黄芪对SHR心肌SERCA表达及血管平滑肌钙离子水平影响的初步探讨

目的:探讨黄芪注射液对SHR心肌SERCA的表达及血管平滑肌钙离子含量的影响.方法:将19只自发性高血压大鼠(SHR)与16只Wistar-kyoto大鼠(WKY)随机各分为空白对照组、低黄芪剂量组、中黄芪剂量组、高黄芪剂量组四组,分别每天腹腔注射0.9ml生理盐水和0.9ml、1.2ml、1.8ml的黄芪注射液共8周,再测量大鼠心肌中SERCA的表达和血管平滑肌钙离子含量.结果:SHR生理盐水组心肌SERCA在蛋白水平的表达,较WKY生理盐水组明是下降;SHR大剂量黄芪组心肌SERCA在蛋白水平的表达,较SHR生理盐水组明显升高.SHR生理盐水组血管平滑肌钙离子水平明显高于WKY组:SHR大剂量黄芪组血管平滑肌钙离子水平较SHR生理盐水组明显降低.结论:大剂量黄芪注射液能显著增加SHR心肌SERCA在蛋白水平的表达,能明显的减少SHR血管平滑肌钙离子的水平.     

家兔未成熟心肌缺血再灌注肌浆网摄钙功能的初步研究

目的 :从亚细胞水平研究未成熟心肌缺血 -再灌注损伤中肌浆网 (SarcoplasmicReticulum ,SR)摄钙功能。方法 :36只家兔随机分为 4组 ,进行离体心灌注。组Ⅰ :幼兔 ,单纯灌注 30min ;组Ⅱ :幼兔 ,停搏 6 0min ,再灌注 30min。组Ⅲ、组Ⅳ为成兔 ,处理分别同组Ⅰ、组Ⅱ ,进行对照。测定各组心功能、冠状动脉流出液血气 ,单细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i) ,肌浆网Ca2 + -ATPase活性 ,肌浆网45Ca2 + 摄取。结果 :缺血 -再灌注后 ,成熟与未成熟心肌均发生钙超载 (P >0 .0 5 )。未成熟心肌肌浆网Ca2 + ATPase活性 ,肌浆网45Ca2 + 摄取恢复率 ,明显高于成熟心肌 (P <0 .0 5 )。结论 :未成熟心肌缺血 -再灌注损伤钙超载机制不同于成熟心肌 ,肌浆网钙摄取功能 ,在钙超载损伤中不起主要作用。     

缺血－再灌注兔心肌肌浆网自由基的测定

应用电子自旋共振波谱仪（ＥＳＲ）直接检测了缺血－再灌注兔心肌肌浆网自由基的变化，以探讨肌质网系统与氧自由基的关系。实验中将２０只兔随机分为再灌注对照组、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）组、ＡＴＰ－氯化镁组和人参皂甙Ｒｅ组。实验结果，ｇ值２．００４６处为半醌自由基波谱，其相对浓度各组依次为７８．９４±２．１２６，１４．４６±２．８６，２０．６５±７．６５，１４．６６±３．６７（ｘ±ＳＤ），对照组与用药组均有显著性差异（Ｐ＜０．０５），表明缺血－再灌注兔心肌肌浆网产生大量的自由基，用ＥＳＲ可以直接检测到半醌自由基，外源性高能磷酸盐制剂ＡＴＰ－氯化镁及人参皂甙Ｒｅ与超氧化物歧化酶一样，发挥清除兔心肌肌浆网自由基的作用。     

卡维地洛干预心衰对大鼠心肌细胞凋亡和肌浆网钙泵活性的影响

目的　从细胞内钙调节和细胞凋亡角度探讨卡维地洛治疗心力衰竭的机制。方法　采用结扎冠状动脉复制心力衰竭大鼠模型 ,对照观察非选择性 β 受体阻滞剂卡维地洛和α1 受体阻滞剂特拉唑嗪干预心衰对左室心肌细胞凋亡率和肌浆网钙泵 (SERCA2a)活性的影响。结果　与对照组 (C组 )相比 ,心衰组 (F组 )SERCA2a活性显著降低 (P <0 .0 1) ,心肌细胞凋亡率显著升高 (P <0 .0 1) ;特拉唑嗪组 (T组 )心肌细胞凋亡率、SERCA2a活性与F组无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;卡维地洛剂量依赖地降低心肌细胞凋亡率 ,增高SERCA2a活性。SERCA2a活性与心肌细胞凋亡率显著负相关 (r =-0 .814 ,P <0 .0 0 1) ,与 +dp/dtmax、-dp/dtmax显著正相关 (r =0 .691、0 .64 5 ,P <0 .0 0 1)。结论　SERCA2a活性异常 ,可能参与心力衰竭心肌细胞凋亡的调节。增加SERCA2a活性 ,抑制心肌细胞凋亡 ,可能是卡维地洛治疗心力衰竭的重要机制。卡维地洛的上述效应与α1 受体阻滞作用无关。     

压力负荷性左室肥厚大鼠心肌钠钙交换体和肌浆网钙泵的表达

目的 观察压力负荷性左室肥厚大鼠心功能异常及心肌钠钙交换体(NCX)和肌浆网钙泵(SERCA2a)的表达变化.方法 缩窄大鼠腹主动脉制备压力负荷性心肌肥厚模型,测定在体血流动力学及左室重量指数(LVWI),用RT-PCR和Western blot法检测左室组织NCX及SERCA2a的表达.结果 与假手术组相比,模型大鼠左室收缩压(LVSP)及左室舒张末压(LVEDP)均显著升高(P<0.01,P<0.001);左室重量指数显著增加(P<0.001)及左室NCX mRNA表达上调(P相似文献   

心肌细胞肌浆网Ca2+-ATPase与心肌功能的调控

心肌的损伤及心功能的异常都伴随着Ca2+代谢的严重障碍,而心肌细胞肌浆网(Sarcoplasmic reticulum,SR)及其Ca2+-ATP酶(Ca2+-ATPaSe)是调节钙代谢最重要的物质,了解SR、Ca2+-ATPase的结构、功能及其编码基因的表达与心肌功能的关系,对调控心功能具有重要意义.     

家兔左室心肌肌浆网Ca2+-ATP酶活性与心力衰竭后室性心律失常的关系

目的 探讨家兔左室心肌肌浆网Ca2+-ATP 酶(SERCA2a)活性与心力衰竭(心衰)后室性心律失常的关系.方法 采用主动脉瓣返流联合腹主动脉缩窄的方法制作家兔心衰模型.随机分为假手术组、假手术姜黄素组、心衰组、心衰姜黄素组.心衰姜黄素组与假手术姜黄素组给予姜黄素胶囊100 mg/(kg·d),心衰组与假手术组给予等量空白胶囊,连续给药10 周.手术10 周后行心脏彩超检测心脏结构和功能变化,对所有家兔行在体电生理检查,观察左室心尖部三层心肌单相动作电位复极90%的时程(MAPD90)并计算跨室壁复极离散度(TDR),测定心室颤动(室颤)阈值.采用差速离心法提取左室心肌肌浆网,用孔雀绿比色法检测SERCA2a 活性.结果 与假手术组相比,心衰组左室内径增大(P<0.05),左室射血分数明显降低(P<0.05),SERCA2a 活性显著减弱(P<0.05),MAPD90 延长(P<0.05),TDR增大(P<0.05),室颤阈值降低(P<0.05).与心衰组相比,心衰姜黄素组左室内径缩小(P<0.05),左室射血分数显著提高(P<0.05),SERCA2a 活性明显增强(P<0.05),MAPD90 缩短(P<0.05),TDR 减小(P<0.05),室颤阈值升高(P<0.05).假手术姜黄素组上述指标较假手术组差异无统计学意义(P>0.05).结论 左室容量和压力超负荷可成功制作家兔心衰模型,通过姜黄素提高心衰家兔SERCA2a 活性,可改善心衰心脏电生理异常,降低室性心律失常风险.     

异丙肾上腺素对心肌细胞内钙释放和肌浆网内钙容量的影响

目的 :心肌细胞膜上的 β-肾上腺素受体的激活对兴奋 -收缩耦联 （ECC）过程有重要的调节作用。本课题利用异丙肾上腺素 （ISO,1μmol/ L）激活 β-肾上腺素受体从而研究其对源自心肌细胞肌浆网的胞内钙释放 （ECC的重要环节 ）和肌浆网内钙容量的影响 ,进而分析钙释放与钙容量之间的关系。方法 :局部场刺激作用于成年大鼠心肌细胞 ,促使后者产生动作电位 ,进而诱发胞内钙瞬变 （ACT） ,由 ACT可估测胞内钙释放。肌浆网内钙容量则由咖啡因 （2 0 m mol/ L）诱发的钙瞬变 （CCT）估测。实验结果均由 Zeiss L SM- 5 10激光共聚焦显微镜系统记录。结果 :ISO作用下的 ACT峰值为 10 .2 9± 0 .35 （n=13）比正常情况下的 5 .74± 0 .2 7（n=18）高 （P<0 .0 1）。 ISO作用下的CCT峰值为 11.2 3± 0 .2 9（n=13）比正常情况下的 7.6 2± 0 .2 4 （n=18）高 （P<0 .0 1）。结论 :ISO可明显地提高心肌细胞内钙释放量和肌浆网内的钙容量。不管有无 ISO存在 ,胞内钙释放量总是只占肌浆网内钙容量的一部分。在正常情况下 ,心肌的钙释放量有较大的储备能力 ,且此储备可因β-肾上腺素受体的激活而动员。     

前胡丙素对大鼠缺血-再灌注心肌肌浆网钙泵功能及其蛋白水平的影响

目的研究前胡丙素对大鼠缺血-再灌注(I-R)心肌肌浆网钙泵(SERCA)的影响及机制。方法 24只雄性SD大鼠随机均分为正常对照组、I-R组、前胡丙素+I-R组和聚乙二醇400+I-R组。检测再灌注15min时冠状动脉流出量(CF)和冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,采用改良对硝基苯酚棕榈酸酯(p-NPP)法和Millipore过滤技术测定SERCA的活性和三磷酸腺苷依赖的SERCA45 Ca2+摄取率,Western blot法检测心肌细胞SERCA蛋白表达水平。结果与I-R组相比,前胡丙素+I-R组CF、SERCA蛋白表达量、SERCA的活性和45 Ca2+摄取率增高(P<0.01),LDH漏出量降低(P<0.01)。结论前胡丙素对离体大鼠心脏I-R损伤有保护作用,可能与其减轻I-R损伤引起的心肌SERCA功能和蛋白表达抑制有关。     

肌浆网钙ATP酶基因转导对慢性心力衰竭犬心肌蛋白质组影响的初步研究

目的 分析心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(sarcoplasmic reticulum Ca2+ ATPase 2a,SERCA2a)基因转导对慢性心力衰竭(HF)犬心肌蛋白质组的影响,探讨SERCA2a基因转导改善心功能的机制.方法 快速右心室起搏建立HF犬模型并随机分为HF组、HF+绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent pmtein,EGFP)组、HF+SERCA2a组.后两组分别向心肌内注射携带EGFP和SERCA2a基因的rAAV载体.于基因转导30 d时停止起搏后进行超声心动图和血流动力学检查并制备心室肌双向电泳蛋白样品和心肌双向电泳图谱,图像分析软件分析蛋白表达差异点,MALDI-TOF-MS数据库搜索鉴定蛋白质.结果 基因转导30 d时,HF+SERCA2a组犬的症状、超声心动图和血流动力学指标与HF+EGFP组相比有显著好转(P＜0.05);与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).挑选SERCA2a基因转导后表达量发生明显改变的10个蛋白点进行分析,经质谱鉴定分别为心肌收缩相关蛋白、线粒体能量代谢酶类和应激相关蛋白.结论 以rAAV为载体介导SERCA2a基因转导能够改善HF犬心脏的收缩和舒张功能,其可能的机制是恢复了心肌收缩相关蛋白正常表型或正常表达量,增加了心肌能量的产生,改变了应激相关蛋白的表达.