提高抗恶性疟独特型单抗克隆出现频率的方法学探讨

用Protein A-Sepharose亲和层析法提纯McAb-IgG,皮下多点和腹腔免疫雄性Wistar大鼠,间隔两周共3次,融合前3天采用腹腔、尾静脉和脾内注射等三种加强免疫方法,以间接ELISA法和抗体竞争ELISA法筛选Anti-Id阳性克隆。结果显示:融合前大鼠血清抗小鼠IgG或抗免疫原McAb-IgG滴度,静脉组和脾内组比腹腔组高一个滴度;Anti-Id阳性克隆出现频率,腹腔组为0.9％和0.3％,静脉组为11.0％和13.3％,脾内组为16.4％和12.9％,静脉组和脾内组明显高于腹腔组(P<0.01);上述三种加强免疫方法对抗小鼠IgG阳性克隆出现频率无明显影响(P>0.05);与腹腔加强免疫组相比,静脉和脾内加强免疫组也可提高细胞融合效果(P<0.01).本实验结果提示,腹腔和皮下多点多次长程基础免疫结合静脉或脾内加强免疫是制备Anti-Id McAb比较好的免疫方案。     

基因免疫诱导9.1C3分子因影像类抗独特型抗体的产生

本文分别采用真核表达载体ｐＥＦ－ＢＯＳ及ｐＣＭＶ４构建含起始码和终止码的抗９．１Ｃ３分子单隆抗全重链可变区基因重组表达质粒９．１Ｃ３ＶＨｐＥＦ－ＢＯＶ及９．１Ｃ３ＶＨｐＣＭＶ４，并将其分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取免疫小鼠血清对Ｋ５６２细胞进行间接免疫染色和流式细胞仪表明，其因免疫小鼠体内可诱导９．１Ｃ３分子内影像８类抗独特型抗体的产生。     

日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30的模拟抗原在成虫,虫卵？…

应用免疫组化和免疫电镜技术观察了日本血吸虫单克隆ａｎｔｉ－ａｎｔｉ－ｉｄ ＮＰ３０的模拟抗原在成虫、虫卵的分布和定位。单克隆ａｎｔｉ－ｉｄＮＰ４１作为第一抗体。实验结果表明，ＮＰ３０的模拟抗原定位于成虫的体膜、消化管上皮、子宫内膜上皮及虫卵的卵膜。提示ＮＰ３０的模拟抗原具有其共同抗原的特性，ＮＰ３０具有作为抗病疫苗候选分子的潜能。     

多抗F（ab＇）_2－ELISA测定人血清抗TG－Ab_2及意义

为了克服单抗测定甲状腺球蛋白独特型抗体（抗ＴＧ－Ａｂ＿２）的局限性，便于常规检测，我们建立了兔抗ＴＧ多克隆抗体的Ｆ（ａｂ＇）＿２－ＥＬＩＳＡ测定人血清中的抗ＴＧ－Ａｂ＿２．结果其抗ＴＧ－Ａｂ＿２阳性率：甲亢（Ｇｒａｖｅ＇３）为９．９％（７／７１），桥本氏甲状腺炎为４４．４％（４／９），甲状腺瘤为１６．７％（３／１８），ＳＬＥ为９．５％（４／４２），类风湿性关节炎为０％（０／３２），正常人为０％（０／３５）。     

一次细胞融合制备分泌抗狂犬病毒单抗杂交瘤及分泌抗独特型单抗杂交瘤的实验研究

根据独特型与抗独特型的免疫网络与免疫调节学说，利用狂犬病毒作为免疫原，设计了不同的动物免疫方案，免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，免疫脾细胞与骨髓瘤细胞经一次融合，同时获得了分泌抗狂犬病毒单克隆抗体杂交瘤及分泌狂犬病毒抗独特型单克隆抗体杂交瘤，为抗独特型抗体的制备开辟了一条简捷经济的途径。     

抗聚合人血清白蛋白的抗独特型抗体

一种针对兔抗聚合人血清白蛋白抗体(anti-PHSA,Ab_1)的抗独特型抗体(anti-anti-PHSA,Ab_2),已通过免疫同种动物制成。该Ab_2具有以下特性:(1)它既可与兔anti-PHSA反应,也可与鼠的单克隆的anti-PHSA反应。(2)它与鼠的单克隆的anti-PHSA的反应,可受到PHSA和乙型肝炎病毒(HBV)上的聚合人血清白蛋白受体(PHSA-R)的抑制。(3)它可在异种动物体内诱导产生具有anti-PHSA活性的抗-抗独特型抗体(anti-anti-anti-PHSA,Ab_3),而且在收获的Ab_2血清中也查见了Ab_3。本研究不仅表明了针对PHSA的免疫应答中独特型网络调节的客观存在,而且在其抗独特型抗体(anti-Id)中,的确存在具有PHSA内映像的成分。     

分泌肾综合征出血病热毒单克隆抗独特型抗体的杂交瘤细胞系的建立

将HFRS病人Ab_1免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞融合,制备了HFRSV的McAb_2。初期融合试验中用ELISA间接法检测阳性克隆,阳性率为3.2～7.4％。其中5株杂交瘤经克隆化后阳性率达到100％。特异性鉴定表明,5种McAb_2只与HFRS病人Ab_1结合,不与正常人Ig结合。McAb_2所识别的独特型是人Ab_1与部分小鼠抗HFRSV的McAb上的交叉反应独特型。本文还应用McAb_2作为探针,对抗HFRSV的单克隆抗体的独特型进行了分析。     

日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30诱导保护性免疫

作者应用正交设计观察了单克隆抗独特型抗体NP30主动免疫诱导的保护性免疫力。对照组接种SP2/0 腹水。实验结果表明,根据不同的免疫方案,NP30主动免疫可产生22.36％～50.46％的减虫率,并确定了最优化免疫方案。本文提示NP30主动免疫对尾蚴攻击可产生一定的保护力,具有血吸虫疫苗候选分子的潜能。