析其染色体异常的发生率、类型作者单位：１１００３１沈阳辽宁省计划生育科学研究所及危险因素，现报告如下。一、材料与方法１．资料来源：患者来自沈阳市第四、...     

氨对重组中国仓鼠卵巢细胞生长及人红细胞生成素表达的影响

氨对重组中国仓鼠卵巢（CHO）细胞的生长具有明显的抑制作用，并遵循二级抑制模型，抑制常数Ka为41．5（mmol/L)^2，即当氨浓度为6．45mmol/L时，细胞的比生长速率下降到最大比生长速率的50％，在重组CHO细胞的批培养过程中，细胞密度和红细胞生成素浓度随着起始氨浓度的提高而下降，但存在一最适的氨浓度，在此浓度下，单位重组CHO细胞的EPO比生成速率最大。     

大鼠皮质神经元的体外培养和纯化

目的：探讨大鼠皮质神经元分离纯化的有效方法。方法：取胎鼠大脑皮质细胞，分别在不同的培养液中进行原代培养，利用相差显微镜对培养的细胞进行动态观察；并以免疫细胞化学技术对神经元进行染色。结果：在相差显微镜下可见加用N2添加剂和胎牛血清培养的神经元生长良好，胞体形态多样，突起数目多，长度长，与邻近神经元的胞体或突起形成接触，而胶质细胞则大量死亡，神经元纯化率达94％以上，未加用N2添加剂培养的神经元胶质细胞大量存在，神经元纯化率达50％左右。结论：N2添加剂和胎牛血清联合应用可使大鼠皮质神经元得到良好的生长和有效纯化。