脊柱裂动物模型制作与胚胎发生机制探讨

目的 建立大鼠隐性脊柱裂和显性脊柱裂畸形动物模型，观察丙戊酸钠和维甲酸诱导大鼠脊柱裂畸形的特点，初步探讨脊柱裂畸形的发生机制。方法 雌性Wistar孕鼠随机分成组：对照组，实验组分成丙戊酸钠三个不同剂量组和维甲酸组。对照组孕鼠不予任何处置，20d胎鼠脊柱染色标本采集图像经计算机软件显微图像分析，测量出每个椎体椎弓两个软骨端距离，目的确定软骨端距离参考值。雌性Wistar大鼠，在确定怀孕的第9d9：00、16：00，按体重计算剂量后于后肢皮下注射20％丙戊酸钠溶液。妊娠第20d剖宫，检查胚胎外观，判定是否有外观可见畸形，然后取脊柱进行骨和软骨双重染色，染色后标本采集图像测量出每个椎体椎弓两个软骨端距离。参照正常胎鼠确定的参考值判定隐性脊柱裂。Wistar大鼠确定怀孕的第10d9：00，胃管灌入维甲酸矿物油混悬液135mg／kg(40mg／m1)，妊娠第20d剖宫，检查胚胎外观判定显性脊柱裂畸形发生情况并记录。结果 丙戊酸钠诱导隐性脊柱裂畸形随药物剂量加大，畸形发生率升高，丙戊酸钠剂量400mg／kg、450mg／kg、500rng／kg~导畸形发生率分别是80％、93％、100％，腰椎对丙戊酸钠的致畸作用最敏感；丙戊酸钠还可以导致头端神经管畸形，未观察到显性脊柱裂的发生。维甲酸135rng／kg诱导胎鼠显性脊柱裂的发生率52．3％，畸形都发生在腰骶段，其他畸形的总发生率高达90．7％。结论 丙戊酸钠抑制软骨细胞增生，影响椎体的软骨发生使椎弓不能闭合导致胎鼠隐性脊柱裂的发生。腰椎对丙戊酸钠的致畸作用最敏感，隐性脊柱裂多发生在腰骶段。过量的维甲酸直接影响神经上皮细胞、神经嵴细胞、原基器官间质细胞的生化过程和尾端未分阶段的中胚层，导致胚胎尾端发育不良综合症复杂畸形出现。丙戊酸钠和维甲酸通过不同机制导致畸形的发生。     

乌苯美司下调c-myc表达与其增强全反式维甲酸诱导NB4细胞

目的： 了解氨肽酶抑制剂乌苯美司（bestatin）能否增强全反式维甲酸（ATRA）对NB4细胞的诱导分化作用，及此过程中NB4细胞c-myc mRNA表达水平的改变。 方法： MTT法检测药物抑制细胞生长的作用。流式细胞仪测细胞表面分化抗原CD11b及四氮唑蓝（NBT）还原实验检测NB4细胞的分化。RT-PCR检测细胞c-myc mRNA表达水平。 结果： 50 mg/L、75 mg/L、100 mg/L乌苯美司与10 nmoL/L ATRA联合处理72 h，均能明显增强NB4细胞的NBT还原能力，与10 nmoL/L ATRA组差异显著（P<0.05，P<0.01）。从48 h到96 h，100 mg/L乌苯美司时间依赖性地增强10 nmoL/L ATRA诱导NB4细胞的NBT还原能力，与相应时点10 nmoL/L ATRA组差异明显（P<0.01）。100 mg/L乌苯美司与10 nmoL/L ATRA联合应用72 h，NB4细胞CD11b表达率明显高于10 nmoL/L ATRA组（P<0.01）。50 mg/L、75 mg/L、100 mg/L乌苯美司与10 nmoL/L ATRA联合处理4 h，NB4细胞c-myc mRNA表达水平明显低于单用ATRA组（P<0.05，P<0.01）；药物联合应用各组NB4细胞的c-myc mRNA表达水平与NBT还原能力之间呈负相关（r=-0.917,P<0.05）。 结论： 乌苯美司可能通过下调NB4细胞c-myc mRNA的表达，从而增强ATRA诱导NB4细胞分化的作用。     

全反式视黄酸对体外培养的人体大隐静脉内膜平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的研究全反式视黄酸(atRA)对体外培养的人体大隐静脉内膜增厚、平滑肌细胞增生与凋亡的影响。方法30小段(1 cm长)人体大隐静脉(HSV),随机分成HSV组、atRA组和对照组(n=10),atRA组和对照组均体外培养14 d。atRA组:培养液中含atRA100μM;对照组:培养液中含同等量无水酒精(atRA溶剂)。对HSV组及培养后的atRA组、对照组标本进行取材固定,M asson染色,免疫组化测定增殖细胞核抗原(PCNA)及TUNEL法检测平滑肌细胞凋亡,计算机图象分析仪测量血管内膜厚度、计算内膜增生指数及细胞增殖和凋亡百分比。结果体外培养人体大隐静脉能产生明显的内膜增生和平滑肌细胞增殖(P<0.05);atRA组内膜厚度、增生指数及PCNA阳性细胞百分数均明显低于对照组(P<0.05)。而凋亡细胞百分数则明显高于对照组(P<0.05)。结论atRA可以抑制体外培养人体大隐静脉内膜增厚及平滑肌细胞增生,促进平滑肌细胞凋亡。     

全反式维甲酸治疗急性早幼粒细胞白血病耐药机制的研究进展

 全反式维甲酸（ATRA）治疗急性早幼粒细胞白血病（APL）的耐药机制至今还未完全清楚,它涉及到很多方面的学说,其中基因、蛋白质以及细胞信号传导途径等方面的研究目前越来越成为科学家们研究的热点。     

全反式维甲酸对急性早幼粒细胞白血病TNF和IL-6活性的影响

目的检测急性早幼粒细胞白血病（APL）患者经过全反式维甲酸治疗后血清和白细胞胞质内肿瘤坏死因子（TNF）和白细胞介素-6（IL-6）活性水平的变化与意义。方法TNF活性应用传统的生物学结晶紫法测定。采用IL-6依赖细胞株MH60-BSF2进行IL-6的生物学活性的测定。半固体琼脂法检测白血病集落（L-CFU）和粒一巨噬细胞系集落（GM-CFU）数量变化。结果治疗前的APL患者血清TNF和IL-6活性水平均高于对照组的相应水平（P〈0．01）。白细胞（WBC）升高期的血清TNF和IL-6活性出现降低趋势，但只有IL-6的变化具有统计学意义（P〈0．05）。完全缓解后的APL患者血清TNF和IL-6活性明显下降（P〈0．05），但仍然高于正常对照的相应水平（P〈0．05）。治疗前WBC胞质TNF和IL-6活性平均水平明显高于对照组，尤其是WBC高峰时胞质TNF活性升高更加明显（P〈0．05），缓解时胞质TNF活性明显降低。但在治疗过程中胞质IL-6活性轻度降低，没有明显的统计学意义（P〉0．05）。相关性分析结果表明，血清TNF和IL-6活性的变化与APL患者外周血WBC数量无明显相关性（P〉0．05），血清TNF变化与骨髓L-CFU数量明显相关（P〈0．05）。结论全反式维甲酸治疗虽然影响APL患者血清TNF和IL-6水平，但与该组患者的外周血WBC数量变化无线性关系。     

SHH/BMP4信号在肛门直肠畸形肠神经系统发育中的作用研究

目的研究不同类型先天性肛门直肠畸形(ARM)胎鼠直肠末端肠神经系统(ENS)发育程度,探讨SHH/BMP4在其发育过程中的作用。方法利用全反式维甲酸(ATRA)诱导大鼠产生肛门直肠畸形胚胎,孕20d剖宫取胎,应用免疫组织化学方法检测对照组和高、低位ARM组直肠末端神经元特异性烯醇化酶(NSE)及骨形态发生蛋白4(BMP4)的表达;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组直肠末端SHH/BMP4mRNA的表达差异。结果对照组肠壁肌间及黏膜下神经丛可见NSE和BMP4抗体染色阳性细胞,ARM高位组与ARM低位组、对照组比较,阳性细胞的平均光密度(MOD)值明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);ARM低位组和对照组相比,阳性细胞的MOD值略降低,差异有统计学意义(P<0.05)。在ARM直肠末端SHH和BMP4基因表达呈正相关(P<0.01,r=0.884),对照组与ARM组相比较,BMP4和SHHmRNA的表达水平明显高于ARM组,差异均有统计学意义(P<0.05),不同ARM组之间比较,高位ARM组的表达水平显著减弱低于低位ARM组,差异也有统计学意义(P<0.05)。结论①不同类型ARM胎鼠直肠末端ENS发育程度存在差异,不仅与闭锁的位置密切相关,还可能与BMP4基因的表达水平有关。②过量的ATRA可能抑制了SHH/BMP4信号表达,干扰了直肠ENS的正常发育。     

Niosomes as carriers for tretinoin. II. Influence of vesicular incorporation on tretinoin photostability

In this work, we compared the chemical stability of tretinoin (TRA) in methanol and in vesicular suspensions exposed both to UV and artificial daylight conditions with the aim of evaluating the potential of niosomes as topical carriers capable of improving the stability of photosensitive drugs. Tretinoin-loaded niosomes were prepared from polyoxyethylene (4) lauryl ether (Brij^® 30), sorbitan esters (Span^® 40 and Span^®60) and a commercial mixture of octyl/decyl polyglucosides (Triton^® CG110). Liposomes made from hydrogenated (P90H) and non-hydrogenated (P90) soy phosphatidylcholines were also prepared and studied. In order to evaluate the influence of vesicle structure on the photostability of tretinoin, TRA-loaded vesicles were prepared by the film hydration method, extrusion technique and sonication. After UV irradiation, TRA dissolved in methanol degraded very quickly while the incorporation in vesicles always led to a reduction of the photodegradation process. The photoprotection offered by vesicles varied depending on the vesicle structure and composition. After fluorescent light irradiation for 21 days, not all the studied vesicular formulations improved TRA stability when compared with the free drug in methanol. Tretinoin incorporated in P90 or Span vesicles presented a half-life shorter or very close to that of the free drug. However, the inclusion of TRA in P90H liposomes and Brij^® 30 or Triton^® CG110 niosomes retarded the drug photodegradation.     

复方维甲酸软膏联合白芍总苷胶囊治疗斑纹型口腔扁平苔藓半年疗效观察

目的 观察复方维甲酸软膏与白芍总苷胶囊联合应用治疗斑纹型口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)的临床疗效.方法 临床纳入120例OLP患者,采用随机数法随机均分为3组,试验组局部使用复方维甲酸软膏及口服白芍总苷胶囊;对照1组局部使用复方维甲酸软膏;对照2组口服白芍总苷胶囊.3个月及6个月时观察临床疗效及复发情况.试验过程中未按时复诊或出现严重不良反应的患者不纳入统计分析.结果 试验结束时共有107例患者纳入统计分析,3组年龄及男女比例差异均无统计学意义.用药3个月时试验组治疗总有效率为78％(29/37),显著优于对照2组[56％(19/34),x2=4.094,P=0.043],但与对照1组[75％ (27/36)]相比差异无统计学意义(x2 =0.117,P=0.733);用药6个月时试验组总有效率为86％(32/37),显著优于对照1组[64％(23/36),x2=4.303,P=0.038]及对照2组[62％(21/34),x2=5.722,P=0.017],3组的复发率差异均无统计学意义.结论 联合应用复方维甲酸软膏与白芍总苷胶囊可有效控制斑纹型OLP的临床病损及不适症状.     

2种方法治疗痤疮的疗效比较

目的观察强脉冲光联合抗生素治疗痤疮的疗效。方法125例中重度痤疮患者根据患者自愿选择治疗方式分为治疗组83例、对照组42例，治疗组强脉冲光联合局部使用抗生素治疗；对照组单纯维A酸药物治疗。治疗时间分别为各组1个疗程，治疗后观察2组的临床疗效情况。结果治疗组有效率高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论强脉冲光联合局部使用抗生素治疗痤疮有较好的临床疗效。