微生态制剂对溃疡性结肠炎的治疗效果及作用机制研究

目的探讨微生态制剂对溃疡性结肠炎（UC）的治疗效果及其作用机制。方法前瞻性入组2007年5月至2010年6月间新乡医学院第一附属医院收治的60例UC患者。按随机数字表法分为金双歧组、畅美组和联合组（金双歧联合畅美）,每组各20例。分别予以金双歧2．0g口服、2次／d,畅美1．0g口服、3次／d,及两种药物联合应用,疗程为24个月。治疗前及治疗后24个月对各组患者进行临床症状评分、内镜分级评分以及结肠炎性反应评分;并通过免疫组织化学染色和酶联免疫双抗体夹心法分别检测结肠黏膜及血清中的白细胞介素IO（IL-10）含量。结果联合组患者治疗后24个月,临床症状评分（12．5±2．1比2．3±0．8,P=O．016）、内镜分级评分（3．02±0．17比0．25±0．13,P=O．032）和炎性反应评分（2．63±0．19比0．77±0．16,P=O．028）均显著优于治疗前;而金双歧组和畅美组治疗前后各项评分的差异均无统计学意义（均P〉O．05）。联合组患者治疗24个月时,IL．10在结肠黏膜中的阳性表达率[85％（17／20）比55％（11／20）,P=O．038]和在血清中的表达水平f（17．4±2．2）ng／L比（12．8±2．2）ng／L,P=O．015]均显著高于治疗前;而金双歧组和畅美组治疗前后IL．10表达水平的差异均无统计学意义（均P〉O．05）。结论金双歧联合畅美治疗UC疗效肯定,其治疗作用可能与促进IL-10表达升高有关。     

内毒素诱导新生大鼠肺损伤及地塞米松的保护作用

目的 腹腔注射内毒素（lipopolysaccharide，LPS）致新生大鼠急性肺损伤（acute lung injury，ALI），观察ALI不同时期应用地塞米松（dexamethasone，Dex）对肺损伤和TNF-α、IL-10的影响，为临床选择糖皮质激素应用时机提供理论依据。方法 57只健康7日龄Wistar大鼠制备新生大鼠内毒素血症模型，取9只模型鼠腹腔注射LPS（5mg／kg）后光镜下观察有无ALI病理改变。取剩余48只模型鼠随机分为：LPS组（n=16）：模型鼠腹腔注射LPS（5mg／kg）；LPS后1h地塞米松干预组（LPS1h＋Des组）（n=16）：经腹腔注射LPS（5mg／kg）后1h注射Dex（5mg／kg）；LPS后2h地塞米松干预组（LPS2h＋Des）（n=16）：腹腔注射LPS（5mg／kg）后2h注射Dex（5mg／kg）。另外10只非模型鼠作为对照组：经腹腔注射等量的0．9％氯化钠溶液0．1ml。每组均于注射后12h断颈处死，留取部分血液进行血气分析，并测定肺组织TNF-α和IL-10含量，观察肺组织形态改变。结果 地塞米松干预组大鼠病死率低于LPS组，2h组（6．25％）低于1h组（25．0％）；肺组织病理改变LPS2h＋Des组较LPS组有明显改善。实验组pH值、PaO2和PaCO2均低于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）；与LPS1h＋Dex组[分别为6．88±0．06，（6．61±0．84）kPa和（7．43±0．71）kPa]相比，LPS2h＋Dex组pH值7．23±0．12、PaO2[（7．92±0．75）kPa]升高，而PaCO2[（6．93±0．69）kPa]降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。LPS1h＋Dex组TNF-α含量为（14．89±3．36）pg／mg，IL-10含量为（0．20±0．05）pg／mg；LPS2h＋Dex组TNF—α含量降低，为（10．54±3．43）pg／mg；IL-10含量升高，为（0．31±0．07）pg／mg，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论 LPS可诱导新生大鼠肺损伤，导致TNF-α增高，IL-10水平降低，提示新生动物发生ALI／ARDS预后不良；在应用地塞米松治疗时应考虑到新生动物ALI／ARDS病理变化发展进程，适时应用，以免发生免疫功能抑制。     

银杏叶提取物联合泼尼松治疗对特发性肺间质纤维化患者血浆TNF-α、IL-10的影响

目的 观察银杏叶提取物联合泼尼松治疗对特发性肺间质纤维化患者血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素10(IL-10)的影响,从细胞因子角度探讨银杏叶提取物治疗特发性肺间质纤维化的机制.方法 将70例特发性肺间质纤维化随机分为两组,银杏叶提取物+泼尼松组(观察组)32例、泼尼松组(对照组)38例,分别于治疗前1天及治疗后4、8周清晨采集两组空腹静脉血并处理、留存标本,对各标本中的TNF-α,IL-10浓度进行定量检测.结果 两组治疗前各检测指标差异均无统计学意义(P＞0.05);治疗后4周两组各指标均较前升高,同期相比观察组TNF-α水平较对照组低,但差异无统计学意义(P＞0.05),IL-10水平亦较对照组低,差异有统计学意义(P＜0.01);治疗后8周,两组各指标较前进一步升高,同期相比,观察组TNF-α、IL-10水平均较对照组低,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 银杏叶提取物联合泼尼松较单独应用泼尼松能更好地治疗特发性肺间质纤维化,其机制可能与抑制TNF-α、IL-10的产生有关.     

IL-10基因单核苷酸多态性与福建地区非贲门胃癌的相关性研究

目的探讨白细胞介素10（interleukin10，IL-10）启动子区3个位点（IL-1082／-819／-592）的单核苷酸多态性、Mpylori感染与福建地区非责门胃癌之间的相关性。方法采用PCR和直接测序分析来检测IL-10基因多态性；采用胃黏膜快速尿素酶实验检测幽门螺旋杆菌。结果①IL-10．1082位点：胃癌组中A／A型（17．4％）、A／G型（26．4％）、G／G型（9．4％）与对照组相比有统计学意义（P〈0．05）。②IL-10-592位点与IL-10-819位点：胃癌组中C／C基因型（44．8％），C／A基因型（31．2％），A／A基因型（24％）与对照组相比无统计学意义（P〉0．05）。③胃癌患者IL-10-1082、IL-10-592和IL-10-819等位基因分布在H．pylori感染阳性组与阴性组之间，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论①IL-10-1082A等位基因与福建地区胃癌发生相关。②IL—10—819／592等位基因与胃癌发生无相关。③IL-10．1082位点、IL-10-819／-592位点等位基因与执pylori感染之间无相关。     

IL-10启动子基因在云南傣族、哈尼族人群中的遗传多态性

目的 分析云南省西双版纳地区傣族和哈尼族人群IL-10启动子基因多态性的分布情况.方法 运用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术检测傣族和哈尼族人群IL-10启动子rs1800871和rs 1800896位点基因型及等位基因频率.结果 傣族与哈尼族人群rs1800871和rs1800896位点基因型与等位基因分布频率显著不同,差异有统计学意义(rs1800871:x2分别为7.023和7.373,P分别为0.030和0.007; rs 1800896:x2分别为6.184和5.870,P分别为0.013和0.015).结论 IL-10启动子rs1800871和rs1800896多态性位点基因型和等位基因分布频率具有民族、种族差异.     

白介素10基因启动子多态性与广西壮族系统性红斑狼疮的关系

目的 探讨广西壮族人白介素10(IL-10)基因启动子区单核苷酸多态性与广西壮族SLE的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测90例SLE患者和110例正常对照者IL-10基因启动子-1082A/G、-819T/C和-592A/C位点基因型.结果 IL-10基因-819T/C和-592A/C多态性在SLE组和正常人群中的分布差异无统计学意义(P>0.05),而IL-10基因-1082A/G多态性在两组人群中的分布差异有统计学意义(P<0.05),基因型频率的相对风险分析发现,AG基因型携带者患SLE的风险是AA基因型的2.076倍(OR=2.076,95%CI:1.052～4.100);基因单倍型分析发现,GCC单倍型携带者显著增加了SLE的发病风险.结论 白介素10基因启动子-1082A/G多态性和它的单倍型与SLE具有相关性,其中-1082G等位基因可能是SLE的遗传易感基因.     

白介素10对伴放线放线杆菌内毒素诱导兔肺巨噬细胞凋亡的影响

目的：探讨白介素10（IL-10）对伴放线放线杆菌内毒素（Aa—LPS）体外诱导兔肺巨噬细胞凋亡作用的影响。方法：经兔气管肺泡灌洗获得肺泡巨噬细胞,随机分为空白对照组、Aa—LPS组、Aa—LPS＋IL-10组。按实验分组加入Aa—LPS（1汕g／mL）、IL-lo（o．1p．g／mL）,24h后裂解细胞,荧光定量PCR法检测促凋亡基因bax、p53和caspase-3的表达。结果：Aa—LPS组bax、caspase-3的表达较空白对照组明显升高（P〈0．05）,p53的表达与空白对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。Aa—LPS＋IL-10组bax、p53、caspase．3的表达较Aa—LPS组降低（P〈0．05）。结论：Aa—LPS体外对肺巨噬细胞有促凋亡作用,IL-10可抑制Aa—LPS的促凋亡作用,其机制可能与细胞凋亡的线粒体途径有关。     

调节性B细胞与自身免疫性疾病

以往认为,B细胞通过产生特异性抗体提呈抗原产生共刺激分子活化T细胞、并通过细胞因子发挥免疫作用.但是近年来研究发现,B细胞对免疫应答和炎性反应有调节作用,这种B细胞被命名为调节性B细胞(Br).Br通过分泌调节性的细胞因子IL-10和TGF-β影响B细胞和致病性T细胞之间的相互作用而抑制病理性免疫反应.因而了解Br的生物学功能、活化机制以及在自身免疫性疾病中的作用具有重要意义.     

持续吸入变应原引起支气管哮喘小鼠免疫耐受

目的探讨吸入变应原引起支气管哮喘(简称哮喘)过敏性气道炎症免疫耐受形成的机制。方法BALB/c小鼠60只,按随机数字表法分为实验组(50只)和空白对照组(10只),实验组小鼠先给予腹腔注射卵清白蛋白(OVA)1mg,每周1次,共3周。雾化吸入OVA每天1h(含OVA80μg),连续10d。依据吸入OVA时间分为A、B、C、D、E5组,每组10只。A组雾化吸入10d后处死。B、D组继续每天1次,每次1h,每周5次,分别吸入OVA4周及8周,然后每天1h,连续10d吸入OVA后处死。C组停止吸入OVA4周后再次吸入OVA,每天1h,连续10d后处死。E组每天1次,每次1h,每周5次,吸入OVA4周,停止雾化吸入OVA4周,然后每天1h,连续10d吸入OVA后处死。测定各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数,嗜酸粒细胞、淋巴细胞、CD4+、CD8+、CD4+IL-10+分类及BALF中白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)、IL-10的含量。测定血清中IL-4、IFN-γ、IL-10、OVA、IgE、IgG1、IgG2a水平,并对各组小鼠肺组织病理学进行分析。结果空白对照组BALF中嗜酸粒细胞、B淋巴细胞、CD4+IL-10+细胞分别为0.010±0.000、2.1±1.9、4.9±1.5,A组分别为0.480±0.110、5.1±2.6、5.1±2.3,B组分别为0.120±0.020、8.9±3.6、10.4±3.6,C组分别为0.560±0.050、4.7±1.7、6.3±3.1,D组分别为0.070±0.030、10.1±2.9、12.7±4.5,E组分别为0.680±0.030、5.6±3.2、6.1±3.4,各组间比较差异有统计学意义(F值分别为36.46、31.89、167.89,P均<0.01)。B、D组BALF中CD4+IL-10+细胞数与A组比较差异有统计学意义(q=5.8、6.4,P均<0.05);空白对照组BALF中IL-4、IL-10水平分别为(21±3)pg/ml、(44±12)pg/ml,A组分别为(128±23)pg/ml、(68±18)pg/ml,B组分别为(54±12)pg/ml、(127±27)pg/ml,C组分别为(133±21)pg/ml、(78±17)pg/ml,D组分别为(8±18)pg/ml、(135±34)pg/ml,E组分别为(143±26)pg/ml、(76±15)pg/ml,组间比较差异有统计学意义(F分别为37.20、143.78,P均<0.01)。B、D两组BALF中IL-10水平与A组比较差异有统计学意义(q分别为7.8、9.6,P均<0.05)。结论持续吸入变应原可使小鼠气道炎症减轻,产生免疫耐受,调节T淋巴细胞产生的IL-10参与了耐受形成。     

Seven amino acid peptide mimic from HVR1 of HCV influences cytokine profile of immune cells

Objective： To investigate the actions of cytokine profile in the immune cells by a seven amino acid peptide mimic from HVR1 of HCV （GQTYTSG, named 7P）. Methods： The peripheral blood mononuclear cells （PBMCs） from 17 healthy blood donors were stimulated with 7P, and the cytokine levels in CD4＋CD8-,CD4-CD8＋ T cells, NK, NKT cells were analyzed by the intracellular cytokine staining. Results： The frequency of cells which secreted interferon-γ （IFN-γ） was found to be significantly increased in all cells, interleukin-10（IL-10） was significantly increased in CD4＋CD8 , CD4 CD8＋ T cells but decreased in NK, NKT cells, and tumor necrosis factor-α （TNF-α） was decreased in CD4＋CD8- , CD4 CD8＋ but increased in NK cells. Conclusion： 7P could induce a cytokine profile in different immune cells in vitro and there was some difference between the CD4＋CD8- ,CD4 CD8＋ T cells which represented the adaptive immunity cells and NK, NKT cells which represented the innate immunity cells.This kind of variation of cytokine profile might contribute to anti-virus and anti-inflammatory immune reaction.