应用电泳技术分析飞行员富含三酰甘油脂蛋白亚组分及其代谢特征

目的 分析富含三酰甘油脂蛋白(TRLs)分子组成及其代谢特征.方法应用脂蛋白电泳技术,对30例飞行员空腹和脂肪负荷餐后血浆做脂蛋白分析,以扫描图面积表示各亚组分构成,观察脂蛋白亚组分变化特点.结果 30例飞行员TRLs清除延迟发生率46.67%.TRLs分子脂蛋白亚组分由极低密度脂蛋白(VLDL)、中密度脂蛋白(IDL)、低密度脂蛋白(LDL)、乳糜微粒(CM)和脂蛋白a[LP(a)]组成.TRLs清除延迟典型扫描图特征为LDL左侧区面积增高,呈双峰或多峰.LDL、VLDL区面积增高,伴有高密度脂蛋白(HDL)面积降低.结论 高三酰甘油血症致动脉粥样硬化作用是在代谢水平异常所致的TRLs清除延迟,TRLs清除延迟是核心环节.     

尿液蛋白定量、凝胶电泳、NAG酶联合检测对肾病的诊断价值

尿液的生化检验已广泛应用于临床,某些生化指标能很好地反映肾脏病变的性质.作者对51例健康成人、64例肾病患者、47例其他疾病患者的尿液标本进行了24 h尿蛋白定量、凝胶电泳及NAG酶的检测观察,以了解其对肾病患者的诊断价值.     

精浆蛋白电泳分析的临床意义

目的为了初步了解男性精浆中的蛋白电泳谱以及蛋白谱与男性生育能力的相关关系。方法通过应用SPIFE3000全自动电泳分析仪对20例对照组(生育组)与140例观察组(不育组)的精浆进行蛋白分离(琼脂糖区带电泳法),建立其精浆蛋白质的特征电泳图谱,并进行对比分析。结果精浆蛋白经酸蓝染色后,区带清晰,从阳极到阴极分为A、B、C、D、E 5条带,电泳各区带百分比含量结果经方差分析,发现不育组与生育组A、C、D、E百分比含量变化有统计学意义(P<0.01),且无精子症患者精浆的蛋白谱有特异的"双峰"特点。结论精浆蛋白区带电泳分析可作为不育症的辅助诊断指标,且将是对男性不育诊断手段的有力补充。     

菲啰啉对不同氧化剂和多柔比星所致CHL细胞DNA链断裂的影响

目的 为了研究菲啰啉对2种氧化剂和抗癌药多柔比星诱发细胞DNA损伤的影响, 并初步探讨其损伤机制。方法 用不同浓度菲啰啉预处理CHL细胞30 min, 再分别加入3种不同染毒受试物,共同培养一定时间(0.3 mmol·L^-1重铬酸钾：105 min； 0.5 μmol·L^-1多柔比星：5 min； 0.4 mmol·L^-1过氧化氢(H₂O₂)：25 min)后, 用碱性单细胞凝胶电泳方法(ASCGE)测定DNA链断裂情况, 并同时以菲啰啉与二甲亚砜(DMSO，0.33 mol·L^-1)比较对H₂O₂致DNA损伤中·OH的产生和清除。结果 3种染毒受试物均可明显引起CHL细胞DNA链断裂；而当3 μmol·L^-1菲啰啉预处理后, 可使重铬酸钾、H₂O₂所致DNA迁移长度和细胞拖尾率明显降低, 并超过DMSO降低H₂O₂的损伤作用, 当菲啰林浓度升至12 μmol·L^-1时, 可完全消除这两种因素所致的DNA链断裂损伤；10 μmol·L^-1菲啰啉可抑制多柔比星所致DNA损伤, 但浓度直至60 μmol·L^-1仍不能完全消除多柔比星的损伤作用。结论 菲啰啉对2种氧化剂和多柔比星所致DNA损伤均有不同程度的防护作用,同时提示重铬酸钾和H₂O₂所致的DNA损伤主要与需过渡金属离子参与的·OH产生有关, 而多柔比星所致损伤仅部分与此有关。     

核因子-κB活化与结肠直肠癌临床病理关系研究

目的探讨核因子-κB(NF-κB)活化与结肠直肠癌临床病理的关系.方法应用凝胶电泳迁移率改变分析(EMSA)检测50例结肠直肠癌、30例结肠直肠腺瘤和20例正常大肠组织NF-κB的结合活性,并结合临床病理学资料评估其相互关系.结果结肠直肠癌和结肠直肠腺瘤分别与正常结肠直肠组织比较,NF-κB结合活性明显增高,差异有显著性(P<0.05);结肠直肠癌和结肠直肠腺瘤比较,NF-κB结合活性差异无显著性(P>0.05).NF-κB的活化与结肠直肠癌患者的性别、病变部位、组织类型、淋巴结转移和Dukes分期均无显著相关(P>0.05).结论结论NF-κB活化与结肠直肠癌的发生有关,可作为结肠直肠癌早期指标之一.     

猪蛔虫不同发育期幼虫的收集方法研究

目的研究猪蛔虫不同发育期幼虫的收集方法。方法采用7.5%次氯酸钠氧化感染期蛔虫卵,37℃过夜后,用灭菌生理盐水离心数次,充分洗去次氯酸钠,将沉淀用玻璃珠在振荡器上振荡至全部卵壳破裂,幼虫孵出。用淋巴细胞分离液通过密度梯度离心法将幼虫与卵壳分离,最后收集底层的脱鞘第三期(L3)幼虫。在贝尔曼原理的基础上,在漏斗中加入低浓度(0.4%)琼脂凝胶,分别将绞碎的含幼虫的猪肝、肺和小肠内容物及其肠粘膜平均分装在数个漏斗中,放入40℃温箱中孵育3h,待大部分幼虫游离到管底,最后用400目分样筛过滤分离肝中的L3,用300目分样筛过滤分离肺中的L3,用200目分样筛过滤分离肠内容物及其粘膜上的第四期幼虫(L4)。结果次氯酸钠氧化加玻璃珠震荡法能够使感染期蛔虫卵几乎完全脱壳,配合淋巴细胞分离液的密度梯度离心法能收集到纯度较高且活力较强的体外脱鞘幼虫。与传统贝尔曼氏分离法相比,采用低浓度琼脂糖凝胶液能获得杂质少、高纯度的猪内脏中的不同发育期幼虫。结论次氯酸钠氧化加玻璃珠震荡法是体外脱鞘分离感染期幼虫的一种较为理想的方法,通过在漏斗内加低浓度的琼脂凝胶的方法是从猪内脏中获得高纯度的不同发育期幼虫的一种有效的方法。本方法不仅适用于猪蛔虫,而且对其它动物和人的寄生线虫幼虫的收集也有参考价值。     

以ECHO克隆系统构建人生长激素的哺乳动物表达载体

目的：构建ECHO克隆系统构建人生长激素的哺乳动物表达载体，以克服原核生物表达系统生产人生长激素存在的缺陷。 方法：实验于2002．08在解放军广州军区广州总医院医学实验科进行。①先把人生长激素基因片段克隆到ECHO系统的供载体中，构建供载体pUni／Lox-HGH。②让该供载体与具Lox位点的受载体在Cre重组酶的作用下融合，构建出人生长激素的哺乳动物表达载体pcDNA4．1／pUni-HGH，使人生长激素基因处于CMV启动子的调控下，EcoRl单酶切及BarnHI／EcoRI双酶切鉴定重组质粒。 结果：由琼脂糖凝胶电泳和序列测定证实，用ECHO克隆系统构建的融合质粒中，确实含有人生长激素带内含子的基因序列。 结论：用ECHO克隆系统可以构建人生长激素的哺乳动物表达载体，且方便、快捷，为取代原核生物表达系统生产人生长激素，提供了依据。     

金纳米棒制备、修饰及与寡核苷酸适配子的耦联

目的金纳米棒的制备、修饰及与寡核苷酸适配子的耦联。方法利用种子调制生长法制备了金纳米棒,采用化学桥联方法对金纳米棒进行m-SH-PEG修饰及与靶向定位乳腺癌细胞的寡核苷酸适配子的耦联。结果成功制备了金纳米棒,以CTAB包裹的金纳米棒表面光滑、尺寸均一、分散性和稳定性良好;Zeta电位检测表明m-SH-PEG已成功修饰金纳米棒,琼脂糖电泳证实寡核苷酸适配子与金纳米棒成功耦联。结论成功地进行了金纳米棒的制备、修饰及与寡核苷酸适配子的耦联。     

血细胞彗星电泳在遗传毒性评价中的应用(英文)

目的:用彗星实验检测不同种类化学物在单细胞水平上DNA的损伤情况。方法:体外彗星实验。结果:L-4氧代赖氨酸及10-羟基喜树碱不能直接引起DNA的损伤。ST1435剂量高达4mmol·L~(-1)时才能对DNA产生损伤。二甲基亚砜,作为一种常用溶剂,当其浓度小于2％时,不增加对DNA的损伤,但当浓度≥4％时,可产生具有剂量-效应关系的DNA损伤。博莱霉素和丝裂霉素对DNA有强的剂量-效应关系。结论:慧星实验作为检测可疑化合物遗传毒性的工具,具有快速,灵敏,简单,重复性好及价廉的优点。