全文获取类型
收费全文 | 671篇 |
免费 | 48篇 |
国内免费 | 59篇 |
专业分类
耳鼻咽喉 | 1篇 |
儿科学 | 3篇 |
妇产科学 | 4篇 |
基础医学 | 196篇 |
口腔科学 | 2篇 |
临床医学 | 37篇 |
内科学 | 165篇 |
皮肤病学 | 15篇 |
神经病学 | 57篇 |
特种医学 | 7篇 |
外科学 | 73篇 |
综合类 | 103篇 |
预防医学 | 7篇 |
眼科学 | 4篇 |
药学 | 26篇 |
1篇 | |
肿瘤学 | 77篇 |
出版年
2023年 | 3篇 |
2022年 | 10篇 |
2021年 | 18篇 |
2020年 | 11篇 |
2019年 | 10篇 |
2018年 | 11篇 |
2017年 | 14篇 |
2016年 | 19篇 |
2015年 | 23篇 |
2014年 | 23篇 |
2013年 | 35篇 |
2012年 | 18篇 |
2011年 | 33篇 |
2010年 | 37篇 |
2009年 | 37篇 |
2008年 | 32篇 |
2007年 | 38篇 |
2006年 | 28篇 |
2005年 | 37篇 |
2004年 | 37篇 |
2003年 | 40篇 |
2002年 | 31篇 |
2001年 | 22篇 |
2000年 | 33篇 |
1999年 | 15篇 |
1998年 | 20篇 |
1997年 | 29篇 |
1996年 | 25篇 |
1995年 | 16篇 |
1994年 | 13篇 |
1993年 | 7篇 |
1992年 | 9篇 |
1991年 | 6篇 |
1990年 | 10篇 |
1989年 | 2篇 |
1988年 | 6篇 |
1987年 | 2篇 |
1986年 | 3篇 |
1985年 | 6篇 |
1984年 | 4篇 |
1983年 | 3篇 |
1982年 | 1篇 |
1981年 | 1篇 |
排序方式: 共有778条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
2.
《Cancer cell》2021,39(11):1497-1518.e11
3.
转hCTLA4Ig树突状细胞诱导T细胞免疫耐受的实验研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 通过逆转录病毒载体将人CTLA4Ig转染DCs ,探讨转人CTLA4Ig(hCTLA4Ig)树突状细胞 (DCsRev)诱导T细胞免疫耐受的可能性。方法 通过重组逆转录病毒将目的基因hCTLA4Ig转染到大鼠骨髓来源的DCs中 ,通过流式细胞检测目的基因hCTLA4Ig表达及DCs表面分子的改变 ;通过混合淋巴细胞反应 (MLR)检测DCsRev抑制T细胞免疫反应的能力。 结果 重组逆转录病毒转染DCs的最大效率为 91 2 5 % ;在功能上 ,DCsRev不但丧失了刺激MLR的能力 ,并且能够强烈抑制MLR中反应T细胞的增殖 ,而且抑制率与加入DCsRev的数量和DCsRev预处理反应T细胞的时间长短有关。具体来说 ,DCsRev数量在 10 3 ~ 10 4之间时 ,抑制率与剂量呈正相关 ,最高为 71 96%。而当DCsRev数量达到 5× 10 4抑制率下降为 5 9 2 %。在 12~ 48h之间 ,随着预处理时间的延长 ,抑制率却不断下降 ,预处理 12h抑制率最高 ,为 99 6%。但不做预处理 ,在反应开始时同时加入DCsRev ,则抑制率明显降低 ,仅为 5 9 2 %。对腹腔注射DCsRev大鼠脾T淋巴细胞体外分析表明 ,DCsRev也能在动物体内诱导耐受 ,但这种免疫耐受状态不能维持终身。结论 通过逆转录病毒载体将人CTLA4Ig转染DCs,不但DCs表面CD86分子被CTLA4Ig有效的封闭 ,并且能够诱导抗原特异性T细胞的免疫耐受 相似文献
4.
5.
6.
目的:研究重组小鼠干细胞逆转录病毒载体介导基因转染,探索一条高效基因转染的途径,为重组小鼠干细胞逆转录病毒载体在基因转染中的应用提供理论依据和奠定实验基础。方法:①逆转录病毒载体的构建:EC1-4(repeats1-4ofcadherin-5extracellulardomains)基因克隆产物和mutant(Ser222A)MEK1基因克隆产物,Bg1Ⅱ和EcoRⅠ限制性内切核酸酶切割后,克隆进入逆转录病毒表达载体pMSCV。②CD41+细胞的获取和细胞培养:从脐带血分离的CD34+细胞通过TPO诱导表达CD41,FACS分离CD41+细胞。高糖DMEM培养液培养NIH3T3和MDA-MB-435细胞,U937细胞培养在RPMI-1640培养液,UT7细胞是细胞因子依赖性细胞株,Iscove'smodifiedDulbeco's培养液中加入GM-CSF。③测定病毒滴度:逆转录病毒载体转入包装细胞293,36h后收集病毒上清液,感染NIH3T3细胞,流式细胞仪测定病毒滴度。④Westernblot:基因转染CD41+、UT7、U937和MDA-MB-435细胞,Westernblot检测基因产物的表达。结果:293细胞产生高滴度MEK1pMSCV病毒:3.1×107,高滴度EC1-4pMSCV病毒:1.0×108。用稀释8倍的病毒转染基因,重组逆转录病毒MEK1pMSCV转染白血病细胞株UT7和U973,GFP阳性细胞(转染阳性细胞)分别是60.73%、72.56%。重组逆转录病毒MEK1pMSCV转染原代培养细胞CD41+,GFP阳性细胞为30.57%。重组逆转录病毒EC1-4pMSCV转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-435,GFP阳性细胞为97.54%。TPO作用CD41+和UT7细胞以及血清对U973细胞的作用,显示出外源mutationMEK基因的dominantnegative的效应,实验组磷酸化的MEK1减少。EC1-4基因转染的MDA-MB-435细胞表达了EC1-4基因产物。结论:重组小鼠干细胞逆转录病毒载体能高效基因转染CD41+、UT7、U937和MDA-MB-435细胞,转染的基因能稳定地表达。 相似文献
7.
Expression of antigen reactive with a monoclonal antibody to HTLV-1 P19 in salivary glands in Sjögren''s syndrome. 下载免费PDF全文
W G Shattles S M Brookes P J Venables D A Clark R N Maini 《Clinical and experimental immunology》1992,89(1):46-51
To examine the possible involvement of retroviruses in Sjögren's syndrome (SS), labial salivary gland sections from 99 individuals were probed with three MoAbs to core (gag) proteins of human T cell leukaemia virus-1 (HTLV-1) and two MoAbs to HIV-1. Sections from 31% of 39 patients with primary SS (pSS) contained an epithelial cytoplasmic protein reactive with a MoAb(197) to the p19 group specific antigen (gag) of HTLV-1. The antigen was also detected in samples from 24% of 17 patients with rheumatoid arthritis (RA) and SS. 21% of 14 patients with sicca symptoms and 12.5% of 16 patients with other connective tissue diseases. It was not found in the salivary glands of 13 normal controls. A second MoAb to p19 gag, a MoAb to the p24 gag of HTLV-1 and MoAbs to HIV-1 p17and p24 gags gave negative reactions. Serum antibodies to HTLV-1 were negative, confirming that the antigen was not part of HTLV-1. The antigen showed properties consistent with an endogenous retrovirus in that it was absent in healthy tissues or resting cells but inducible by stimulation with phytohaemagglutinin (PHA) or interferon-gamma (IFN-γ) It appeared to be distinct from the endogenous retroviral sequence HRES-1. These data suggest the presence of an endogenous retrovirus in salivary gland epithelium which could contribute to the chronic inflammation of SS. 相似文献
8.
Variable Regions 1 and 2 (VR1 and VR2) in JSRV gag Are Not Responsible for the Endogenous JSRV Particle Release Defect 总被引:4,自引:0,他引:4
Jaagsiekte sheep retrovirus (JSRV) is a betaretrovirus causing ovine pulmonary adenocarcinoma, a transmissible lung tumor of sheep. A very closely related endogenous retrovirus (enJSRV) occurs as 15 to 20 copies in the genome of all sheep, and is not known to be linked to pathogenesis. We previously localized a particle release defect of the full-length endogenous-derived expression construct pCMV2enJS56A1 to the amino-terminal region of gag that incorporates the two variable regions VR1 and VR2, which harbor the main sequence differences between endogenous and exogenous JSRV in this part of gag. Here, we tested the hypothesis that either or both of these variable regions are responsible for the observed particle release defect in enJS56A1. We found that the PPPPPPPS motif of the exogenous VR1 is neither necessary nor sufficient for particle release. Furthermore, the precise substitution of VR1 and VR2 in the exogenous JSRV expression plasmid pCMV2JS 21, using their enJS56A1-derived counterparts, did not abrogate the ability of the resulting constructs to release particles. The particle release defect of enJS56A1 is therefore not determined exclusively by either VR1 or VR2. These results point to a small number of amino acids lying outside of VR1 and VR2 that may be responsible for the particle defect of enJS56A1 Gag. 相似文献
9.
10.
目的:构建受AFP顺式作用元件调控的超抗原表达载体,将SEA(D227A)特异性的表达于AFP阳性肝癌细胞膜表面。方法:PCR扩增AFP基因启动子、增强子、linker—CD80tm和SEA(D227A)。将上述片断插入逆转录病毒载体pLXSN的多克隆位点,构建AFP基因顺式作用元件调控的肝癌特异性减毒超抗原表达载体(pLXSN SEA(D227A)—linker—CD80tm)。通过脂质体介导,以表达载体转染表达或不表达AFP的肿瘤细胞系,用RT—PCR和间接免疫荧光染色,检测SEA的表达。结果:成功地将AFP基因的启动子、增强子、linker—CD80tm和SEA(D227A)克隆到逆转录病毒载体pLXSN的多克隆位点,酶切鉴定和DNA序列分析无误,RT—PCR和间接免疫荧光法检测证实,SEA(D227A)能在AFP阳性的肝癌细胞膜特异性表达。结论:AFP顺式作用元件修饰的超抗原表达载体的构建,为下一步用其强化肝癌的免疫治疗奠定了基础。 相似文献