LPS的直接诱导对肺微血管内皮细胞IL-8的表达及对PMN趋化作用影响的研究

目的探讨LPS的直接诱导作用对肺微血管内皮细胞(PMVEC)IL -8表达的影响及诱导发生的PMVEC对多形核中性粒细胞 (PMN)趋化作用的影响。方法100ng/mlLPS刺激PMVEC0、1、2、4、6、8h或1、10、100ng/mlLPS刺激6h,ELISA和原位杂交试验分别检测培养液上清中分泌的IL -8及PMVEC内IL-8mRNA的表达 ,同时琼脂糖平板法检测对PMN的趋化作用 ,并通过抗IL -8的抗体抑制试验观察对趋化作用的影响。结果LPS能显著促进PMVEC表达IL -8 ,包括促进IL-8mRNA的表达及IL -8的分泌。在时间上mRNA的表达先于IL -8分泌。LPS能促进PMVEC对PMN的趋化 ,随刺激作用的持续 ,诱导的PMVEC对PMN的趋化作用加强。抗IL -8抗体能显著抑制对PMN的趋化作用(P<0.01)。结论表明细菌致病因子LPS的直接诱导确能促进PMVEC高效表达和分泌IL -8 ,从而为PMN的迁移提供必需的物质条件,发挥对PMN的趋化作用而参与导致肺损伤。     

LPS的直接诱导对肺微血管内皮细胞ICAM-1的表达及对PMN黏附作用影响的研究

目的探讨内素毒(Endotoxin LPS)的直接诱导作用对肺微血管内皮细胞(PMVEC)ICAM-1表达的影响及诱导发生的PMVEC对多形核中性粒细胞(PMN)黏附作用的影响。方法100ng/m l LPS刺激PMVEC 0、2、4、6、8 h或10、50、100 ng/m l LPS刺激6 h,同时检测PMVEC ICAM-1的表达(免疫细胞化学法)、PMVEC-PMN黏附率及抗ICAM-1抗体对黏附作用的影响,并进行PMVEC与PMN黏附作用的扫描电镜观察。结果LPS的直接刺激可诱导PMVEC ICAM-1的表达增加,且表现为随LPS刺激的时间、剂量增加而增加;同时LPS直接刺激也促进了PMVEC对PMN的黏附率增加,其变化在时间与方式上几乎与ICAM-1的表达增加同步。Anti-ICAM-1抗体可以显著地抑制LPS诱导的PMVEC-PMN黏附(P<0.01)。扫描电镜可以直观地显示PMVEC-PMN黏附的超微结构表现,并且首次通过这种方式观察到了“间接系链”现象的存在。结论表明细菌致病因子LPS的直接诱导可以促进PMVEC表达ICAM-1,从而为PMVEC-PMN的黏附提供物质基础,而“间接系链”的发生更扩大和巩固了黏附效果。     

肺微血管内皮细胞IL-8的表达及NF-κB调控机制的研究

目的 探讨脂多糖（LPS）的直接诱导作用对肺微血管内皮细胞（PMVEC）IL-8表达的影响及通过核因子κB（NF-κB）的调控机制。方法 以100ng/ml LPS刺激PMVEC 0、0．5、1、2、4、6、8h或1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml LPS刺激1h或6h为检测时相点，ELISA、原位杂交试验分别检测的培养液上清中分泌的IL-8及PMVEC内IL-8mRNA的表达；凝胶电泳迁移率分析（EMSA）检测NF-κB的活化；并观察NF-κB活化抑制对IL-8表达的影响。结果 LPS能显著促进PMVEC表达IL-8，包括促进IL-8mRNA的表达及IL-8的分泌。在时间上mRNA的表达先于IL-8分泌。且LPS的直接诱导能迅速活化NF-κB，1h达到高峰，后逐渐下降。PDTC能显著抑制NF-κB的活化及IL-8的表达（P〈0．01）。结论 表明细茵致病因子LPS的直接诱导确能通过促进NF-κB的活化，从而启动IL-8的高效表达和分泌，为多形核中性粒细胞（PMN）的迁移提供必需的物质条件，导致肺损伤。     

LPS直接诱导对肺微血管内皮细胞IL-8表达的影响及通过核因子κB调控机理的研究

目的 探讨LPS的直接诱导作用对肺微血管内皮细胞(PMVEC)IL-8表达的影响及通过核因子ΚB(NF-ΚB)的调控机理。方法 以100ng/ml LPS刺激PMVEC 0,0.5,1,2,4,6,8h或1,10,100ng/mlLPS刺激1 h或6 h为检测时相点,ELISA、原位杂交试验分别检测的培养液上清中分泌的IL-8及PMVEC内IL-8mRNA的表达;凝胶电泳迁移率分析(EMSA)检测NF-ΚB的活化;并观察NF-ΚB活化抑制对IL-8表达的影响。结果 LPS能显著促进PMVEC表达IL-8,包括促进IL-8mRNA的表达及IL-8的分泌,在时间上mRNA的表达先于IL-8分泌;且LPS的直接诱导能迅速活化NF-KB,1h达到高峰,后逐渐下降。PDTC能显著抑制NF-KB的活化及IL-8的表达(P<0.01)。结论 表明细菌致病因子LPS的直接诱导确能通过促进NF-B的活化,从而启动IL-8的高效表达和分泌,为多形核中性粒细胞(PMN)的迁移提供必需的物质条件,导致肺损伤。