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目的:通过检测人绒癌细胞株Be Wo合体化过程中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、生存素(Survivin)蛋白表达的变化,探讨滋养细胞合体化后增殖性的变化,为恶性滋养细胞肿瘤,尤其是耐药恶性滋养细胞肿瘤的临床治疗提供新的思路和方法。方法:利用毛喉素(forskolin)诱导Be Wo细胞株融合;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测促融素(Syncytin)在forskolin作用不同时间的Be Wo细胞株中的表达;应用蛋白质印迹(Western blotting)检测PCNA、Survivin蛋白在forskolin作用不同时间的Be Wo细胞株中的表达;应用噻唑蓝比色分析实验(MTT)法检测forskolin作用不同时间的绒癌细胞株Be Wo的增殖能力。结果:1forskolin作用后的Be Wo细胞株Syncytin基因的表达增强,且随着forskolin作用时间的延长,Syncytin的表达更强,于48 h达到高峰。2forskolin作用后的Be Wo细胞株PCNA、Survivin蛋白的表达降低。3forskolin作用后的Be Wo细胞株的增殖能力下降,且不同作用时间的差异有统计学意义;forskolin作用的时间越长,Be Wo细胞株增殖能力下降越明显。结论:人绒癌细胞株Be Wo合体化后PCNA、Survivin蛋白的表达降低,说明人绒癌细胞株Be Wo合体化后增殖性降低,推测诱导滋养细胞合体化可能对临床治疗恶性滋养细胞肿瘤具有一定作用。 相似文献
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目的 优化福司氟康唑合成工艺。方法 以廉价易得氟康唑为起始原料,使用三氯氧磷进行氯磷酸酯化,之后与苄
醇进行缩合,得到中间体 c,将中间体 c 用 Pd/C 催化,以甲酸铵为氢供体,进行脱苄基,经过酸化,析晶,得福司氟康唑。结
果 总收率达 70.7%,纯度为 98.8%,产品结构经 1
H NMR 确证。结论 本文设计了一条新的合成路线,该合成过程操作简单,
起始原料便宜易得,反应条件温和,收率高,易于工业化。 相似文献
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研究福司可林在血浆和肝微粒体中的代谢性质,为临床合理用药提供参考。采用HPLC-MS/MS的检测方法,通过测定福司可林的浓度,考察福司可林在大鼠、比格犬、猕猴和人4个不同种属肝微粒体中的代谢稳定性,鉴定福司可林在人肝微粒体中代谢的主要参与酶以及对人肝微粒体中细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)各亚型酶的抑制作用。结果表明,福司可林在大鼠、比格犬、猕猴和人4个种属血浆中均不代谢;在4个种属肝微粒体中均有不同程度的代谢,其t1/2分别为(52.0±15.0)、(51.2±5.9)、(6.0±0.2)、(11.9±1.8)min;CLint分别为(75.6±18.7)、(60.9±6.8)、(513.8±14.3)、(176.2±25.6)mL.min 1.kg 1;CL分别为(34.8±4.5)、(23.3±1.0)、(40.3±0.5)、(17.9±0.3)mL.min 1.kg 1。在人肝微粒体中福司可林主要被CYP3A4代谢;福司可林在浓度为0.1 ng.mL 1~5μg.mL 1内,对人肝微粒体中CYP3A4存在竞争性抑制作用。可见,福司可林在肝微粒体中代谢消除较快,在临床上与其他被CYP3A4代谢的药物合用时应注意药物相互作用。 相似文献
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福司福沙的初步药理学研究 总被引:1,自引:0,他引:1
福司福沙在小鼠醋酸扭体法和热板刺激法中具有相似的镇痛作用;在二甲苯所致小鼠耳肿胀试验和醋酸诱发小鼠急性渗出试验中也有相似的抗炎作用。其镇痛、抗炎作用与阿司匹林均无显著差异,但对胃刺激性比阿司匹林小。小鼠口服的LD50为1875mg/kg。 相似文献
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目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号传导通路对猪卵巢颗粒细胞分泌功能的调节作用.方法 将体外培养的猪卵巢颗粒细胞分为两组,分别加入浓度为50 μmoL/L的二甲基亚砜(DMSO)和MAPK抑制剂--PD98059(PD),作用48 h后,将加入DMSO的细胞分为两组,观察1组细胞加入浓度为20μmol/L的腺苷酸环化酶激活剂,不加腺苷酸环化酶激活剂的为对照1组;将加入PD的细胞也分为两组,观察2组细胞加入浓度为20 μmol/L的腺苷酸环化酶激活剂,不加腺苷酸环化酶激活剂的为对照2组,继续作用48 h.以化学发光法测定4组细胞中睾酮、孕酮和雌二醇的水平;用RT-PCR技术检测17α羟化酶(CYP17)和细胞色素芳香酶P450的基因表达,以扩增产物的灰度比(GSR)表示.结果 (1)生贿激素水平:对照1组睾酮、孕酮、雌二醇水平分别为(29.5±2.5)nmol/L、(80±5)nmol/L、(49±4)pmol/L,对照2组分别为(42.3±3.4)nmol/L、(170±15)nmoL/L、(75±6)pmol/L,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);观察2组睾酮、孕酮、雌二醇水平分别为(106.2±7.6)nmol/L、(210±16)nmol/L、(130±11)pmol/L,观察1组分别为(47.2±3.5)nmol/L、(130±6)nmol/L、(81±6)pmol/L,两组比较,差异也有统计学意义(P<0.05);(2)酶表达变化:对照2组与对照1组比较,CYP17 mRNA表达增强50%,而芳香酶P450 mRNA表达下降20%,观察2组与观察1组比较,芳香酶P450、CYP17 mRNA表达均增强,且以CYP17 mRNA表达增强更明显,达到125%.结论 MAPK信号传导通路对猪卵巢颗粒细胞的分泌功能具有抑制作用. 相似文献
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作为英国20世纪上半叶最知名的哲学家之一,柯林武德同时也是著名的考古学家和历史学家。在两次世界大战之间,柯林武德作为考古学家继承约翰·弗朗西斯·哈弗菲尔德——罗马不列颠考古学之父、卡姆登古代史教席教授——在牛津大学的罗马不列颠考古学领导者的地位,延续哈弗菲尔德开创的研究领域。同时,作为哲学家的柯林武德,对罗马不列颠考古学研究范式的转变在哲学层面上做出反思,认为罗马不列颠考古学在哈弗菲尔德的影响下经历了培根式的革命,并由此总结出三条原则。另外,考古实践也影响了柯林武德历史哲学观念的形成,他时常以考古学的例子对历史哲学原则进行阐释。 相似文献
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人原始生殖细胞分离培养的初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】探讨分离培养人原始生殖细胞的最佳条件。【方法】用胰蛋白酶消化5~9周人流组织中的人胚生殖嵴,获取人原始生殖细胞。以小鼠胚胎成纤维细胞作饲养层,在高糖DMEM培养基中添加l0μmol/L福司克林(forskolin)和5~10μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的培养液中培养、传代,并对子代细胞进行碱性磷酸酶活性检测和体外分化实验。【结果】原代培养时形成许多大小不等,形态各异的由人原始生殖细胞组成的集落,约5~7d传代。传代后,集落生长,变大。细胞培养到第七代,检测碱性磷酸酶染色为强阳性,体外分化实验有拟胚体形成。【结论】人原始生殖细胞可以用胰蛋白酶{肖化分离培养。用高糖DMEM培养基,添加forskolin和bFGF有利于人原始生殖细胞增殖。体外分化实验初步证实人原始生殖细胞具有多向分化潜能。 相似文献
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目的:观察从植物中提取的腺苷酸环化酶直接激活剂——福司柯林对心房钠尿肽分泌的影响及其机制。
方法:实验于2004—09/2005—09在吉林省延边大学医学部基础医学院生理学与病理生理学教研部完成。取大耳白兔26只,麻醉后立即开胸取出心脏,剥离左心房后固定心房灌流装置上,并给予适宜的电刺激使其搏动。利用体外灌流搏动的家兔心房做以下实验:①待心房搏动稳定之后,经过一个对照组循环(每12min定为一个实验循环),处理福司柯林(1μmol/L)3个循环。②经过一个循环对照组之后,先处理L-型Ca^2+通道阻断剂硝苯地平(1μmol/L)或蛋白激酶非选择性抑制剂stau—rosporine(1μmol/L)3个循环,在硝苯地平或staurosporine存在下再处理福司柯林追加3个循环。以上实验均采用放射免疫技术和实时测定环-磷酸腺苷方法观察福司柯林对心房搏出量,环一磷酸腺苷逸出量及心房钠尿肽分泌的影响。
结果:①福司柯林(1μmol/L)明显抑制心房钠尿肽分泌(P<0.01),同时显著增加心房搏出量和环一磷酸腺苷逸出量(P<0.01);在一定范围内,环-磷酸腺苷生成越多心房钠尿肽分泌越受抑制,并呈现线性关系(y=-5.268 X+9.506,r^2=0.971,P<0.001)。②硝苯地平(1μmol/L)未能改变福司柯林对心房钠尿肽分泌的抑制和促进环-磷酸腺苷的生成效应(P<0.01),但显著抑制心房搏出量(P<0.01),③staurosporine+福司柯林明显增加环一磷酸腺苷逸出量(P<0.01)的同时显著抑制心房钠尿肽的分泌(P<0.01),但心房搏出量并没有受到环-磷酸腺苷生成增多的影响,且心房钠尿肽的分泌与staurosporine(第3个循环)相比并没有显著性差异。
结论:腺苷酸环化酶直接激活剂福司柯林主要通过蛋白激酶-依赖的信导拷导涂释抑制心房钠尿肽分泌。 相似文献
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福司福沙水解动力学研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用磷钼杂酸还原比色法测定了福司福沙于36、45和60℃下,在离子强度μ为0.15、pH1~11的缓冲液中的水解速度。结果表明,水解符合一级动力学,在pH5左右水解最快,在强酸或强碱条件下反而水解最慢。 相似文献